放射性金属标记抗钙粘素抗体制造技术

本发明专利技术的课题在于提供一种癌组织特异性高蓄积的放射性金属抗钙粘素抗体、抗癌效果高且安全性高的癌治疗药物和癌诊断药物。一种放射性金属标记抗钙粘素抗体，其为放射性金属元素通过金属螯合试剂与抗钙粘素抗体结合而成的抗体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及癌细胞特异性高蓄积的放射性金属标记抗钙粘素抗体，还涉及含有该抗体的癌治疗药物和癌诊断药物。
技术介绍
癌位居死亡原因的第一位，因而希求新的治疗方法。作为癌的治疗方法，有外科治疗法、放射线治疗法、化学治疗法(抗癌剂)，但在外科手术后也可以采用由抗癌剂进行的治疗。作为抗癌剂，可以使用烷基化剂、代谢拮抗剂、生物碱类抗癌剂、抗生物质抗癌剂、钼制剂等，但这些抗癌剂的治疗效果还不能说是充分的，存在非癌细胞特异性、副作用发生 频率高的问题。从这样的观点出发，希望开发更优异的抗癌剂。另一方面,I丐粘素(Cadherin)是在细胞表面表达的Ca2+依赖性的粘合分子。在该钙粘素中，已知有E钙粘素、N钙粘素、P钙粘素(CDH3)等典型的钙粘素，此外还有原钙粘素、桥粒钙粘素等。已知这些钙粘素同源结合而形成粘附、连接，通过细胞内的连环蛋白与细胞内骨架系统(肌动蛋白纤维)连接，据认为通过这样的机理控制着细胞粘合。另外，除了细胞粘合以外，钙粘素据认为也参与胚胎发生、形态发生、突触形成、突触可塑性，还参与癌的浸润、转移。因此，有报告抗钙粘素抗体在癌治疗中是有用的(专利文献I 3)现有技术文献专利文献专利文献I :日本特表2005-522982号公报专利文献2 日本特表2008-538909号公报专利文献3 :日本特表2009-528257号公报
技术实现思路
专利技术要解决的课题但是，抗钙粘素抗体的抗癌效果不能说是充分的，因而希望开发更优异的癌治疗药物。因此，本专利技术的课题在于提供一种癌组织蓄积性高的放射性金属标记抗钙粘素抗体，以其为有效成分的抗癌效果高的癌治疗药物、和在其有效性预测与治疗效果确认中可以使用的癌诊断药物。用于解决课题的方法为此，本专利技术的专利技术人为了解决上述课题而进行了各种研究，结果发现，通过金属螯合试剂使放射性金属元素与抗钙粘素抗体结合而得到的放射性金属标记抗钙粘素在荷癌动物的癌组织中特异性蓄积，且其抗癌效果相比于抗钙粘素抗体给药组格外显著地提高，从而完成了本专利技术。S卩，本专利技术提供一种放射性金属元素通过金属螯合试剂结合而成的抗钙粘素抗体，还提供以其为有效成分的癌治疗药物和癌诊断药物。另外，本专利技术提供用于在癌治疗或癌诊断中使用的上述抗钙粘素抗体。另外，本专利技术提供上述抗钙粘素抗体在癌治疗药物或癌诊断药物的制造中的使用。本专利技术还提供以投与有效量的上述抗钙粘素抗体为特征的癌治疗方法或癌诊断方法。专利技术的效果以本专利技术的放射性金属标记抗钙粘素抗体为有效成分的癌治疗药物，向癌组织的 蓄积性高且癌组织缩小效果好，因此，如果使用该药物，就能够副作用少且有效地进行癌治疗。另外，通过使用本专利技术的癌诊断药物，能够进行本专利技术的癌治疗药物的有效性的预测和治疗效果的确认。附图说明图I是表示使用流式细胞术进行的抗体亲和性评价的结果。图2是表示投与67Ga-D0TA_PPMX2016抗体(投入比I : 10)96小时后的体内分布。图3是表示投与67Ga-D0TA_PPMX2016抗体(投入比I : 3)96小时后的体内分布。图4是表示投与67Ga-D0TA_PPMX2029抗体(投入比I : 10)96小时后的体内分布。图5是表示投与67Ga-D0TA_PPMX2029抗体(投入比I : 3)96小时后的体内分布。图6是表示投与67Ga-D0TA_PPMX2025抗体(投入比I : 10)96小时后的体内分布。图7是表示投与67Ga-D0TA_PPMX2025抗体(投入比I : 3)96小时后的体内分布。