地黄叶总苷胶囊剂的检测方法技术

本发明专利技术公开一种地黄叶总苷胶囊剂的检测方法，该检测方法包括性状、检查、鉴别和含量测定项目；所述鉴别是对该胶囊中所含地黄叶总苷和毛蕊花糖苷的成分鉴别，所述含量测定是对该胶囊中所含地黄叶总苷和毛蕊花糖苷的含量测定的方法。它针对目前地黄叶总苷胶囊尚无有效的控制产品质量、及无科学合理的质量控制检测方法，是在对地黄叶提取物地黄叶总苷充分研究的基础上，确定了以毛蕊花糖苷为被测成分，结合该药物的制备工艺，制定了具体可行的成分鉴别和含量测定方法，所采用的鉴别方法专属性强，含量测定准确度高，重现性好，从而建立了地黄叶总苷胶囊制剂的质量控制标准，以有效控制地黄叶总苷胶囊的质量，从而保证了该药物的临床疗效和安全性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种地黄叶总苷胶囊制剂的检测方法，属于对药品进行质量控制的技 术领域。
技术介绍
地黄作为一种传统中药材，因含有多种类型的药理活性成分，已在医药学界被广 泛的研究和应用，但地黄的地上部分很少见有化学成分的研究报道。本申请的专利技术人对地 黄的地上部分地黄叶进行了研究，在化学成分研究及其活性筛选中发现了以毛蕊花糖苷为 主要成分的地黄叶总苷具有免疫抑制作用，且含量较高，因而开发出了以地黄叶为原料提 取地黄叶总苷，研制了国家中药二类新药地黄叶总苷胶囊，该药物具有滋阴补肾，活血凉血 的功效，适用于慢性肾小球肾炎轻症属气阴两虚者。由于该药物是一种新药，目前尚缺乏具 体的能够有效控制该制剂生产质量的检测方法和质量标准，故不能保证该药物临床治疗的 有效性、安全性。
技术实现思路
本专利技术的目的，是提供一种地黄叶总苷胶囊制剂的质量检测方法。它是针对上述 地黄叶总苷胶囊目前尚缺乏能有效的控制产品质量，及无科学合理的质量检测方法和控制 标准，是在对地黄叶提取物充分研究的基础上，确认了提取物地黄叶总苷为毛蕊花糖苷类 成分，占总提取物50%以上；并采用多种现代色谱技术(HPLC-对照品加样法、HPLC-UV全波 长对比法、HPLC-MS鉴定法等)，鉴定出地黄叶总苷中50%以上的主要有效成分为毛蕊化糖 苷及其它多种苯乙醇苷类成分。其中，主要成分毛蕊花糖苷占地黄叶总苷的25%以上，含量 较高，易作为对照品得到，因而确定了以毛蕊花糖苷为被测成分，结合本药物的制备工艺， 通过回归方程、回收率、精密度、重现性等方法学的研究考察，建立了地黄叶总苷胶囊中毛 蕊花糖苷的含量测定方法(HPLC色谱法)、总成分的含量测定方法(UV比色法)以及化学反 应鉴别、薄层色谱鉴别等多项标准。本专利技术所述的地黄叶总苷胶囊是这样构成的处方地黄叶总苷75g ；制法取 地黄叶总苷细粉75g粉碎成细粉，与淀粉混勻，制粒，干燥，加入适量的微粉硅胶，灌装成胶 囊，制成1000粒，即得。本专利技术的，主要包括性状、鉴别、检查、鉴别和含量 测定项目；其中鉴别是对制剂中地黄叶总苷和毛蕊花糖苷的成分鉴别；含量测定是对制 剂中地黄叶总苷、毛蕊花糖苷的含量测定。地黄叶总苷的成分鉴别是以三氯化铁乙醇溶液为鉴别剂的鉴别方法。毛蕊花糖苷的成分鉴别是以对照品毛蕊花糖苷为对照，以三氯甲烷甲醇水= 7:3: 0. 5为展开剂的薄层色谱法。所述成分鉴别方法包括以下(1)地黄叶总苷的成分鉴别取本品内容物，研细，加甲醇，振摇使溶解，滤过，取滤液，加9 %三氯化铁乙醇溶 液，即显墨绿色。(2)毛蕊花糖苷的成分鉴别取本品内容物，研细，加甲醇，振摇使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取毛蕊 花糖苷对照品加甲醇制成对照品溶液，吸取上述两种溶液，分别点于同一以羧甲基纤维素 钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲醇水=7 3 0.5为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以9%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相 同颜色的斑点。更具体的成分鉴别方法包括以下(1)地黄叶总苷的成分鉴别取本品内容物40mg，研细，加甲醇5ml，振摇使溶解，滤过，取滤液1ml，加9%三氯 化铁乙醇溶液2 3滴，即显墨绿色；(2)毛蕊花糖苷的成分鉴别取本品内容物20mg，研细，加甲醇2ml，振摇使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。 另取毛蕊花糖苷对照品加甲醇制成每Iml含2mg的溶液，作为对照品溶液，吸取上述两种溶 液各5μ1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷甲 醇水=7 3 0.5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以9%三氯化铁乙醇溶液，供试品色谱 中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。