紫外分光光度法检测人免疫球蛋白Fc段生物学活性的方法技术

本发明专利技术公开了紫外分光光度法检测人免疫球蛋白Fc段生物学活性的方法，方法通过用吸附无细胞百白破疫苗替代成本高且不容易获得的标记抗原用于敏化红细胞，用GE公司Ultrospec6300pro紫外/可见光分光光度计于样品检测，及仪器自带软件做数据处理，本发明专利技术实验证明：三次检测结果自身标准偏差范围0.06～15.92%，方差范围：0.00～1.69%。紫外分光光度计结果和新发明专利技术三次检测平均值结果比较：数据均差：-1.37%；数据差值标准偏差：-1.28%；数据差值方差：0.02%，本发明专利技术的检测结果在合理的理论范围内，确是一种廉价且微量检测血液制品人免疫球蛋白Fc段生物学活性的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药
，涉及ー种廉价且微量检测血液制品人免疫球蛋白Fe段生物学活性的方法，即用紫外分光光度法检测人免疫球蛋白Fe段生物学活性的方法。
技术介绍
人免疫球蛋白G (Human Immunoglobulin G, IgG),抗体分子,在血衆免疫球蛋白中占75%,由血衆B细胞合成和分泌。免疫球蛋白Fe片段(Fragment crystallizableregion)，是细胞表面受体和某些补体系统蛋白相互作用的抗体尾部区域部分，能激活免疫系统，与IgG的药物有效性相关。生产过程中的纯化、病毒灭活、超滤、过滤，以及制品存放 都能够导致IgG分子生物活性降低和退化。主要表现为IgG的Fe功能改变，并最终导致抗体活性包括中和病毒、细菌和毒素(白喉、破伤风)及调理作用和诱发吞噬作用衰减。—般通过特异性抗体(免疫球蛋白)Fab段与红细胞上已包被的相应抗原结合，抗体暴露出Fe段补体Clq的结合位点，从而激活后续的补体各成分，最终导致红细胞的细胞膜受到攻击、破裂，释放出血红蛋白。通过溶血反应动力学曲线，计算IgG激活补体活性的功能指数(IF。)，以此測定IgG供试品Fe段生物学活性。本文档来自技高网...

【技术保护点】
紫外分光光度法检测人免疫球蛋白Fc段生物学活性的方法，其特征包括：敏化红细胞的抗原选择，检测仪器选择，数据处理；其中敏化红细胞抗原选择用百白破联合疫苗替代；具体步骤如下：⑴.敏化红细胞的制备A液，取健康人抗凝O型血3人份以上混合，用PBS缓冲液洗涤3次，最后一次以每分钟2000转离心10分钟分离红细胞；取适量积压红细胞悬浮于1.3mg/L鞣酸PBS缓冲液中，溶液的体积比为1:40，置于37℃水浴中轻摇30分钟后再用PBS缓冲液洗涤3次，最后用PBS缓冲液制备成体积百分数为2.5%的红细胞悬浮液；B液，用吸附无细胞百白破联合疫苗与体积百分数为1%氯化铬溶液0.25ml混合，溶液的体积比为10:1...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨刚，刘欣晏，陈云华，袁靖，张学俊，李长清，
申请(专利权)人：贵州泰邦生物制品有限公司，中国医学科学院输血研究所，
类型：发明
国别省市：