大规模制备注射用中期因子反义寡核苷酸纳米脂质体的方法技术

大规模制备注射用中期因子反义寡核苷酸纳米脂质体的方法，本发明专利技术将阳离子脂质和磷脂的脂质混合物溶解于有机溶剂中，得到脂质溶液，然后用超声仪对脂质体进行初步分散，并通过超滤除去有机溶剂，最后在高压下用挤压器挤压统一粒径，得到空白的纳米脂质体；然后和MK-ASODN溶液混合得到MK-ASODN纳米脂质体，根据本发明专利技术生产的注射用中期因子反义寡核苷酸纳米脂质体，粒径在100～500nm之间，性质稳定，抗肝癌作用显著增强。本工艺过程简单，容易实现，且非常容易放大，适合于工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于抗肝癌药物制备
，涉及大规模制备中期因子反义寡合苷酸纳米脂质体的方法。
技术介绍
原发性肝细胞癌(hepatoceIlular carcinoma, HCC)是一种高侵袭性、高转移性的实体恶性肿瘤，但还缺乏理想的治疗方法。 中期因子(midkine，MK)是一个新发现的促血管生成因子，它是一种具有促细胞转化、促有丝分裂作用、促肿瘤血管生成、抗细胞凋亡和增强纤维蛋白溶解等肿瘤形成相关活性的碱性肝素结合性蛋白质，仅在胚胎中期和成年肾脏表达。已有的研究表明，在肝癌等许多人类肿瘤组织中MK mRNA及蛋白均呈高度表达，而各种正常组织仅有低水平表达或无表达，并与肝癌的发生、浸润转移，血管生成及预后密切相关，而血管生成是肝癌无限制侵袭，生长和转移的基础。因此，MK可能是抗血管生成治疗肝癌的理想靶位。反义寡合苷酸是具有专一序列的寡聚脱氧核苷酸，能特异阻断靶基因的复制、转录和翻译，是基因治疗的一种方法。我们筛选的中期因子反义寡核苷酸(MK-AS0DN序列CCCCGGGCCGCCCTTCTTCA)已经证实在体内外具有明显的抗肝癌作用，有希望成为一种新的肝癌治疗靶点。但是，由于反义本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大规模制备注射用中期因子反义寡核苷酸纳米脂质体的方法，其特征在于该方法包括以下步骤：?（1）制备脂质溶液：该脂质溶液是由包含二油酰磷脂酰乙醇胺（DOPE）和3?β?[N?（N’,N’?二甲基氨基乙基）]氨甲酰基胆固醇（DC?Chol）的原料溶解到有机溶剂中，搅拌至溶液澄清透明，有机溶剂的用量使阳离子脂质和磷脂恰好完全溶解，得脂质溶液，溶液温度为20~60℃，上述原料摩尔百分比组成为：二油酰磷脂酰乙醇胺（DOPE）5?95%、3?β?[N?（N’,N’?二甲基氨基乙基）]氨甲酰基胆固醇（DC?Chol）95?5%；（2）采用交叉流技术使脂质溶液与水化溶剂按体积比1：50～3：17混合，混合后...

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：戴利成，钟婧，
申请(专利权)人：湖州市中心医院，
类型：发明
国别省市：