一种用于与捕获抗体偶联后磁珠的封闭剂及其制备方法和用途技术

本发明专利技术提供一种在双抗夹心法中，用于与捕获抗体偶联后磁珠的封闭剂及其制备方法和用途。所述封闭剂包括如下原料组分：以封闭剂的总质量为基准计，稳定剂的含量为2～5wt％，表面活性剂的含量为0.01～0.1wt％，防腐剂的含量为0.01～0.2wt％，余量为缓冲液。本申请制备得到的封闭剂在用于人炎症相关的生物标志物进行分析检测时，封闭效果好，应用检测时荧光信号值高、灵敏度好。此外，本发明专利技术提供的封闭剂成本低、操作简单、性质稳定。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物蛋白检测，特别是涉及一种在双抗夹心法中，用于与捕获抗体偶联后磁珠的封闭剂及其制备方法和用途。

技术介绍

1、现今，使用特异性抗体对检测某一特定蛋白质的检测技术已广泛应用于蛋白表达水平的研究，其中最常用的是基于双抗夹心法的elisa技术以及基于elisa双抗夹心原理衍生出的各种蛋白检测技术。在双抗夹心法中，磁珠可以作为双抗夹心结构中捕获抗体的载体，具体地，双抗夹心法的具体原理是：将磁珠偶联上针对特定检测物的捕获抗体，在检测靶分子时，将磁珠与微量待检样本混合，在悬液中将靶分子与磁珠表面偶联的捕获抗体进行特异性地结合，同时，荧光标记的检测抗体也会与靶分子结合，最终形成带有荧光标记的双抗夹心结构。用流式细胞仪等进行分析时，仪器通过激光识别磁珠上报告分子的荧光强度，进而得知靶分子的表达水平。

2、封闭是指使用溶液再包被被抗体偶联的磁珠的过程。在捕获抗体偶联磁珠时，所用的抗体浓度较低，因此磁珠表面尚有未被占据的空隙，封闭过程可以让与检测无关的蛋白质充填磁珠上的这些空隙，从而避免其他干扰物质的吸附。不合适的封闭剂会造成检测过程中出现假阳性的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于与捕获抗体偶联后磁珠的封闭剂，其特征在于，包括如下原料组分：以封闭剂的总质量为基准计，稳定剂的含量为2～5wt％，表面活性剂的含量为0.01～0.1wt％，防腐剂的含量为0.01～0.2wt％，余量为缓冲液。

2.根据权利要求1中所述的封闭剂，其特征在于，所述缓冲液包括磷酸盐缓冲液、Tris-盐酸缓冲液、2-(N-吗啉)乙磺酸缓冲液、3-吗啉丙磺酸缓冲液、磷酸盐缓冲液和4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液中的一种或多种；

3.根据权利要求1中所述的封闭剂，其特征在于，所述稳定剂包括牛血清白蛋白、Prionex和酪蛋白中的一种或多种；

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【技术特征摘要】

1.一种用于与捕获抗体偶联后磁珠的封闭剂，其特征在于，包括如下原料组分：以封闭剂的总质量为基准计，稳定剂的含量为2～5wt％，表面活性剂的含量为0.01～0.1wt％，防腐剂的含量为0.01～0.2wt％，余量为缓冲液。

2.根据权利要求1中所述的封闭剂，其特征在于，所述缓冲液包括磷酸盐缓冲液、tris-盐酸缓冲液、2-(n-吗啉)乙磺酸缓冲液、3-吗啉丙磺酸缓冲液、磷酸盐缓冲液和4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液中的一种或多种；

3.根据权利要求1中所述的封闭剂，其特征在于，所述稳定剂包括牛血清白蛋白、prionex和酪蛋白中的一种或多种；

4.一种如权利要求1～3任一项所述的用于与捕获抗体偶联后磁珠的封闭剂的制备方法，其特征在于，将所述缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂按比例混合得到所述封闭剂。

5.一种如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：李倩，欧莹，徐祎春，李曼婧，韩峻松，袁箐，
申请(专利权)人：上海生物芯片有限公司，
类型：发明
国别省市：