一种鱼腥草注射液的检测方法技术

本发明专利技术公开一种鱼腥草注射液的质量检测方法，该方法包括含量测定、鉴别和/或指纹图谱检测方法。该方法照气相色谱法；取4-萜品醇对照品、α-松油醇对照品、乙酸龙脑酯对照品、甲基正壬酮分别加正己烷制成对照品溶液；取鱼腥草注射液加入正己烷，加无水硫酸钠制成供试品溶液；分别吸取对照品溶液和供试品溶液，注入气相色谱仪，测定；按含量测定项下方法进行检测，记录色谱图，供试品指纹图谱与对照指纹图谱相似度应不得低于0.85。本发明专利技术还提供了鱼腥草注射液中聚山梨酯80限量检查的检测方法、鱼腥草药材或注射液中薄层色谱的鉴别方法及挥发油含量的检测方法。本发明专利技术质量检测方法专属性好，线性关系良好，仪器精密度良好，重复性良好。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种注射液的质量检测方法，特别涉及一种鱼腥草注射液的质量检测方法。
技术介绍
鱼腥草为三白草科多年生草本植物蕺菜Houttuynia cordata Thunb.的带根全草，又名侧耳根、紫蕺、猪鼻孔、九节莲等，其新鲜植株破碎后有刺鼻的腥臭味，广泛分布于我国中部、东南及西南各省区，尤以湖南、湖北、四川、江苏等省居多。鱼腥草具有清热解毒、 消痈排脓、利尿通淋的功效，临床用于肺痈吐脓、痰热喘咳、热痢、热淋、痈肿疮毒等病症。研究表明，鱼腥草中含有的挥发性成分有黄酮类、有机酸、留醇类、生物碱类等成分。鱼腥草注射液是经过水汽蒸馏后加入辅料灭菌制备而得，主要成分为其挥发性成分。鱼腥草注射液是鲜鱼腥草经水蒸气蒸馏制成的灭菌水溶液。法定质量标准源于部颁标准《中药成方制剂》第十七册WS3-B-3^4-98，及国家药品标准修订批件2001ZB0086， 法定质量标准中含量测定项仅测定甲基正壬酮一种成分，且仅规定了较低的下限值，标准未收载中药指纹图谱的控制项、未进行挥发油量的控制、鉴别项仅收载了两项专属性不强的化学反应鉴别及一个单一成分的薄层鉴别试验，现行法定质量未能有效对产品的理化性质及有效性进行有效控制。
技术实现思路
本专利技术目的在于公开一种鱼腥草注射液的质量检测方法。本专利技术目的是通过如下方案实现的本专利技术鱼腥草注射液的质量检测方法，包括如下含量测定、鉴别和/或指纹图谱检测方法A.鱼腥草注射液中4种成份同时检测的含量测定方法为色谱条件与系统适用性试验，30mX0. 25mm, 0. 25 μ mDB-1毛细管柱为色谱柱；初始70°C保持5分钟，每分钟5°C升至140°C，保持5分钟，每分钟20°C升至250°C，进样口温度为230°C，检测器为FID，检测器温度为^0°C，载气为N2，载气流速为l.Oml/min，分流比为5 15 1，进样为Iy 1，理论板数按甲基正壬酮峰计算应不低于10000 ；内标溶液配制，取正十一碳烯，精密称定，加正己烷制成每Iml含1 ^ig的溶液；对照品溶液配制，分别取4-萜品醇对照品、α -松油醇对照品、乙酸龙脑酯对照品、甲基正壬酮对照品，精密称定，分别加正己烷制成每Iml含8 12mg、4 6mg、6 10mg、l ^ig的对照品储备液，分别精密量取各对照品储备液，加正己烷制成每Iml约含lmg、0. 5mg、0. SmgUmg的混合溶液，作为混合对照品储备液，取混合对照品储备液0. 5ml，置2ml量瓶中，精密加入0. 2ml内标溶液，加正己烷稀释至刻度，摇勻，即得；供试品溶液配制，取鱼腥草注射液50ml，置圆底烧瓶中，连接挥发油测定器，自测定器上端加水充满刻度部分，加入正己烷0. 5ml，连接回流冷凝管，加热至沸，保持微沸40分钟， 冷却至室温，分取正己烷层，加无水硫酸钠约0. 4g，振摇，正己烷液移至2ml量瓶中，并用正己烷洗涤无水硫酸钠，洗液并入同一量瓶中，精密加入0. 2ml内标溶液，加正己烷稀释至刻度，摇勻，即得；分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1 μ 1，注入气相色谱仪，测定，即得；每Iml含α -松油醇(C8H18O)应为2. 0 10. 0 μ g，甲基正壬酮(C11H22O)应为6. 0 20. 0 μ g，4-萜品醇(C8H18O)应不低于5. 0 μ g，乙酸龙脑酯(C12H2tlO2)应不低于0. 8 μ g ；B.鱼腥草药材中4种成份同时检测的含量测定方法为色谱条件与系统适用性试验，30mX0. 25mm, 0. 