本发明专利技术公开了一种用于鉴定或辅助鉴定小麦拉面品质性状基因的PCR体系及其应用。本发明专利技术的PCR体系中的引物对组为下述1)或2)：1)引物对组A和引物对组B；2)引物对组A；所述引物对组A中的三个引物对分别由序列1和序列2所示两条DNA单链，序列3和序列4所示两条DNA单链，序列5和序列6所示两条DNA单链组成；所述引物对组B三个引物对分别由序列7和序列8所示两条DNA单链，序列9和序列10所示两条DNA单链，序列11和序列12所示两条DNA单链组成。本发明专利技术所提供的引物对组各引物对间不存在抑制和错配，实现了相同温度一次PCR完成一组基因的鉴别，且结果可靠、重复性好，特异性强，成本低，耗时短，为优质拉面小麦品种选育及加工品质改良提供依据。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种用于鉴定或辅助鉴定小麦拉面品质性状基因的PCR体系及其应用，特别涉及一种用于鉴定或辅助鉴定待测新疆冬小麦的拉面色泽性状相关基因和面筋品质性状相关基因的多重PCR引物对组、试剂盒及其应用。
技术介绍
面条是我国北方居民的传统食品，是人们日常主食之一。在2000多年的发展过程中，面条在不同地域形成了其特色形式。在新疆地区，拉面是当地日常主食之一，深受人们喜爱。作为鲜湿白盐面条，新疆拉面以其制作、食用方便，口感弹韧、光滑，拌菜丰富、美味等诸多优点，已逐渐走出新疆地区，被全国各地的人们所接受和喜爱。据统计，新疆地区小麦面粉年产量的80%用于制作拉面。但是，与新疆拉面在人们日常饮食中日益重要的地位相比，新疆拉面品质的评价仍以传统仪器分析和成品感官评价相结合的方法为主，直接限制了其发展。因此，创建微量、快速的优质拉面评选方法，对于拉面专用品种的栽培、选育和优质拉面的加工、评价具有重要意义。近年来，随着生活水平的提高，人们对新疆拉面品质的要求越来越高，品质相关研究已得到重视。目前研究主要集中于与优质拉面相关的磨粉、蛋白质、淀粉、面团流变学特性等品质品指标的筛选，评价方法的改良和拉面专用品种的选育方面。因为新疆拉面品质构成因素较复杂，与其相关的指标较多，所以通过新疆拉面品质评价方法的研究，将筛选出的指标有效应用于其品质评价，成为新疆拉面品质改良的关键环节。新疆拉面评价指标主要包括面条色泽和感官评价两部分。面条色泽除受小麦出粉率、蛋白质含量及面粉颗粒指数等磨粉品质指标的影响外，黄色素(YP)含量和多酚氧化酶 (PPO)活性对其也有显著影响(胡凤灵，何中虎，葛建贵等小麦品种黄色素含量和多酚氧化酶活性基因的分子标记检测·麦类作物学报. 2011,31 (1) :47-53.)。根据评价标准(穆培源，桑伟，王亮，等.新疆市售小麦面粉制作新疆拉面的加工品质特性及其专用粉品质评价指标的研究.麦类作物学报. 2007，27 (6) :1034-1041.),优质新疆拉面最佳色泽为亮白色，而低的YP含量和PPO活性低的品种，具有较好的白度和颜色性状。籽粒或面粉YP含量主要受八氢番茄红素合酶(PSY)基因影响，与面粉和面团的白度高度负相关(Kruger J EiMatsuo R R,Presten K. A comparison of methods for the prediction of Cantonese noodle colour . Canadian Journal of Plant Science，1992，72 :1021—1029.)，与其黄度高度正相关，低的YP含量基因型为Psy-Alb和Psy-Blb ；PPO活性主要受Ppo基因影响， 可以解释面条(团)颜色褐变变异的50% 70%，是引起面条(团)颜色变褐的主要原因(Kruger J E,Hatcher D W,De Pauw R. A whole seed assay for polyphenol oxidase in Canadian prairie spring wheats and its usefulness as a measure of noodle darkening , Cereal Chemistry, 1994，71 :324-326.)