一种基于酶促氨基水解反应的三聚氰胺比色检测方法技术

技术编号:8386315 阅读:159 留言:0更新日期:2013-03-07 06:05
本发明专利技术涉及一种基于酶促氨基水解反应的三聚氰胺比色检测方法。具体地,本发明专利技术提供了一种定量检测样品中三聚氰胺的方法,包括步骤:样品纯化、酶解反应、显色反应、和绘制标准曲线等。该方法测试过程简单、快速、易操作,不需要复杂的专用设备及专业的技术人员,测试结果直观清楚,可直接进行目测判断,也可精确定量,重复性高,不易受杂质干扰,还可有效富集低含量样品中的三聚氰胺,且符合高通量测试的条件,满足了国内一般消费者对三聚氰胺简便检测的需求。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及检测领域,具体地涉及。
技术介绍
三聚氰胺(Melamine),结构如式I化合物所示,是一种三嗪类含氮杂环有机化合物,化学式为C3H6N6,俗称密胺、蛋白精。NH2 N入N I 人人1-feN N' Nl-t三聚氰胺是一种重要的化工原料,用于制造塑料。但是它具有毒性,不允许用作食品添加剂。当三聚氰胺被长期反复摄入后,会造成严重的肾脏和膀胱的损伤,有时候这种损伤是致命的。但是由于三聚氰胺价格低廉,高氮含量,导致它被非法的加入到食品和饲料中来虚假的提高蛋白质含量,比如婴儿奶粉,牛奶,以及其他食品中。随着国家对食品安全问题的关注和近年来中国奶业的三聚氰胺丑闻发生,三聚氰胺问题成为影响乳和乳制品安全的重要因素之一。目前,国内发布了国家标准GB/T22388-2008《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》,该标准包括了三种检测方法高效液相色谱法、液相色谱-质谱/质谱法和气相色谱-质谱联用法。虽然这些国家标准所介绍的方法适用于对不同对象和样品浓度的检测,但测试时都需要昂贵的实验室设备和专业技术人员对样品进行繁琐处理和分析,并且以上方法每台仪器一次只能测量一个样品,难以进行大量样品的高通量检测。因为价格和通量的问题,以上方法只能对有限的样品进行比较精确的测量。此外,本领域尚缺乏高通量的、检测低浓度或极低浓度三聚氰胺的、且操作简便的检测方法。因此,本领域迫切需要研发一种样品处理、测试过程简单易操作,测试结果分析简易,且能满足高通量测试需求的三聚氰胺的检测方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是一种三聚氰胺的检测方法,该方法具有样品处理、测试过程简单易操作,测试结果分析简易且能满足高通量测试需求的特点。本专利技术的另一目的是提供一种适合检测低浓度或极低浓度三聚氰胺的、且操作简便的检测方法。本专利技术提供了一种定量检测待测样品中三聚氰胺的方法,包括步骤(I)将液态的含三聚氰胺的样品上样于阳离子柱,并用含氨水的醇溶液为洗脱液进行洗脱,得到含三聚氰胺的洗脱液;(2)去除含氨水的醇溶液,得到经浓缩的三聚氰胺;(3)将浓缩的三聚氰胺溶解在惰性溶剂中,在氨基水解酶的催化下反应,得到含式II化合物和氨的溶液;权利要求1.一种定量检测待测样品中三聚氰胺的方法,其特征在于,包括步骤 (1)将液态的含三聚氰胺的样品上样于阳离子柱,并用含氨水的醇溶液为洗脱液进行洗脱,得到含三聚氰胺的洗脱液; (2)去除含氨水的醇溶液,得到经浓缩的三聚氰胺; (3)将浓缩的三聚氰胺溶解在惰性溶剂中,在氨基水解酶的催化下反应,得到含式II化合物和氨的溶液;2.如权利要求I所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述反应时间为5-40min。3.如权利要求I所述的方法,其特征在于,在步骤(4)中,包括步骤将测定的氨摩尔浓度或摩尔数按I:I比例换算为酶解反应之前的三聚氰胺的摩尔浓度或摩尔数。4.如权利要求I所述的方法,其特征在于,在步骤(4)中,通过比色法测得的吸光度与标准品或标准曲线比较,从而换算得到样品中三聚氰胺的含量或浓度。5.如权利要求I所述的方法,其特征在于,所述含氨水的醇溶液包括含氨水的甲醇溶液、含氨水的乙醇溶液、或其组合。6.如权利要求I所述的方法,其特征在于,所述含氨水的醇溶液中氨水与醇的体积比例为I : 100-1 5,并且氨水的氨浓度为15wt%至饱和浓度。7.如权利要求I所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,通过氮气吹干或者烘干去除含氨水的醇溶液。8.如权利要求I所述的方法,其特征在于,所述步骤(I)中液态的含三聚氰胺的样品是经酸化处理的。9.如权利要求I所述的方法,其特征在于,所述待测样品为饮料、食物、饲料、土壤、水源、或其组合。10.如权利要求I所述的方法,其特征在于,所述待测样品中,三聚氰胺的浓度为O.001-100ppm。全文摘要本专利技术涉及。具体地,本专利技术提供了一种定量检测样品中三聚氰胺的方法,包括步骤样品纯化、酶解反应、显色反应、和绘制标准曲线等。该方法测试过程简单、快速、易操作,不需要复杂的专用设备及专业的技术人员,测试结果直观清楚,可直接进行目测判断,也可精确定量,重复性高,不易受杂质干扰,还可有效富集低含量样品中的三聚氰胺,且符合高通量测试的条件,满足了国内一般消费者对三聚氰胺简便检测的需求。文档编号G01N21/78GK102954959SQ201110251219公开日2013年3月6日 申请日期2011年8月29日 优先权日2011年8月29日专利技术者周佳海, 黄维雪, 张志民 申请人:中国科学院上海有机化学研究所本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种定量检测待测样品中三聚氰胺的方法,其特征在于,包括步骤:(1)将液态的含三聚氰胺的样品上样于阳离子柱,并用含氨水的醇溶液为洗脱液进行洗脱,得到含三聚氰胺的洗脱液;(2)去除含氨水的醇溶液,得到经浓缩的三聚氰胺;(3)将浓缩的三聚氰胺溶解在惰性溶剂中,在氨基水解酶的催化下反应,得到含式II化合物和氨的溶液;(4)通过比色法检测上述溶液中氨的浓度,从而换算得出所述待测样品中三聚氰胺的含量或浓度。FDA0000087058000000011.tif

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:周佳海黄维雪张志民
申请(专利权)人:中国科学院上海有机化学研究所
类型:发明
国别省市:

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