25 μ mDB-1毛细管柱作为色谱柱，初始70°C保持5分钟，每分钟5°C升至140°C，保持5分钟，每分钟20°C升至250°C，进样口温度为230°C，检测器为FID，检测器温度为^0°C，载气为N2，载气流速为l.Oml/min，分流比为5 15 1，进样为Iy 1，理论板数按甲基正壬酮峰计算应不低于10000 ；内标溶液配制，取正十一碳烯，精密称定，加正己烷制成每Iml含1 ^ig的溶液；对照品溶液配制，取4-萜品醇对照品、α -松油醇对照品、乙酸龙脑酯对照品、甲基正壬酮对照品，精密称定，分别加正己烷制成每Iml含0. 5 1. 5mg、0. 2 lmg、6 10mg、8 12mg的对照品储备液，分别精密移取各对照品储备液^iil、 ImlUmUml于IOml量瓶中，精密加入Iml内标溶液，加正己烷稀释至刻度，摇勻，即得； 供试品溶液配制，取鱼腥草药材，剪碎，取45 55g，精密称定，置250ml圆底烧瓶中，加水 150ml，连接挥发油测定器，自测定器上端加水充满刻度部分，加正己烷1ml，连接回流冷凝管，加热至沸，保持微沸4小时，冷却至室温，分取正己烷层，加无水硫酸钠约0. 3 0. 5g，振摇，正己烷液移至IOml量瓶中，并用正己烷洗涤无水硫酸钠，洗液并入同一量瓶中，精密加入Iml内标溶液，加正己烷稀释至刻度，摇勻，即得；分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各1 μ 1，注入气相色谱仪，测定，即得海Ig含α-松油醇(C8H18O)应不低于1.5yg，含甲基正壬酮(C11H22O)应不低于120 μ g，含4-萜品醇(C8H18O)应不低于3. O μ g，含乙酸龙脑酯(C12H2tlO2)应不低于 12. Oyg;C.鱼腥草注射液指纹图谱检测方法按含量测定项下方法进行检测，记录色谱图；积分参数设置为切除前4分钟溶剂峰，去除内标峰，斜率(Slope Sensitivity)为5， 峰宽(Peak Width)为 0.1，最小峰面积(Area reject)为 4，最小峰高(Height reject) 为0. 1，以《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2009版)》计算相似度，供试品指纹图谱与对照指纹图谱相似度应不得低于0. 85 ；指纹图谱共有11个特征峰，以甲基正壬酮RT =17. 20min为参照峰，各峰相对保留时间为1号峰0. 465士0. 080，2号峰0. 486士0. 049， 3 号峰 0. 557士0. 056,4 号峰 0. 673士0. 067,5 号峰 0. 712士0. 071,6 号峰 0. 741 士0. 074， 7 号峰 0. 810士0. 081,8 号峰 0. 828士0. 082,9 号峰 0. 991 士0. 099，S 峰 1. 000士0. 000， 10 号峰 1. 5 士0. 156 ；相对峰面积为 1 号峰 0. 062士0. 006,2 号峰 0. 041 士0. 004,3 号峰 0. 072 士 0. 007，4 号峰 0. 066 士 0. 007，5 号峰 0. 031 士 0. 003，6 号峰 0. 024 士 0. 002，7 号峰 1. 541 士0. 154，8 号峰 0. 463士0. 046，9 号峰 0. 185士0. 019，S 峰 1. 000士0. 000，10 号峰 0. 021 士 0. 002 ；D.鱼腥草药材指纹图谱检测方法按含量测定项下方法进行检测，记录色谱图； 积分参数设置为切除前4分钟溶剂峰，去除内标峰，Slope Sensitivity为5，Peak Width 为0. 1，Area reject为4，Height本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种鱼腥草注射液的质量检测方法，其特征在于该方法包括如下含量测定、鉴别和／或指纹图谱检测方法：Ａ．鱼腥草注射液中４种成份同时检测的含量测定方法为：气相色谱法，色谱条件与系统适用性试验，３０ｍ×０．２５ｍｍ，０．２５μｍＤＢ－１毛细管柱为色谱柱；初始７０℃保持５分钟，每分钟５℃升至１４０℃，保持５分钟，每分钟２０℃升至２５０℃，进样口温度为２３０℃，检测器为ＦＩＤ，检测器温度为２８０℃，载气为Ｎ２，载气流速为１．０ｍｌ／ｍｉｎ，分流比为５～１５∶１，进样为１μｌ，理论板数按甲基正壬酮峰计算应不低于１００００；内标溶液配制，取正十一碳烯，精密称定，加正己烷制成每１ｍｌ含１～４ｍｇ的溶液；对照品溶液配制，分别取４－萜品醇对照品、α－松油醇对照品、乙酸龙脑酯对照品、甲基正壬酮对照品，精密称定，分别加正己烷制成每１ｍｌ含８～１２ｍｇ、４～６ｍｇ、６～１０ｍｇ、１～４ｍｇ的对照品储备液，分别精密量取各对照品储备液，加正己烷制成每１ｍｌ约含１ｍｇ、０．