一种从苦玄参叶中制备苦玄参苷IA的方法技术

本发明专利技术公开了一种从苦玄参叶中制备苦玄参苷IA的方法。方法步骤如下：i取苦玄参叶粉碎，加入4-10BV50-80%乙醇微波提取2-3次，每次30分钟，提取液回收乙醇，浓缩液加入阴离子树脂除杂，去离子水洗脱，收集下柱液和水洗液，减缩干燥得干浸膏；ii上述干浸膏用依无水丙酮超声洗涤30-60分钟，再用氯仿溶解，滤出不溶物，回收氯仿，得粗提物；iii上述粗提物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器在线检测，收集目标成分，减压干燥得苦玄参苷IA。本发明专利技术具有操作简便、效率高、周期短、制备量大等优点，适合工业化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，特别是涉及从苦玄参叶中制备苦玄参苷IA的方法。
技术介绍
苦玄参苷IA (Picfeltarraenin IA)是一种三萜类皂苷，为苦玄参苷元I的 3-0-a-L-鼠李吡喃糖基-(1，2)-β-D-木吡喃糖苷，分子式C41H62013，分子量762. 9，其苷元结构式苦玄参为双子叶植物药玄参科植物苦玄参，又叫鱼胆草、四环素草，具有清热解毒、消肿止痛、开胃消食，用于感冒风热、咽喉肿痛、痢疾、毒蛇咬伤、跌打损伤、胃痛、消化不良。现代研究发现，苦玄参中含有大量三萜皂苷，其中苦玄参苷IA具有抗补体、抗炎作用和抗肿瘤作用。 通过文献检索，制备苦玄参苷IA方法多为固体色谱柱分离。如文献“从苦玄参中制备苦玄参苷IA的实验研究”，该文献采用的方法是萃取、硅胶柱和制备液相结合分离得到高纯度苦玄参苷IA。再如文献“苦玄参的化学成分研究及应用”，该文献采用的方法是乙醇回流提取，大孔树脂分富集，硅胶柱反复分离。如上所述，这些传统制备方法多存在溶剂用量大、收率低、制备量小、周期长等诸多缺陷。本专利技术的目的是克服现有技术的缺陷和不足，提供一种从苦玄参叶中制备苦玄参苷IA的快速、简便的方法。本专利技术的目的是通过以下技术方案来实现的一种从苦玄参叶中制备苦玄参苷 IA的方法，其特征在于以下步骤i取苦玄参叶粉碎，加入4-10BV50-80%乙醇微波提取2_3次，每次30-60分钟，提取液回收乙醇，浓缩液加入阴离子树脂除杂，去离子水洗脱，收集下柱液和水洗液，减缩干燥得干浸膏； 上述干浸膏用依无水丙酮超声洗涤30-60分钟，再用氯仿溶解，滤出不溶物，回收氯仿，得粗提物；iii上述粗提物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器在线检测，收集目标成分，减压干燥得苦玄参苷IA
技术实现思路
步骤i中所述的阴离子树脂为弱碱性阴离子树脂，型号可选D941、330或D310中的一种。步骤iii中所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统可选三元溶剂体系，优选乙酸乙酯、正丁醇、水，比例为3-10:1-3:5-10，下相为流动相，上相为固定相。步骤iii中所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统可选四元溶剂体系，优选乙酸乙酯、丁醇、甲醇、水，比例为5-10:3-7:1-3:7-15，下相为流动相，上相为固定相。在高速逆流色谱分离时主机转速可为700-1000rpm，流动相流速为Uml/min，采用流动相溶解分离物。本专利技术的优点是采用了高速逆流色谱法制备，它是一种液液分配色谱，分离速度快、周期短，样品无损失，溶剂可以循环使用，不产生废弃物，解决了固体填充柱分离的缺陷，是一种高效、快速方法，适合工业化生产。具体实施例方式下面将结合具体实施方式进一步说明本专利技术。实施例1 苦玄参叶粉碎，取2kg加8倍80%乙醇微波提取2次，每次30分钟，合并提取液浓缩至无醇，加入D941阴离子树脂柱中，去离子水洗脱，合并下柱液和水洗液，减压浓缩干燥得到 67g浸膏。浸膏粉碎加入200ml丙酮溶液超声40分钟，抽滤，固体物再用氯仿溶解，过滤，滤液回收试剂，得粗提物9g。取乙酸乙酯、正丁醇、水按3:1:5混合，混合后充分分层后，取上相注满高速逆流色谱柱，同时开转主机SOOrpm，泵入下相，待系统平衡后，流速调节为2ml/min，同时用流动相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器在线检测，收集目标流分，连续制备，浓缩干燥得类白色苦玄参苷IA3. IgJSHPLC检测，纯度98. 