用于检测结核分枝杆菌的实时荧光定量PCR方法、引物、探针及试剂盒技术

本发明专利技术公开了一种用于检测结核分枝杆菌的实时荧光定量PCR方法，包括步骤：1)采集患者痰液样本并进行处理；2)提取样本的DNA；3)以标准菌株的DNA为阳性对照，灭菌水为阴性对照，进行样本DNA的实时荧光定量PCR反应；4)根据反应得到的Ct值判断样本的检测结果，并计算样本中结核分枝杆菌的拷贝数。本发明专利技术还公开了上述检测方法所用的引物和探针以及包含该引物和探针的试剂盒。该检测方法简便、快速且特异性高，可以实现临床痰液样本中结核分枝杆菌的快速定量检测，从而有助于疾病的预防和及时治疗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物医学领域，特别是涉及一种用于检测结核分枝杆菌的荧光定量PCR方法。本专利技术还涉及用于该方法的引物和探针，以及包含该引物和探针的试剂盒。
技术介绍
结核病是全球面临的主要公共健康问题之一，是引起成年人死亡的主要传染源，尤其是近年来，由于大规模人口流动及细菌本身耐药性的产生，结核病的发病率有回升的趋势。结核分枝杆菌(MTB)是结核病的病原体，目前对MTB的诊断主要采用实验室诊断与临床体征相结合的方法。实验室诊断主要包括涂片染色法、细菌培养法、抗原抗体检测、PCR等方法。其中，病人组织或体液标本的细菌培养是目前检测结核分枝杆菌的金标准，但其缺点是检测周期较长(需要8周)，难以实现致病菌的快速检测，因此在临床上很容易贻误病情，不利于早期治疗。抗原抗体检测通常采用ELISA(酶联免疫吸附试验)法，该方法具有操作简单、价格低廉的优点，但在检测特异性和灵敏度方面还有待提高。随着分子生物学的发展，PCR技术已成为目前常见的实验手段，特别是实时荧光定量PCR，因具有技术成熟、灵敏度高、操作简单和特异性好的优点，已被逐步应用到临床上。同时，利用基因芯片在细菌耐药性方面的应用，近几年本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于实时荧光定量PCR检测结核分枝杆菌的引物对，其特征在于，该引物对包括上游引物和下游引物，所述上游引物具有如SEQ?ID?No：1所示的序列或其互补链，或这两个序列向5’端方向延伸10个碱基范围内得到的序列或其互补链；所述下游引物具有如SEQ?IDNo：2所示的序列或其互补链，或这两个序列向3’端方向延伸10个碱基范围内得到的序列或其互补链。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张春秀，朱建民，陈金丝，周颖，周佳菁，李先茜，肖华胜，
申请(专利权)人：上海生物芯片有限公司，上海伯豪生物技术有限公司，上海市徐汇区中心医院，
类型：发明
国别省市：