本发明专利技术公开了一种己酸菌和液体窖泥混合菌液的培养方法，该方法首先采用己酸菌培养基和液体窖泥培养基对己酸菌和液体窖泥菌种分别进行培养，之后依次以1％的己酸菌种、9％的液体窖泥菌种接种卡氏罐、不锈钢种子罐和不锈钢发酵罐，从而制得己酸菌和液体窖泥混合菌液。该方法制得的己酸菌和液体窖泥混合菌液用于养护窖泥、培养人工窖泥可解决人为加入的钙类物质进入窖泥促使窖泥老化的问题和缸式培养中操作繁琐、质量有限且不稳定的问题，同时，还解决了己酸菌、液体窖泥单独使用效果欠佳的问题。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及酿酒
，具体涉及。
技术介绍
在浓香型大曲酒中，其主体香味物质己酸乙酯的窖内生化合成是由窖泥中的己酸菌代谢的己酸与糟醅体系中的乙醇缩合而成。因此，窖泥中己酸菌类芽孢杆菌的数量、质量与酒质的关系极大。在人工窖泥的培养及窖泥的养护中，人工培养窖泥功能菌起着重要的作用，其培养方式一般为己酸菌的培养与液体窖泥的培养。但是人工培养窖泥功能菌时需用大量钙类物质(如碳酸钙、过磷酸钙等)以促进己酸的生成，从而这些钙类物质进入窖泥后，容易在窖泥中形成乳酸钙而造成窖泥老化；另外，液体窖泥的培养一般采用缸式培养， 其培养基灭菌、温度控制、防止染菌等方面都存在着一定的限制，因此所培养的液体窖泥质量有限且不稳定，所采用培养基也有待改进；同时，实践表明，无论己酸菌还是液体窖泥单独使用时，其效果都不够理想。
技术实现思路
本专利技术所要解决技术问题是如何提供，该方法解决了人为加入的钙类物质进入窖泥促使窖泥老化的问题和缸式培养中操作繁琐、质量有限且不稳定的问题，同时，还解决了己酸菌、液体窖泥单独使用效果欠佳的问题。为了达到上述专利技术目的，本专利技术所采用的技术方案为提供，其特征在于所述培养方法依次包括如下步骤A、三角瓶己酸菌种培养己酸菌种是指属名为Clostridium、种名为kluyver的科氏梭菌；在三角瓶中装入除95%的酒精外的己酸菌培养基组分，将三角瓶于0. IMpa高压灭菌 30min,冷至32°C，按10%接种，按己酸菌培养基的配方要求加入95%的酒精，用硅胶塞密封，30 32°C培养7天；其中所述己酸菌培养基包含的各个组分及其重量百分比为=NaAC 0. 5%，(NH4)2SO4 :0. 05%, K2HPO4 0. 04%,MgSO4 0. 02%,丢糟浸液3 5%,酵母膏0. 1%，95% 的酒精2 4%,水91 94% ；B、三角瓶液体窖泥菌种培养所述液体窖泥菌种为从使用时间在20年以上的优质窖泥中优选所得，优质窖泥中含己酸菌彡1.0X108个/ml，丁酸菌彡5.0X105个/ml ；在三角瓶中装入除95%的酒精外的液体窖泥培养基组分，将三角瓶于0. IMpa高压灭菌30min，冷至32°C，按10%接种，按液体窖泥培养基的配方要求加入95%的酒精，用硅胶塞密封，30 32°C培养7天；其中所述优质窖泥的选定标准为水分(％):38 42 ；PH值5 7;己酸菌(XlO7个/ g.干土)彡 1. 0 ；丁酸菌(X IO4 个 / g.干土)彡 5. 0 ；氨态氮(mg/100g·干土) 180 450 ；有效磷(mg/100g·干土)120 240 ；腐殖质(％) :10 15 ；所述液体窖泥培养基包含的各个组分及其重量百分比为丢糟浸液45 50%，大曲粉2%,底锅水2%, K2HPO4 0. 3%, NaAC: 0. 3%, 95% 的酒精2 4%,黄水3 5%,水37 45% ；C、卡氏罐培养在卡氏罐中装入除95%的酒精外的液体窖泥培养基组分；将卡氏罐于 0. IMpa高压灭菌30min，冷至32°C，以1 %的己酸菌、9%的液体窖泥菌种接种，按液体窖泥培养基的配方要求加入95%的酒精，密封，30 32°C培养7天；D、不锈钢种子罐培养检查种子罐，保证无漏水、漏电、漏汽，清洗种子罐，然后关闭底阀和放菌种液阀，打开人孔盖、排汽阀和进料阀；按照液体窖泥培养基的配方，在种子罐中加入除95%的酒精外的其它物料，打开搅拌器进行搅拌，定容后关闭进料阀和搅拌器；打开蒸汽阀进行煮料，保持煮沸状态30分钟，盖好人孔盖，当种子罐内物料自然降温到60°C时， 