，籽粒或面粉 PPO 低活性基因型为 Ppo-Alb和Ppo-Dla。因此，对低YP含量和PPO低活性目标基因型的鉴定，可作为新疆拉面色泽快速预测的方法。Psy-Ala为高黄色素含量基因型，Psy-Alb为低黄色素含量基因型， I^y-Alc基因型品种较罕见，其中Psy-Alb有利于提高对新疆拉面的白度，为拉面优质基因。PpoDl位点的Ppo-Dla为中等低PPO活性的基因型，可以减缓面条颜色褐变。拉面感官评价主要包括拉面手感、面条质地、口感等项目。研究表明，蛋白质特性、 淀粉特性和籽粒硬度等品质性状，可通过对面团流变学特性和淀粉糊化特性的影响在一定程度上决定拉面的感官评价结果(Yun S H,Quail K,Moss R. Physicochemical properties of Australian wheat flours for white salted noodles. Journal of Cereal Sciences,1996,23 :181-189.)。蛋白质的数量与质量对面条品质有重要影响，其质量主要是指面粉中醇溶蛋白与麦谷蛋白的构成及比例，不同的蛋白质构成赋予了小麦籽粒蛋白质不同的质量，其中，高分子量谷蛋白亚基(HMW-GQ和低分子量谷蛋白亚基(LMW-GQ的组成与面团的粘弹性及延伸性密切相关，在一定程度上决定了面条的品质。适合新疆拉面制作的面粉一般为中筋，且具有较好的延伸性。卢静等人研究发现(芦静，黄天荣，聂莉小麦高分子量谷蛋白亚基及 1B/1R易位系对新疆拉面品质性状的影响,新疆农业科学，2010，47 (10) 1909-1917.)， HMW-GS 7+8,5+10,2+10等对新疆拉面的品质有正向效应，但未对Glu-Al位点的优质 HMW-GS和优质LMW-GS予以说明。对优质拉面品种的HMW-GS和LMW-GS的分子标记检测发现，除已发现的优质拉面亚基类型外，2*和Glu-B3a等亚基类型对新疆拉面的品质也有一定的正向效应。Glu-Al位点的Ax2*基因表达的2*亚基通过提高面筋强度(Payne P I， Lawrence G J. Catalogue of alleles for the complex gene loci, Glu-Al,Glu-Bl, and Glu-Dl which code for high molecular weight subunits of glutenin in hexaploid wheat . Cereal Research Communications, 1983，11 :29-35.)，对拉面品质有一定的贡献。此外，1B/1R易位对小麦的蛋白特性也有显著影响。小麦的IB染色体短臂被黑麦的 IR染色体短臂取代而形成小麦-黑麦1B/1R易位系。易位使普通小麦IB染色体短臂上 LMW-GS(Glu-B3位点)和醇溶蛋白(Gli-Bl位点)缺失，或被品质较差的黑麦碱(secalin 基因编码)取代，导致面团粘性增大、强度降低，对面团流变学特性和面条品质都有极显著的负面影响(Wieser H, Kieffer R, Lelley T. The influence of 1B/1R chromosome translocation on gluten protein composition and technological properties of bread wheat . J Sci Food Agric，2000，80 :1640-1647.)。芦静(芦静，黄天荣，聂莉小麦高分子量谷蛋白亚基及1B/1R易位系对新疆拉面品质性状的影响.新疆农业科学， 2010,47(10) :1909-1917.)等研究发现，与非1B/1R易位系(不含有co-secalin基因)相比，1B/1R易位系(含有ω-本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：穆培源，张晓科，相吉山，王晓龙，桑伟，徐红军，韩新年，聂迎彬，崔凤娟，邹波，
申请(专利权)人：新疆农垦科学院，
类型：发明
国别省市：
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