用于细菌总DNA内含物的特异性分离方法和用于该分离目的的试剂盒技术

技术编号:8274986 阅读:243 留言:0更新日期:2013-01-31 09:28
本申请公开了用于不同样品的细菌总DNA内含物的特异性分离方法,在所述方法的过程中,裂解所述细胞,选择性结合所述裂解物的DNA内含物,洗涤所述DNA内含物,然后在水溶液中从所述结合表面上洗提所述脱盐的直链聚合核苷酸。在细胞裂解之前,基于非活细菌细胞和活细菌细胞不同的细胞表面的物理-化学特性,将所述非活细菌细胞从所述活细胞中分离,将所述样品的所述活细胞保存然后用机械和/酶的方法裂解,优选溶菌酶的方法。此后,将源自活细胞的所述裂解物的双链DNA专门结合在含有化学激活的-OH和十二烷胺基团的-SiO2-TiO2-基质上,洗涤之后,在水溶液中所述洗提脱盐的直链聚合核苷酸。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术的主题是一种用于不同来源样品的细菌总DNA内含物的特异性分离方法以及一种用于实践中实现该方法的试剂盒。
技术介绍
在饮用水、环境水、食品、工作区、不同的公共和环境表面的公共健康卫生监测方面,所收集样品的微生物测试的重要部分是细菌的定性和定量测定。对于上述测定而言一除了选择性或非选择性培养基上的体外培养和它们的显微检测以外,以及除了为单个细菌新陈代谢步骤而精心进行的生化反应以外一目前多种基于核酸的分子诊断方法也是可行的,例如聚合酶链反应(PCR)核酸序列的体外扩增、或揭示核酸碱基序列的排序方法、或测试所得核酸片段的琼脂糖凝胶电泳方法 与传统方法不同,这些核酸类的分子诊断方法使得分析即使在少量首批样品的情况下也能够进行。这些核酸类的分子诊断方法的模板是具有实际使用的分析方法所需的浓度和纯度的细菌核酸。然而,这两个参数,核酸的浓度和纯度会随着所用的预分析方法而变化,即随着样品破碎和核酸提取的方法而变化。为得到模板核酸的样品破碎为多步骤方法,在该方法中,适合当前用途的单独步骤可以分别进行或彼此结合。通常,破碎始于细胞裂解,接着在随后的步骤中进行选择性结合-靶向脱氧核糖核酸(DN本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员:加博·基斯亚诺什·基斯卡塔林·斯通奇克乔治娜·贝尔纳特
申请(专利权)人:戴阿冈有限公司
类型:
国别省市:

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