打开冷却水阀进行降温同时启动搅拌器进行搅拌，降温至32°C时关闭冷却水阀；将卡氏罐的己酸菌和液体窖泥混合菌液以10%的接种量加入种子罐中，再加入95%的酒精，搅拌均勻后关闭搅拌器和排汽阀，盖好人孔盖，保持温度在30 32°C范围内，培养7天；E、不锈钢发酵罐培养检查发酵罐，保证无漏水、漏电、漏汽，清洗发酵罐，然后关闭底阀和放菌种液阀，打开人孔盖、排汽阀和进料阀；按照液体窖泥培养基的配方，在发酵罐中加入除95%的酒精外的其它物料，打开搅拌器进行搅拌，定容后关闭进料阀和搅拌器；打开蒸汽阀进行煮料，保持煮沸状态30分钟，盖好人孔盖，当发酵罐内物料自然降温到60°C时， 打开冷却水阀进行降温同时启动搅拌器进行搅拌，降温至32°C时关闭冷却水阀；将不锈钢种子罐的己酸菌、液体窖泥混合菌种子液以10%的接种量加入发酵罐中，再加入95%酒精， 搅拌均勻后关闭搅拌器和排汽阀，盖好人孔盖，保持温度在30 32°C范围内，培养7天；F、发酵期满，检测所制得的己酸菌和液体窖泥混合菌液的各指标如下外观浅黄色； 气味窖泥气味中带有己酸气味；理化指标pH> 5. 0 ；己酸菌。1. 5 X IO8个/ml ；丁酸菌 彡 6X IO5 个/ml。综上所述，本专利技术所提供的己酸菌和液体窖泥混合菌液的培养方法可以解决以下问题(1)解决了目前窖泥功能菌的人工培养及应用中人为加入的钙类物质进入窖泥促使窖泥老化的问题；(2)解决了目前窖泥功能菌的人工培养及应用中缸式培养中操作繁琐、质量有限且不稳定的问题；(3)解决了目前窖泥功能菌的人工培养及应用中己酸菌、液体窖泥单独使用效果欠佳的问题。具体实施例方式本专利技术所提供的己酸菌和液体窖泥混合菌液的培养方法依次包括如下步骤A、三角瓶己酸菌种培养己酸菌种是指属名为Clostridium、种名为kluyver的科氏梭菌；在三角瓶中装入除95%的酒精外的己酸菌培养基组分，将三角瓶于0. IMpa高压灭菌 30min,冷至32°C，按10%接种，按己酸菌培养基的配方要求加入95%的酒精，用硅胶塞密封，30 32°C培养7天；其中所述己酸菌培养基包含的各个组分及其重量百分比为=NaAC 0. 5%，(NH4)2SO4 :0. 05%,5K2HPO4 0. 04%,MgSO4 0. 02%,丢糟浸液3 5%,酵母膏0. 1%，95% 的酒精2 4%,水91 94% ；B、三角瓶液体窖泥菌种培养所述液体窖泥菌种为从使用时间在20年以上的优质窖泥中优选所得，优质窖泥中含己酸菌彡1.0X108个/ml，丁酸菌彡5.0X105个/ml ；在三角瓶中装入除95%的酒精外的液体窖泥培养基组分，将三角瓶于0. IMpa高压灭菌30min，冷至32°C，按10%接种，按液体窖泥培养基的配方要求加入95%的酒精，用硅胶塞密封，30 32°C培养7天；其中所述优质窖泥的选定标准为水分(％):38 42 ；PH值5 7;己酸菌(XlO7个/ g.干土)彡 1. 0 ；丁酸菌(X IO4 个 / g.干土)彡 5. 0 ；氨态氮(mg/100g·干土) 180 450 ；有效磷(mg/100g·干土)120 240 ；腐殖质(％) :10 15 ；所述液体窖泥培养基包含的各个组分及其重量百分比为丢糟浸液45 50%，大曲粉2%,底锅水2%, K2HPO4 0. 3%, NaAC: 0. 3%, 95% 的酒精2 4%,黄水3 5%,水37 45% ；C、卡氏罐培养在卡氏罐中装入除95%的酒精外的液体窖泥培养基组分；将卡氏罐于 0. IMpa高压本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种己酸菌和液体窖泥混合菌液的培养方法，其特征在于：所述培养方法依次包括如下步骤：Ａ、三角瓶己酸菌种培养：己酸菌种是指属名为Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ、种名为ｋｌｕｙｖｅｒ的科氏梭菌；在三角瓶中装入除９５％的酒精外的己酸菌培养基组分，将三角瓶于０．