检测三甲氧苄氨嘧啶的胶体金试纸条制造技术

本实用新型专利技术提供了一种检测三甲氧苄氨嘧啶的胶体金试纸条，包括冻干有三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体-胶体金标记物的微孔试剂条和检测试纸，检测试纸由底板、附着在底板上依次紧密相连的样品吸收垫、反应膜、吸水垫和保护膜组成，所述反应膜上具有包被有三甲氧苄氨嘧啶-载体蛋白偶联物构成的检测线印迹“︱”和包被羊抗鼠抗抗体构成的质控线印迹“︱”。本实用新型专利技术试纸条具有便携性好，灵敏度高，检测时间短等特点，可以在三甲氧苄氨嘧啶残留检测中发挥重要作用。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本技术涉及一种检测三甲氧苄氨嘧啶的胶体金试纸条，特别是检测牛奶中三甲氧苄氨嘧啶的试纸条，属于免疫学范畴。
技术介绍
三甲氧苄氨嘧啶别名磺胺增效剂，抗菌增效剂，甲氧苄胺嘧啶，三甲氧苄二氨嘧唳，英文名Trimethoprim(Synaprim, TMP)。化学名称为5_-2, 4- U密P定二胺，属于二氨嘧啶类(亦即苄氨嘧啶类)化合物。本品由Hitclings *G *H等于1959年合成，国内于1972年开始生产，主要由关键中间体3，4，5-三甲氧基苯甲醛(TMB)经缩合、环合反应而得，目前国内已有许多药厂生产。·磺胺增效剂为白色或类白色结晶性粉末，无臭、味苦。在氯仿中略溶，在乙醇或丙酮中微溶，在水中几乎不溶，在冰醋酸中易溶。本品的熔点为199 203°C。磺胺增效剂属抑菌剂，亲脂性弱碱，临床上其注射剂为微黄色或者无色。它是一种抗菌增效剂，磺胺类药物单独使用，会使细菌很易产生耐药性，与磺胺类药物组成复方制剂，可使细菌的叶酸代谢受到双重阻断，使抗菌谱扩大、抗菌活性增强，从抑菌作用变为杀菌作用，对多数革兰氏阳性菌和阴性菌有效，在兽医临床上应用十分广泛。用于治疗尿路感染、呼吸道感染、菌莉和肠炎等一般用作磺胺类药物的增效剂，广泛用于各类磺胺制剂中，最近的研究表明，磺胺增效剂对青霉素类、氨基糖苷类等其它抗生素和合成抗生素均有一定的增效作用，故又称为广谱抗菌增效剂。因其水溶性差，现一般仅与磺胺类药联用作为口服制剂应用于临床，也因而大大限制了其在临床的应用范围和其它给药途径。磺胺增效剂可发生瘙痒、皮疹，临床也有发现服用头孢羟氨苄/TMP致过敏性休克的报道，也有发生恶心、呕吐、腹泻等胃肠道反应。磺胺增效剂对小白鼠的半数致死量(LD5tl)为2500毫克/千克体重。大剂量使用时,可影响叶酸代谢和作用,可致白细胞减少和血小板减少，故长期使用时必须注意。为了保护人类健康，各国对动物源性食品中甲氧苄氨嘧啶残留量的检测很重视，均制定了严格的限量要求。例如欧盟、香港政府规定牛、猪和家禽组织中残留限量为0.05mg/kg。我国农业行业标准《无公害食品水产品中渔药残留限量》(NY 5070-2002)中规定了以磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺甲噁唑4种药物按总量计最大残留限量为100 u g/kg，甲氧苄啶最大残留限量为50 u g/kg。目前磺胺类及其增效剂残留的测定方法有高效液相色谱法配合紫外检测器、荧光检测器和质谱检测器，但大多采用国外产的净化小柱处理样品，增加了测定成本。目前尚无关于磺胺类药物增效剂的系统检测方法，该方法的建立为监控动物源性食品中磺胺类药物增效剂残留提供了技术支持。
技术实现思路
本技术的目的提供一种灵敏度高、成本低、操作简单、检测时间短的检测三甲氧苄氨嘧啶的试纸条。本技术的试纸条，包括冻干有三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体-胶体金标记物的微孔试剂条和检测试纸，检测试纸条由底板、附着在底板上依次紧密相连的样品吸收垫、反应膜、吸水垫和保护膜组成，所述反应膜上具有包被有三甲氧苄氨嘧啶-载体蛋白偶联物构成的检测线印迹“ I ”和包被羊抗鼠抗抗体构成的质控线印迹“ I ”。检测线和质控线平行，均呈与检测试纸的长切面相垂直的条带状。检测线位于距离样品吸收垫一侧5 8mm，所述质控线位于距离检测线r7mm，试纸条两端贴有保护膜，覆盖在吸水端上的为手柄端，覆盖在样品吸收垫上的为检测端，检测端保护膜上有MAX标记线，微孔试剂条的反应孔上具有胶塞。为了便于运输和使用，试纸条盛装于具有密封盖的试剂桶中，试剂桶放置于具有固定用具的盒体中。 