图8 是表示将 67Ga-D0TA-PPMX2025 抗体的 DOTA 投入比设为 I : 1、1 : 3、1 : 10时投与96小时后的体内分布。图9是表示投与mIn-D0TA-PPAT-052-27c抗体(投入比I : 3) 96小时后的体内分布。图10是表示投与mIn-D0TA-PPAT-052-27c抗体(投入比I : 3)48小时后的体内分布。图11是表示投与mIn-D0TA-PPAT-052-28c抗体(投入比I : 3) 48小时后和96小时后的体内分布。图12是表示9°Y-D0TA-PPMX2029抗体(投入比I : 3)在异种移植模型中的抗肿瘤效果。图13是表示9°Y-D0TA-PPAT-052-27c抗体(投入比I : 3)在异种移植模型中的抗肿瘤效果。图14是表示确认⑶H3蛋白质表达的免疫组织化学染色的结果。具体实施例方式本专利技术的放射性金属标记抗钙粘素抗体是放射性金属元素通过金属螯合试剂结合而成的抗钙粘素抗体，癌治疗药物和癌诊断药物含有该抗体。抗钙粘素抗体只要是与钙粘素特异性结合的抗体，则没有特别限制。在这里，作为钙粘素，可以列举E钙粘素、N钙粘素、P钙粘素等，但更优选P钙粘素。抗钙粘素抗体中包括单克隆抗体和多克隆抗体、以及保持与抗原决定簇特异性结合的能力的抗体及T-细胞受体片段等抗体的变种和衍生物。另外，抗钙粘素抗体的种类没有特别限制，可以适当使用小鼠抗体、人抗体、大鼠抗体、兔抗体、绵羊抗体、骆驼抗体、鸡抗体等，和出于使其对人的异种抗原性下降等的目的而人为改变的基因重组型抗体，例如，嵌合抗体、人源化抗体等。基因重组型抗体可以使用已知的方法制造。嵌合抗体是由人以外的哺乳动物，例如小鼠抗体的重链、轻链的可变区和人源抗体的重链、轻链的恒定区组成的抗体，可以通过连接编码小鼠抗体可变区的DNA和编码人源抗体恒定区的DNA，将其重组入表达载体中，并导入宿主中，使其产生而得到(例如，参照 Cabilly S.等，Proc Natl Acad Sci USA. 198481 (11) 3273-7、Morrison 等，Proc Natl Acad Sci USA. 198481 (21) 6851-5、欧洲专利申请公开序号第 171496 号)。人源化抗体也被称为重构(reshaped)人源抗体，是将人以外的哺乳动物，例如小鼠抗体的互补性决定区(⑶R〖complementarity determining region)向人源抗体的互补性决定区移 植而得到的抗体，其通常的基因重组方法也是已知的。具体而言，通过PCR法，从以使末端部具有重叠序列的方式制得的数个寡核苷酸，合成以使小鼠抗体的CDR和人源抗体的构架区(framework region :FR)连接的方式设计的DNA序列。将所得到的DNA与编码人源抗体恒定区的DNA连接，接着重组入表达载体中，导入宿主中而使之产生，由此可以得到(参照欧洲专利申请公开序号EP239400、国际专利申请公开序号W096/02576)。通过⑶R所连接的人源抗体的FR，选择互补性决定区形成良好的抗原结合部位的FR。根据需要，重构人源抗体的互补性决定区可以取代抗体可变区的构架区的氨基酸，以形成适当的抗原结合部位(Sato, K. et al. , Cancer Res, 1993, 53, 851-856.)。嵌合化、人源化抗体的氨基酸序列优选与来自保藏杂交瘤的表达cDNA的Vh或Vl区域的氨基酸序列为100%同一的序列，但也优选通过基因工程学的改变而具有90%以上同一的序列的抗体。在人源化、嵌合化的过程中，一直进行着以改善抗原结合为目的的残基取代的调整。这种改变了一部分序列的抗体，可以认为基本上是本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：日野明弘，长野朗夫，渡边雅彦，松浦正，佐藤广一，野村富美子，见供克之，
申请(专利权)人：富士胶片RI制药株式会社，株式会社英仙蛋白质科学，
类型：
国别省市：