【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及重组蛋白制备领域，具体公开了一种重组链霉亲和素的制备工艺。
技术介绍
链霉亲和素(Streptavidin,下称SA)是Streptomyces avidinii菌培养过程中的一种外分泌的蛋白质，与亲和素(Avidin)有相似生物学特性，可以高度特异性地结合一种水溶性的维生素D-生物素(维生素H)。SA为四聚体,平均每个亚基都能结合一分子生物素，Streptavidin-Biotin之间亲和力非常强，Kd值接近1015M。生物素易于与多种生物活性分子(如蛋白，核酸和糖类等)发生偶联。在发现SA之前，科学家利用生物素和亲和素的特点，利用两者亲和的能形成Avidin 一 Biotin系统,一方面可以偶联抗原、抗体及核酸分子，另一方面又能被酶等多种材料标记，于是此系统能够应用于抗原抗体检测作为生物反应放大系统。随SA的出现，研究者发现SA不带糖基、等电点低，且完整的四聚体还具有热稳定性好，对强酸、SDS、尿素、盐酸胍的耐受性强等特点，使得Streptavidin-Biotin系统与Avidin-Biotin系统相比具有亲和力高、灵敏度高、特异性强、稳定...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种重组链霉亲和素的制备工艺，具体步骤如下 1)人工合成表达重组链霉亲和素的重组基因，所述重组基因的序列包括核心链霉亲和素基因序列以及位于核心链霉亲和素基因序列左右两侧的限制性酶切位点序列； 2)重组质粒的构建将步骤I)的重组基因插入载体，获得能够表达重组链霉亲和素的重组质粒； 3)基因工程菌的制备将步骤2)获得的重组质粒转化宿主细胞制备基因工程菌； 4)外源基因的表达基因工程菌发酵表达重组链霉亲和素； 5)目的蛋白的分离纯化裂解菌体，通过蛋白纯化步骤获得重组链霉亲和素。2.如权利要求I所述的制备工艺，其特征在于，所述核心链霉亲和素基因序列如SEQIDNO: 3 所示。3.如权利要求I所述的制备工艺，其特征在于，所述位于核心链霉亲和素基因序列左右两侧的限制性酶切位点分别为Nde I酶和Hind III酶的限制酶切位点。4.如权利要求3所述的制备工艺，其特征在于，所述人工合成的表达重组链霉亲和素的重组基因序列如SEQ ID NO: I所示。5.如权利要求I所述的制备工艺，其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员：肖齐世，王惠生，刘振青，任红柳，肖伟，罗超，
申请(专利权)人：上海普欣生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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