一种白酒酿造微生物的高质量DNA提取方法技术

本发明专利技术涉及一种白酒酿造微生物高质量DNA提取方法。其特征在于：⑴通过对样品进行简单前处理后获得菌体混合物；⑵向混合物中加入DNA提取液、各种酶液、SDS及蛋白酶K等使菌体中的DNA充分释放；⑶加入酚：氯仿：异戊醇及氯仿：异戊醇抽提除去杂蛋白以纯化DNA；⑷异丙醇在低温下沉淀DNA，无水乙醇洗涤，获得高质量的微生物基因组总DNA。本发明专利技术具有的优点是所用试剂均为常规试剂，成本低廉，适用范围广、操作简单、条件温和、提取的DNA纯度较高，无需对基因组DNA进行纯化即可进行后续PCR扩增及DGGE分析等优点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及白酒微生物群落生态
，具体是一种用于白酒酿造微生物群落结构分析的高质量DNA提取方法。
技术介绍
中国白酒有着悠久的酿造历史，而且中国白酒的酿造工艺不尽相同，中国白酒的酿造生产以大曲作为微生物及酶的主要来源，在实际生产中，大曲质量的优劣关系到白酒的出酒率及酒的品质。在大曲的生产过程中伴随着一系列微生物此消彼长的驯化过程，大曲当中微生物的群落结构直接关系到大曲的生产质量。中国白酒主要以窖池及酒醅等作为生产基础，环境、大曲及窖泥当中的微生物进行着复杂的能量代谢和物质代谢，微生物复杂的代谢过程也是白酒风味前体物质的形成过程，研究不同工艺生产的大曲、同一大曲制曲过程及窖泥中微生物的群落差异及变迁，对于大曲及白酒的生产具有一定的指导意义。与本专利技术相关的技术有DNA提取方法和DNA提取试剂盒等，有如专利申请号为201210107413. O记载了一种大曲酒窖泥微生物总DNA提取的前处理方法，包括以下步骤(I)称取适量窖泥，放入灭菌的离心管中，加入灭菌生理盐水，充分振荡，离心，弃去上清液;同法重复洗涤样品I次；(2)向上述样品加入无水乙醇，充分振荡，离心，弃去上清液；同法本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于白酒酿造微生物群落结构分析的高质量DNA提取方法，其特征在于包括以下步骤：⑴样品预处理称取一定量的大曲，加入30mL？PBS？缓冲液（0.0557mol/L？Na2HPO4，0.0423mol/L？NaH2PO4，pH8.0），涡旋均匀，800r/min离心10min，取上清液，并10000r/min离心10min得固态菌团。⑵DNA提取与检测将上述固态菌团重悬于500μL？DNA提取液（0.1M？Tris？HCl，0.1M？EDTA，1.5M？NaCl，1%CTAB，pH8.0）中，加入10μL纤维素酶（75mg/mL）、蜗牛酶（50mg/mL）和溶菌酶？（40mg/mL），37℃裂...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：周荣清，张立强，郑佳，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：