一组肝癌血清核酸适配子制造技术

一组肝癌血清核酸适配子，属生物医学检测分析技术领域。本发明专利技术公开了9个以肝癌血清为靶标筛选出的肝癌血清核酸适配子的核酸序列，通过聚丙烯酰胺凝胶电泳及灰度测定方法分析了它们与肝癌和非肝癌血清标本的结合程度，显示每个核酸适配子对肝癌均具有良好的诊断价值，受试者工作特征曲线下面积达0.894~0.949，鉴别肝癌与非肝癌患者的准确度达84.4%~91.4%。这些核酸适配子可直接或修饰后应用于肝癌血清标本的分析，为肝癌的临床诊断、治疗和预后判断提供实验依据，也可应用于建立基于核酸适配子的肝癌检测新技术，具有良好的应用价值。

【技术实现步骤摘要】

本项专利技术属生物医学检测分析

技术介绍
核酸适配子(aptamer)是一种生物祀分子的人工单链寡核苷酸配体,通过SELEX(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment)技术从随机单链寡核苷酸文库中筛选获得。核酸适配子筛选的基本步骤如下设计并合成随机单链寡核苷酸文库；将文库与靶标共孵育，使文库中能与靶标特异性结合的寡核酸与靶标形成复合物，分离复合物并洗脱寡核酸，以洗脱的寡核酸为模板进行PCR扩增，制备成新的单链随机寡核苷酸文库，开始下一轮筛选；重复数轮孵育-洗脱-扩增，与靶标高特异性和高亲和力结合的核酸序列将从文库中筛选出来并被指数富集；对最后一轮筛选后制备的文库进行克隆、测 序，其中长度及两端序列与文库相符者即为核酸适配子；测定各核酸适配子与靶标结合的特异性和亲和力，选出能高特异性和高亲和力结合靶标者，即可应用于靶标的检测分析。核酸适配子的功能与抗体类似，但与抗体相比具有许多优点①高特异性和高亲和力核酸适配子能够分辨出靶分子结构上细微的差别，亲和力甚至强于天然配体；②靶标广泛从有机小分子、生物大分子本文档来自技高网...

【技术保护点】
一组肝癌血清核酸适配子，其特征在于具有下列核苷酸序列：（1）AP？HCS？9？10：5’？ACCGACCGTGCTGGACTCTATGGGCCTGGGCCGTGCAGTTAG？CTCGGCGGTGTATTGTCAGTATGAGCGAGCGTTGCG？3’（2）AP？HCS？9？74：5’？ACCGACCGTGCTGGACTCTTGACCTAAGTTAGTGGTCCTGTT？GATGGTTCGTGTGGTTGAGTATGAGCGAGCGTTGCG？3’（3）AP？HCS？9？89：5’？？ACCGACCGTGCTGGACTCTACAGAGTGCTTGATCTCGGGTT？GTCGGTGTCGGT...

【技术特征摘要】
1.一组肝癌血清核酸适配子，其特征在于具有下列核苷酸序列(1)AP-HCS-9-10 :5’ -ACCGACCGTGCTGGACTCTATGGGCCTGGGCCGTGCAGTTAG CTCGGCGGTGTATTGTCAGTATGAGCGAGCGTTGCG-3，(2)AP-HCS-9-74 :5’ -ACCGACCGTGCTGGACTCTTGACCTAAGTTAGTGGTCCTGTT GATGGTTCGTGTGGTTGAGTATGAGCGAGCGTTGCG-3，(3)AP-HCS-9-89 :5’ - ACCGACCGTGCTGGACTCTACAGAGTGCTTGATCTCGGGTT GTCGGTGTCGGTGGACTGAGTATGAGCGAGCGTTGCG-3，(4)AP-HCS-9-132 :5’ -ACCGACCGTGCTGGACTCTAGGAGGGTGATGCAAATGGAC GTTCAGATTAGTGTGGTCAGTATGAGCGAGCGTTGCG-3，(5)AP-HCS-11-3 :5’ -ACCGACCGTGCTGGACTCTATGGAATGGATCGTTCTGTGTCG GGTCGTACGGGAGTGTCAGTATGAGCGAGC...

【专利技术属性】
技术研发人员：张焜和，陈文学，徐国峰，王婷，魏淑琴，李璇，吕农华，张吉翔，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：