本技术试纸条中试纸条底板可为PVC底板；样品吸收垫可为吸滤纸或滤油纸；吸水垫为吸水纸；反应膜可为硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜；保护膜为PE材质保护膜；试剂桶为塑料试剂桶；固定用具为硬质支撑材料；盒体为硬纸盒。本技术试纸条具有如下有益效果I.灵敏度高。三甲氧苄氨嘧啶检测试纸条以胶体金标记高亲和力的单克隆抗体为基础制备而成，金标抗体中金颗粒与抗体分子之间无价健形成，二者通过异性电荷间的范德华力相结合，胶体金对单克隆抗体特异性和亲和力影响很小，且具有较高的标记率。其中的三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体-胶体金标记物冻干在微孔试剂条中，在检测过程中，能够使金标抗体与待检样品液充分接触，充分反应，从而减少误差，增加整个体系的反应灵敏度。因此，本技术试纸条具有较高的特异性和灵敏度。本试纸条对三甲氧苄氨嘧啶检测灵敏度为50iig/L。2.操作简便快速。使用试纸条检测时无需任何其它试剂，只要将待检样品溶液滴加于微孔试剂中，混匀后，孵育5min，将试纸标有MAX线标记端向下，插入孵育后的微孔试剂后计时，5min内观察结果。3.显示检测结果形象、直观准确。检测是试纸条以显示红线色“ I ”及“ I I ”印迹作为阳性和阴性标记，即在硝酸纤维素膜上显示一条红线“ I ”印迹表示在被检测样本液中三甲氧苄氨嘧啶的含量高于等于试纸条对三甲氧苄氨嘧啶药物的最低检测限，两条红线“ I I ”印迹表示在被检测样本中三甲氧苄氨嘧啶含量低于试纸条对三甲氧苄氨嘧啶药物的最低检测限，结果判定形象、直观、准确、简单明了，不容易出现结果误判。4.成本低，投资少。使用本技术试纸条，不需另配仪器设备及其他试剂，使现场检测一步到位，成本低廉，投资少，见效快。5.易于大范围推广应用。试纸条操作简单，能较好满足不同层次人员的需要，如专业化验、海关检疫、卫生防疫、质量监测、乳业企业等，具有广阔的市场前景和较大的经济、社会效益。附图说明图I为本技术试纸结构示意图；图2为本技术试纸俯视图；图3为本技术微孔试剂图图4为本技术试纸检测结果判定图。图5为本技术试剂桶结构示意图；图6为本技术固定用具的俯视图； 图7为本技术盒体与固定用具的侧视图。具体实施方式一、三甲氧苄氨嘧啶检测试纸的组装制备I)试纸样品吸收垫I、反应膜2、吸水垫3和保护膜依次按顺序黏贴在所述底板6上，样品吸收垫的末端与反应膜始端相连，反应膜的末端与吸水垫相连，样品吸收垫的始端与底板的始端对齐，吸水垫的末端与底板的末端对齐，试纸两端黏贴有保护膜，保护膜7-1覆盖在吸水垫上手柄端，保护膜7-2覆盖在样品吸收垫的检测端，在检测端保护膜上印有MAX标记线，检测线4包被有三甲氧苄氨嘧啶-载体蛋白偶联物，质控线5包被有羊抗鼠抗抗体。底板为PVC底板，样品吸收垫为吸滤纸，反应膜为硝酸纤维素膜，吸水垫为吸水纸，保护膜为PE材质保护膜。2)微孔试剂条微孔试剂条8具有胶塞9，板孔中冻干有三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体-胶体金标记物。3)将I)试纸条和2)微孔试剂条装入具有密封盖的塑料试剂桶10，将塑料试剂桶放置于试纸条盒体12内的固定用具11中。二、试纸条的使用待检牛奶样品溶液滴加200 U I到微孔试剂中，混匀后，孵育5min，将试纸标有MAX线标记端向下，插入孵育后的微孔试剂后计时，5min内观察结果。三、检测结果分析三甲氧苄氨嘧啶在样本中的含量高于等于试纸条对其的最低检测限时，三甲氧苄氨喃唳单克隆-胶体金标记物与三甲氧节氨喃唳结合，金标抗体上的抗原结合位点被封闭，从而在检测区内因为竞争反应，不会与三甲氧苄氨嘧啶-载体蛋白偶联物结合而不出现红色条带。阴性本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测三甲氧苄氨嘧啶的胶体金试纸条，其特征在于包括冻干有三甲氧苄氨嘧啶单克隆抗体?胶体金标记物的微孔试剂条和检测试纸，检测试纸由底板、附着在底板上依次紧密相连的样品吸收垫、反应膜、吸水垫和保护膜组成，所述反应膜上具有包被有三甲氧苄氨嘧啶?载体蛋白偶联物构成的检测线印迹“︱”和包被羊抗鼠抗抗体构成的质控线印迹“︱”。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：万宇平，付军权，罗晓琴，石洁，韩京朋，王娇，杨昌松，郝士元，
申请(专利权)人：北京勤邦生物技术有限公司，
类型：实用新型
国别省市：