地黄叶总苷的含量测定是以对照品毛蕊花糖苷为对照，采用分光光度法测定；毛蕊花糖苷的含量测定是以对照品毛蕊花糖苷为对照，以甲醇冰醋酸水= 33 1 66为流动相，采用高效液相色谱法测定。所述含量测定方法包括以下(1)地黄叶总苷的含量测定取毛蕊花糖苷对照品，精密称定，置量瓶中，加甲醇冰醋酸水=33 1 66， 混合溶剂溶解并稀释至刻度，摇勻，即得对照品溶液；精密量取对照溶液五份，分别置量瓶 中，用上述混合溶剂稀释至刻度，摇勻，以相应试剂为空白，用紫外-可见分光光度法，测定 吸光度，以吸光度值为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；取本品内容物，研细，混勻， 精密称取，置量瓶中，加入甲醇冰醋酸水=33 1 66混合溶液，超声处理，放冷，加 上述混合溶剂稀释至刻度，摇勻，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液，置量瓶中，加上述混 合溶剂稀释至刻度，摇勻，以相应试剂为空白，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品 溶液中毛蕊花糖苷的含量，即得，本品每粒含地黄叶总苷以毛蕊花糖苷计，应在37. 5mg 54. Omg 之间。(2)毛蕊花糖苷的含量测定以十八烷基硅烷键和硅胶为填料，以甲醇冰醋酸水=33 1 66为流动 相，流速为lml/min，检测波长为330nm，理论板数按毛蕊花糖苷峰计算应不低于8500 ；取 毛蕊花糖苷对照品，精密称定，置量瓶中，加甲醇冰醋酸水=33 1 66混合溶剂 溶解并稀释至刻度，摇勻，精密量取上述溶液，置量瓶中，用流动相甲醇冰醋酸水= 33 1 66混合溶剂稀释至刻度，摇勻，即得对照品溶液；取本品内容物，混勻，研细，精密 称取，置量瓶中，加流动相，超声处理，放冷，加流动相稀释至刻度，摇勻，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液，置量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇勻，即得供试品溶液；分别精密吸取 对照品溶液与供试品溶液，注入高效液相色谱仪，测定，即得毛蕊花糖苷的含量，本品每粒 含毛蕊花糖苷应在18. Omg 25. Omg之间。更具体的含量测定方法包括以下(1)地黄叶总苷的含量测定取毛蕊花糖苷对照品约8mg，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇冰醋酸水= 33 1 66，混合溶剂溶解并稀释至刻度，摇勻，即得对照品溶液(每Iml含毛蕊花糖苷约 0. 16mg)；精密量取对照溶液1. 0,3. 0,5. 0,7. 0,9. 0ml，分别置50ml量瓶中，用上述混合溶 剂稀释至刻度，摇勻，以相应试剂为空白，用紫外-可见分光光度法，在330nm的波长处测定 吸光度，以吸光度值为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；取本品内容物，研细，混勻，精 密称取约0. 18g，置50ml量瓶中，加入甲醇冰醋酸水=33 1 66混合溶液45ml，超 声处理25分钟，放冷，加上述混合溶剂稀释至刻度，摇勻，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤 液1ml，置50ml量瓶中，加上述混合溶液稀释至刻度，摇勻，以相应试剂为空白，依法测定吸 光度，从标准曲线上读出供试品溶液中毛蕊花糖苷的含量，即得，本品每粒含地黄叶总苷以 毛蕊花糖苷计，应在37. 5mg 54. Omg之间；(2)毛蕊花糖苷的含量测定以十八烷基硅烷键和硅胶为填料，以甲醇冰醋酸水=33 1 66为流动相， 流速为lml/min，检测波长为330nm，理论板数按毛蕊花糖苷峰计算应不低于8500 ；取毛蕊 花糖苷对照品约8mg，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇冰醋酸水=33 1 66混合溶 剂溶解并稀释至刻度，摇勻，精密量本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种地黄叶总苷胶囊剂的检测方法，所述地黄叶总苷胶囊剂由地黄叶总苷７５ｇ和适当辅料制备而成，该检测方法含性状、检查、鉴别和含量测定项目；其特征在于：所述鉴别是对该胶囊中所含地黄叶总苷和毛蕊花糖苷的成分鉴别，所述含量测定是对该胶囊中所含地黄叶总苷和毛蕊花糖苷的含量测定的方法：地黄叶总苷的成分鉴别是以三氯化铁乙醇溶液为鉴别剂的鉴别方法；毛蕊花糖苷的成分鉴别是以对照品毛蕊花糖苷为对照，以三氯甲烷∶甲醇∶水＝７∶３∶０．５为展开剂的薄层色谱法；地黄叶总苷的含量测定是以对照品毛蕊花糖苷为对照，采用分光光度法测定；毛蕊花糖苷的含量测定是以对照品毛蕊花糖苷为对照，以甲醇∶冰醋酸∶水＝３３∶１∶６６为流动相，采用高效液相色谱法测定。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张孝齐，边宝林，杨健，
申请(专利权)人：四川美大康药业股份有限公司，
类型：发明
国别省市：51[中国|四川]