去甲肾上腺素完全抗原的制备方法及偶联摩尔比测定方法技术

本发明专利技术公开了一种去甲肾上腺素（NE）完全抗原的制备方法及偶联摩尔比测定方法，解决了现有去甲肾上腺素是小分子结构，激发不了动物机体产生抗体的问题，技术方案包括将NE与载体偶联、纯化、同时制备载体mannich对照，并通过紫外分光光度计对载体、载体mannich对照、NE标准品及偶联物在200-500nm之间进行扫描，并进行图形化比对，判定偶联是否成功，并进一步通过摩尔消光系数法计算NE与载体载体的偶联摩尔比。本发明专利技术方法能生产出高品质的完全抗原，具有方法简单、生产周期短，生产成本低的优点，适用于NE的免疫学检测方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于免疫学
，具体的是说一种去甲肾上腺素(以下简称NE)完全抗原的制备方法以及测定去甲肾上腺素完全抗原中NE与载体的偶联摩尔比的方法。
技术介绍
去甲肾上腺素(Norepinephrine,也称Noradrenaline,缩写NE或NA),旧称“正肾上腺素”，学名1_(3，4-二羟苯基)-2-氨基乙醇，是肾上腺素去掉N-甲基后形成的物质，在化学结构上也属于儿茶酚胺。它既是一种神经递质，主要由交感节后神经元和脑内肾上腺素能神经末梢合成和分泌，是后者释放的主要递质；也是一种激素，由肾上腺髓质合成和分泌，但含量较少。多巴、多巴胺、肾上腺素与去甲肾上腺素等统称为儿茶酚胺类物质，它们都是由酪 氨酸衍生而来的系列物。儿茶酚胺作为神经递质和激素，与人们的健康与疾病有密切关系，它们不仅直接参与行为活动以及参与血压、心率、呼吸和睡眠等植物神经功能的调控，而且还与一些功能性疾病如神经分裂症、忧郁症以及器质性病变的出现有关。血浆及尿中儿茶酚胺的浓度水平可用于诊断高血压、嗜铬细胞瘤及成神经细胞瘤等病症，因而准确测定人体生物样品中儿茶酚胺类物质代谢浓度的变化，在疾病的诊断和治疗中具有重要的意本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种去甲肾上腺素完全抗原的制备方法，其特征在于，包括下述步骤， (1)将去甲肾上腺素与载体分别溶于NaAc溶液中，分别制备NE溶液及载体溶液，然后将两者混合后加入甲醛溶液并调节PH值为6. O — 6. 5后，4°C持续搅拌下进行偶联反应20 - 28小时，得到反应混合液。(2)反应混合液通过超滤、透析或者脱盐柱法除去反应混合液中未偶联上的小分子物质，缓冲液采用pH为7. 2的0. OlM磷酸盐缓冲液，得到偶联物。(3)按照步骤I和步骤2的方法，反应体系缺失去甲肾上腺素，维持其他各反应条件不变的条件下，制得载体mannich对照。(4)采用紫外分光光度计对载体、载体mannich对照、去甲肾上腺素标准品及偶联物在200-500nm之间进行扫描，在同坐标上进行图形比对，在偶联物与载体mannich对照浓度相同的情况下，如果偶联物比载体mannich对照多出特征吸收峰，则判定偶联成功，即得到去甲肾上腺素完全抗原。2.如权利要求I所述的去甲肾上腺素完全抗原的制备方法，其特征在于，所述步骤(I)中，所述载体为含有游离氨基的生物大分子，具体为牛血清白蛋白或卵清白蛋白或血蓝蛋白。3.如权利要求I或2所述的去甲肾上腺素完全抗原的制备方法，其特征在于，所述步骤(I)中，将去甲肾上腺素与载体分别溶于I. 2mol/L NaAc溶液中，分别制备34mmoL/L去甲肾上腺素溶液和3. 4mmol/L载体溶液，按照去甲肾上腺素与载体摩尔比10-20 1的比例，将去甲肾上腺素溶液缓慢加入到载体溶液中，缓慢滴加，边滴加边搅拌，混匀后制成混合溶液，然后在搅拌下缓慢滴加与混合溶液等体积的体积浓度为3%...

【专利技术属性】
技术研发人员：鲁亮，费小战，周琪，李学斌，
申请(专利权)人：武汉伊艾博科技有限公司，
类型：发明
国别省市：