５ｍｇ、０．８ｍｇ、１ｍｇ的混合溶液，作为混合对照品储备液，取混合对照品储备液０．５ｍｌ，置２ｍｌ量瓶中，精密加入０．２ｍｌ内标溶液，加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液配制，取鱼腥草注射液５０ｍｌ，置圆底烧瓶中，连接挥发油测定器，自测定器上端加水充满刻度部分，加入正己烷０．５ｍｌ，连接回流冷凝管，加热至沸，保持微沸４０分钟，冷却至室温，分取正己烷层，加无水硫酸钠约０．４ｇ，振摇，正己烷液移至２ｍｌ量瓶中，并用正己烷洗涤无水硫酸钠，洗液并入同一量瓶中，精密加入０．２ｍｌ内标溶液，加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得；分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各１μｌ，注入气相色谱仪，测定，即得；每１ｍｌ鱼腥草注射液中含α－松油醇（Ｃ８Ｈ１８０）应为２．０～１０．０μｇ，甲基正壬酮（Ｃ１１Ｈ２２Ｏ）应为６．０～２０．０μｇ，４－萜品醇（Ｃ８Ｈ１８Ｏ）应不低于５．０μｇ，乙酸龙脑酯（Ｃ１２Ｈ２０Ｏ２）应不低于０．８μｇ；Ｂ．鱼腥草药材中４种成份同时检测的含量测定方法为：气相色谱法，色谱条件与系统适用性试验，３０ｍ×０．２５ｍｍ，０．２５μｍＤＢ－１毛细管柱作为色谱柱，初始７０℃保持５分钟，每分钟５℃升至１４０℃，保持５分钟，每分钟２０℃升至２５０℃，进样口温度为２３０℃，检测器为ＦＩＤ，检测器温度为２８０℃，载气为Ｎ２，载气流速为１．０ｍｌ／ｍｉｎ，分流比为５～１５∶１，进样为１μｌ，理论板数按甲基正壬酮峰计算应不低于１００００；内标溶液配制，取正十一碳烯，精密称定，加正己烷制成每１ｍｌ含１～４ｍｇ的溶液；对照品溶液配制，取４－萜品醇对照品、α－松油醇对照品、乙酸龙脑酯对照品、甲基正壬酮对照品，精密称定，分别加正己烷制成每１ｍｌ含０．５～１．５ｍｇ、０．２～１ｍｇ、６～１０ｍｇ、８～１２ｍｇ的对照品储备液，分别精密移取各对照品储备液２ｍｌ、１ｍｌ、１ｍｌ、４ｍｌ于１０ｍｌ量瓶中，精密加入１ｍｌ内标溶液，加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液配制，取鱼腥草药材，剪碎，取４５～５５ｇ，精密称定，置２５０ｍｌ圆底烧瓶中，加水１５０ｍｌ，连接挥发油测定器，自测定器上端加水充满刻度部分，加正己烷１ｍｌ，连接回流冷凝管，加热至沸，保持微沸４小时，冷却至室温，分取正己烷层，加无水硫酸钠约０．３～０．５ｇ，振摇，正己烷液移至１０ｍｌ量瓶中，并用正己烷洗涤无水硫酸钠，洗液并入同一量瓶中，精密加入１ｍｌ内标溶液，加正己烷稀释至刻度，摇匀，即得；分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各１μｌ，注入气相色谱仪，测定，即得；每１ｇ鱼腥草药材含α－松油醇（Ｃ８Ｈ１８Ｏ）应不低于１．５μｇ，含甲基正壬酮（Ｃ１１Ｈ２２Ｏ）应不低于１２０μｇ，含４－萜品醇（Ｃ８Ｈ１８Ｏ）应不低于３．０μｇ，含乙酸龙脑酯（Ｃ１２Ｈ２０Ｏ２）应不低于１２．０μｇ；Ｃ．鱼腥草注射液指纹图谱检测方法：按含量测定项下方法进行检测，记录色谱图；积分参数设置为切除前４分钟溶剂峰，去除内标峰，斜率（Ｓｌｏｐｅ　Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ）为５，峰宽（Ｐｅａｋ　Ｗｉｄｔｈ）为０．１，最小峰面积（Ａｒｅａ　ｒｅｊｅｃｔ）为４，最小峰高（Ｈｅｉｇｈｔ　ｒｅｊｅｃｔ）为０．１，以《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（２００９版）》计算相似度，供试品指纹图谱与对照指纹图谱相似度应不得低于０．８５；指纹图谱共有１１个特征峰，以甲基正壬酮ＲＴ＝１７．２０ｍｉｎ为参照峰，各峰相对保留时间为１号峰０．４６５±０．０８０，２号峰０．４８６±０．０４９，３号峰０．５５７±０．０５６，４号峰０．６７３±０．０６７，５号峰０．７１２±０．０７１，６号峰０．７４１±０．０７４，７号峰０．８１０±０．０８１，８号峰０．８２８±０．０８２，９号峰０．９９１±０．０９９，Ｓ峰１．０００±０．０００，１０号峰...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：毕开顺，吴飞驰，潘红炬，李清，仇萍，朱雅宁，李苏翠，吴建国，
申请(专利权)人：湖南正清制药集团股份有限公司，雅安三九药业有限公司，
类型：发明
国别省市：43