用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)疫苗的重组蛋白HF2及制备方法和应用技术

技术编号:8448213 阅读:233 留言:0更新日期:2013-03-21 00:47
本发明专利技术公开了重组融合蛋白HF2,该蛋白由金黄色葡萄球菌alpha溶血素(Hla)与纤维连接蛋白结合蛋白(FNBA)片段组成,其中,Hla与FNBA通过连接肽融合。该蛋白可应用于制备抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染的亚单位疫苗以及相关的检测试剂盒。本发明专利技术采用基因工程技术重组表达此融合蛋白,不仅表达量高便于分离纯化而且高效安全。动物试验证明可有效刺激机体产生较高的体液免疫应答和良好的免疫保护作用。

【技术实现步骤摘要】
用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)疫苗的重组蛋白 HF2及制备方法和应用
本专利技术属于生物
,特别涉及一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌alpha溶血素无毒突变体与纤连蛋白结合蛋白A活性片段的重组蛋白HF2,本专利技术进一步涉及该重组蛋白的制备方法及其在制备疫苗和检测试剂盒中的应用。
技术介绍
金黄色葡萄球菌能导致人体产生广泛的疾病,如菌血症,心内膜炎,毛囊炎,疔, 疖,痈,脓疱病,蜂窝(组)织炎,葡萄状菌病,毒性休克综合症,中枢系统感染,感染性眼部炎性疾病,骨髓炎,骨及关节感染,呼吸系统感染等,给人类健康带来极大的威胁。而由于该菌的多重抗生素耐药性使得局面更加难以控制,治疗手段的选择越来越少。免疫学手段被寄以厚望用以控制金黄色葡萄球菌尤其耐甲氧西林金黄色葡萄球的感染及传播。免疫策略可以分为主动免疫与被动免疫,被动免疫用靶向金黄色葡萄球菌的抗体进行,主动免疫通过选择合适的抗原促使机体产生免疫反应。合适的多糖及多肽都可以作为抗原构成疫苗的有效组分。如多糖CP5,CP8被Nabi公司用作疫苗组分;蛋白IsdB 被Merck公司用作疫苗组分。Hla是一个在大多数临床分离株上都表达的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种重组蛋白HF2,其特征在于:该蛋白由金黄色葡萄球菌alpha溶血素(Hla)与纤维连接蛋白结合蛋白(FNBA)片段组成,其中,Hla与FNBA通过连接肽融合。

【技术特征摘要】
1.一种重组蛋白HF2,其特征在于该蛋白由金黄色葡萄球菌alpha溶血素(Hla)与纤维连接蛋白结合蛋白(FNBA)片段组成,其中,Hla与FNBA通过连接肽融合。2.根据权利要求I所述的重组蛋白HF2,其特征在于,该重组蛋白具有SEQID NO: I所示的核酸序列及SEQ ID NO: I所示的氨基酸序列。3.根据权利要求I所述的重组蛋白HF2,其特征在于,所述连接肽为Linker,该连接肽为-(Linker) n_,其中 Linker 为 GGGGS 或 GGSGG 或 YAPVDV,η 为 1-4,优选 Linker 为 GGGGS,η为I。4.根据权利要求I所述的重组蛋白HF2,其特征在于所述Hla为第110-150缺失的突变体Hla(delta 110-150)或Hla(H35L, deltall0-150),优选为 Hla(H35L, deltall0-150)。5.根据权利要求4述的重组蛋白HF2,其特征在于所述Hla为第110-150缺失的突变体Hla (H35L, deltal 10-150)的金黄色葡萄球菌alpha溶血素全毒素Hla,其DNA序列如SEQ ID NO:3所示,氨基酸序列如SEQ ID N0:4所示。6.根据权利要求I所述的重组蛋白HF2,其特征在于所述FNBA为金黄色葡萄球菌纤维连接蛋白结合蛋白膜外区,其DNA序列如SEQ ID NO:5所示,氨基酸序列如SEQ ID NO:6所示。7....

【专利技术属性】
技术研发人员:冯强邹全明曾浩樊绍文卢陆董衍东鲁东水吴翼蔡昌芝
申请(专利权)人:重庆原伦生物科技有限公司中国人民解放军第三军医大学
类型:发明
国别省市:

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