【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医学临床分子检测领域,具体涉及用于检测BRAF基因V600E突变的引物、探针、试剂盒及其使用方法。
技术介绍
BRAF基因是一种癌基因,与ARAF和RAFl(CRAF)基因同属于RAF家族,其编码的BRAF蛋白是一种丝/苏氨酸特异性激酶,是RAS-RAF-MEK-ERK-MAPK信号通路中的重要转导因子,参与细胞内多种生物学事件的调控,如细胞生长、分化和凋亡等。 BRAF基因位于7q34,长约190kb,转录mRNA长2. 5kb,编码783氨基酸的蛋白,相对分子质量为94000 95000。BRAF蛋白由783个氨基酸组成,功能上从N端到C端为RAS结合区、富半胱氨酸区(Cys)、甘氨酸环(Gloop)和激活区。在绝大多数组织和细胞类型中,BRAF是MEK/ERK最为关键的激活因子。它主要有CR1、CR2和CR33个保守区。其中CRl区含RBD区(RAS蛋白结合区)和富含半胱氨酸区(Cys) ;CR3区为激酶结构域,含甘氨酸环(Gloop),为ATP结合位点和激活区,该区T598和S601两个位点的磷酸化对BRAF蛋白的激活至关重要,这两个位 ...
【技术保护点】
一种用于检测BRAF基因V600E突变的引物与探针,?其特征在于所述检测引物及探针根据BRAF基因V600E突变位点设计,序列如下所示:?检测正向引物:5’??AAATAGGTGATTTTGGTCTAGCTACACA??3’;检测反向引物:5’??CTTTCTAGTAACTCAGCAGCATC??3’;检测荧光探针:5’荧光基团??TCCCATCAGTTTGAACAGTTGTCT??3’淬灭基团。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:王进,赵小龙,何晓辉,刘乔,陈允斌,
申请(专利权)人:苏州旷远生物分子技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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