1%。实施例2:苦玄参叶粉碎，取2kg加6倍50%乙醇微波提取3次，每次30分钟，合并提取液浓缩至无醇，加入330阴离子树脂柱中，去离子水洗脱，合并下柱液和水洗液，减压浓缩干燥得到 75g浸膏。浸膏粉碎加入300ml丙酮溶液超声60分钟，抽滤，固体物再用氯仿溶解，过滤，滤液回收试剂，得粗提物Hg。取乙酸乙酯、丁醇、甲醇、水按5:3:1:7，混合后充分分层后，取上相注满高速逆流色谱柱，同时开转主机900rpm，泵入下相，待系统平衡后，流速调节为3ml/min，同时用流动相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器在线检测，收集目标流分，连续制备，浓缩干燥得类白色苦玄参苷IA3. 6g，经HPLC检测，纯度96. 7%。实施例3:苦玄参叶粉碎，取2kg加8倍70%乙醇微波提取2次，每次30分钟，合并提取液浓缩至无醇，加入D310阴离子树脂柱中，去离子水洗脱，合并下柱液和水洗液，减压浓缩干燥得到 72g浸膏。浸膏粉碎加入200ml丙酮溶液超声30分钟，抽滤，固体物再用氯仿溶解，过滤，滤液回收试剂，得粗提物10g。取乙酸乙酯、丁醇、甲醇、水按6:3:2:10，混合后充分分层后，取上相注满高速逆流色谱柱，同时开转主机lOOOrpm，泵入下相，待系统平衡后，流速调节为lml/min，同时用流动相溶解粗提物，由进样阀进样，紫外检测器在线检测，收集目标流分，连续制备，浓缩干燥得类白色苦玄参苷IA2. 9g，经HPLC检测，纯度98. 5%。权利要求1.一种从苦玄参叶中制备苦玄参苷IA的方法，其特征在于以下步骤i取苦玄参叶粉碎，加入4-10BV50-80%乙醇微波提取2_3次，每次30-60分钟，提取液回收乙醇，浓缩液加入阴离子树脂除杂，去离子水洗脱，收集下柱液和水洗液，减缩干燥得干浸膏； 上述干浸膏用依无水丙酮超声洗涤30-60分钟，再用氯仿溶解，滤出不溶物，回收氯仿，得粗提物；i i i上述粗提物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器在线检测，收集目标成分，减压干燥得苦玄参苷IA。2.根据权利要求1所述的从苦玄参叶中制备苦玄参苷IA的方法，其特征在于步骤i中所述的阴离子树脂为弱碱性阴离子树脂，型号可选D941、330或D310中的一种。3.根据权利要求1所述的从苦玄参叶中制备苦玄参苷IA的方法，其特征在于步骤iii 中所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统可选三元溶剂体系，优选乙酸乙酯、正丁醇、水，比例为3-10:1-3:5-10，下相为流动相，上相为固定相。4.根据权利要求1所述的从苦玄参叶中制备苦玄参苷IA的方法，其特征在于步骤iii 中所述的高速逆流色谱分离的溶剂系统可选四元溶剂体系，优选乙酸乙酯、丁醇、甲醇、水， 比例为5-10 3-7 1-3 7-15，下相为流动相，上相为固定相。全文摘要本专利技术公开了一种从苦玄参叶中制备苦玄参苷IA的方法。方法步骤如下i取苦玄参叶粉碎，加入4-10BV50-80%乙醇微波提取2-3次，每次30分钟，提取液回收乙醇，浓缩液加入阴离子树脂除杂，去离子水洗脱，收集下柱液和水洗液，减缩干燥得干浸膏；ii上述干浸膏用依无水丙酮超声洗涤30-60分钟，再用氯仿溶解，滤出不溶物，回收氯仿，得粗提物；iii上述粗提物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器在线检测，收集目标成分，减压干燥得苦玄参苷IA。本专利技术具有操作简便、效率高、周期短、制备量大等优点，适合工业化生产。文档编号C07J17/00GK102391344SQ20111030361公开日2012年3月28日 申请日期2011年10月10日 优先权日2011年10月10日专利技术者刘东锋, 杨成东 申请人:南京泽朗医药科技有限公司本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，杨成东，
申请(专利权)人：南京泽朗医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：