对土壤中微生物总DNA进行提取制造技术

本发明专利技术公开了对土壤中微生物总DNA进行提取.步骤如下：选取目的土壤样本，其中加入缓冲液，要求其PH为7.5－8.0；然后加入玻璃珠，充分振荡10分钟后加入溶解酶；去上清液，倒置混匀，离心；再在室温下振荡处理；加入总体积三分之一的缓冲液，要求缓冲液的PH不超过8.2，且为碱性；加入乙醇作为振荡剂；室内晾干；然后加入0.3体积的一乙醇胺，离心；ＴＥ溶解即可；其中离心处理的时候，需要达到15000g;所述缓冲液为磷酸缓冲液，且为0.1-0.2mol/L。本发明专利技术的有益效果是，异丙醇的沉淀核酸量比较高，腐败酸污染较少，适用于不同土壤，可以有效去除土壤中的腐殖酸，DNA纯度很高。

【技术实现步骤摘要】
对土壤中微生物总D N A进行提取
本专利技术涉及一种实验方法，具体来说是指对土壤中微生物总D N A进行提取。
技术介绍
土壤是微生物的良好生境，土壤中有多种类群的微生物，它们对自然界物质的转化和循环起着极为重要的作用，对农业生产和环境保护有着不可忽视的影响。根际微生物与植物的关系特别密切，不同的土壤和植物对根际微生物产生显著影响，而不同的根际微生物由于其生理活性和代谢产物的不同，也将对土壤肥力和植物营养产生积极或消极的作用。土壤微生物不仅对土壤的肥力和土壤营养元素的转化起着重要作用，而且对于进入土壤中的农药及其他有机污染物的自净、有毒金属及其化合物在土壤环境中的迁移转化等都起着极为重要的作用。土壤中微生物的数量因土壤类型、季节、土层深度与层次等不同而异。一般地说，在土壤表面，由于日光照射及干燥等因素的影响，微生物不易生存，离地表10cm~30 cm的土层中菌数最多，随土层加深，菌数减少。土壤中微生物以细菌数量最多，为几百万个/克土至几亿个/克土，有各种生理类群，营养类型多属异养型，鉴别染色多为革兰氏阳性。放线菌含量为几万个/克土至几百万个/克土，但其生物量不比细菌低，因为菌丝体积较大。土壤中真菌含量为几千个/克土至几十万个/克土，而其生物量常比细菌的大。酸性土壤中真菌较多。藻类在土壤中的含量不及微生物总数的1%，生长在潮湿土壤的表层。原生动物在富 含有机质的土壤中较多。
技术实现思路
为克服上述技术问题，我们提出了以下技术方案: 对土壤中微生物总D N A进行提取，步骤如下:选取目的土壤样本，其中加入缓冲液，要求其P H为7.5-8.0 ;然后加入玻璃珠，充分振荡I Q分钟后加入溶解酶；去上清液，倒置混匀，离心；再在室温下振荡处理；加入总体积三分之一的缓冲液，要求缓冲液的P H不超过8.2，且为碱性；加入乙醇作为振荡剂；室内晾干；然后加入0.3体积的一乙醇胺，离心；T E溶解即可。本专利技术中，其中离心处理的时候，需要达到15000g。本专利技术中，所述缓冲液为磷酸缓冲液，且为0.1-0.2mol/L。本专利技术的有益效果是，异丙醇的沉淀核酸量比较高，腐败酸污染较少，适用于不同土壤，可以有效去除土壤中的腐殖酸，D N A纯度很高。【具体实施方式】对土壤中微生物总D N A进行提取，步骤如下:选取目的土壤样本，其中加入缓冲液，要求其P H为7.8 ;然后加入玻璃珠，充分振荡I Q分钟后加入溶解酶；去上清液，倒置混匀，离心；再在室温下振荡处理；加入总体积三分之一的缓冲液，要求缓冲液的P H8.2，且为碱性；加入乙醇作为振荡剂；室内晾干；然后加入0.3体积的一乙醇胺，离心；T E溶解即可。其中离心处理的时候，需要达到15000g ;所述缓冲液为磷酸缓冲液，且为0.1mol/L0以上所述，仅为本专利技术较佳的【具体实施方式】，但本专利技术的保护范围并不局限于此，任何熟悉本
的技术人员在本专利技术披露的技术范围内，根据本专利技术的技术方案及其专利技术构思加以等同替换或 改变，都应涵盖在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
对土壤中微生物总ＤＮＡ进行提取，其特征在于，步骤如下：选取目的土壤样本，其中加入缓冲液，要求其ＰＨ为７.５－８.０；然后加入玻璃珠，充分振荡１０分钟后加入溶解酶；去上清液，倒置混匀，离心；再在室温下振荡处理；加入总体积三分之一的缓冲液，要求缓冲液的ＰＨ不超过８.２，且为碱性；加入乙醇作为振荡剂；室内晾干；然后加入０.３体积的一乙醇胺，离心；ＴＥ溶解即可。

【技术特征摘要】
1.对土壤中微生物总DN A进行提取，其特征在于，步骤如下:选取目的土壤样本，其中加入缓冲液，要求其P H为7.5-8.0 ;然后加入玻璃珠，充分振荡I O分钟后加入溶解酶；去上清液，倒置混匀，离心；再在室温下振荡处理；加入总体积三分之一的缓冲液，要求缓冲液的P H不超过8.2，且为碱性；加入乙醇作为...

【专利技术属性】
技术研发人员：李刚，
申请(专利权)人：李刚，
类型：发明
国别省市：