１Ｍｐａ高压灭菌３０ｍｉｎ， 冷至３２℃，按１０％接种，按己酸菌培养基的配方要求加入９５％的酒精，用硅胶塞密封，３０～３２℃培养７天；其中所述己酸菌培养基包含的各个组分及其重量百分比为：ＮａＡＣ：０．５％，（ＮＨ４）２ＳＯ４：０．０体窖泥混合菌液的各指标如下：外观：浅黄色；气味：窖泥气味中带有己酸气味；理化指标：ｐＨ≥５．０；己酸菌：≥１．５×１０８个／ｍｌ；丁酸菌：≥６×１０５个／ｍｌ。，降温至３２℃时关闭冷却水阀；将不锈钢种子罐的己酸菌、液体窖泥混合菌种子液以１０％的接种量加入发酵罐中，再加入９５％酒精，搅拌均匀后关闭搅拌器和排汽阀，盖好人孔盖，保持温度在３０～３２℃范围内，培养７天；Ｆ、发酵期满，检测所制得的己酸菌和液液体窖泥培养基的配方，在发酵罐中加入除９５％的酒精外的其它物料，打开搅拌器进行搅拌，定容后关闭进料阀和搅拌器；打开蒸汽阀进行煮料，保持煮沸状态３０分钟，盖好人孔盖，当发酵罐内物料自然降温到６０℃时，打开冷却水阀进行降温同时启动搅拌器进行搅拌种子罐中，再加入９５％的酒精，搅拌均匀后关闭搅拌器和排汽阀，盖好人孔盖，保持温度在３０～３２℃范围内，培养７天；Ｅ、不锈钢发酵罐培养：检查发酵罐，保证无漏水、漏电、漏汽，清洗发酵罐，然后关闭底阀和放菌种液阀，打开人孔盖、排汽阀和进料阀；按照定容后关闭进料阀和搅拌器；打开蒸汽阀进行煮料，保持煮沸状态３０分钟，盖好人孔盖，当种子罐内物料自然降温到６０℃时，打开冷却水阀进行降温同时启动搅拌器进行搅拌，降温至３２℃时关闭冷却水阀；将卡氏罐的己酸菌和液体窖泥混合菌液以１０％的接种量加入密封，３０～３２℃培养７天；Ｄ、不锈钢种子罐培养：检查种子罐，保证无漏水、漏电、漏汽，清洗种子罐，然后关闭底阀和放菌种液阀，打开人孔盖、排汽阀和进料阀；按照液体窖泥培养基的配方，在种子罐中加入除９５％的酒精外的其它物料，打开搅拌器进行搅拌，：３～５％，水：３７～４５％； Ｃ、卡氏罐培养：在卡氏罐中装入除９５％的酒精外的液体窖泥培养基组分；将卡氏罐于０．１Ｍｐａ高压灭菌３０ｍｉｎ， 冷至３２℃，以１％的己酸菌、９％的液体窖泥菌种接种，按液体窖泥培养基的配方要求加入９５％的酒精，１００ｇ．干土）：１２０～２４０；腐殖质（％）：１０～１５；所述液体窖泥培养基包含的各个组分及其重量百分比为：丢糟浸液：４５～５０％，大曲粉：２％，底锅水：２％， Ｋ２ＨＰＯ４：０．３％，ＮａＡＣ： ０．３％， ９５％的酒精：２～４％，黄水，３０～３２℃培养７天；其中所述优质窖泥的选定标准为：水分（％）：３８～４２；ＰＨ值：５～７；己酸菌（×１０７个／ ｇ．干土）≥１．０；丁酸菌（×１０４个／ ｇ．干土）≥５．０；氨态氮（ｍｇ／１００ｇ．干土）：１８０～４５０；有效磷（ｍｇ／酸菌≥１．０×１０８个／ｍｌ，丁酸菌≥５．０×１０５个／ｍｌ；在三角瓶中装入除９５％的酒精外的液体窖泥培养基组分，将三角瓶于０．１Ｍｐａ高压灭菌３０ｍｉｎ， 冷至３２℃，按１０％接种，按液体窖泥培养基的配方要求加入９５％的酒精，用硅胶塞密封５％，Ｋ２ＨＰＯ４：０．０４％，ＭｇＳＯ４：０．０２％，丢糟浸液：３～５％，酵母膏：０．１％，９５％的酒精：２～４％，水：９１～９４％；Ｂ、三角瓶液体窖泥菌种培养：所述液体窖泥菌种为从使用时间在２０年以上的优质窖泥中优选所得，优质窖泥中含己...
【技术特征摘要】
1. 一种己酸菌和液体窖泥混合菌液的培养方法，其特征在于所述培养方法依次包括如下步骤A、三角瓶己酸菌种培养己酸菌种是指属名为Clostridium、种名为kluyver的科氏梭菌；在三角瓶中装入除95%的酒精外的己酸菌培养基组分，将三角瓶于0. IMpa高压灭菌 30min,冷至32°C，按10%接种，按己酸菌培养基的配方要求加入95%的酒精，用硅胶塞密封，30 32°C培养7天；其中所述己酸菌培养基包含的各个组分及其重量百分比为=NaAC 0. 5%，(NH4)2SO4 :0. 05%, K2HPO4 0. 04%,MgSO4 0. 02%,丢糟浸液3 5%,酵母膏0. 1%，95% 的酒精2 4%,水91 94% ；B、三角瓶液体窖泥菌种培养所述液体窖泥菌种为从使用时间在20年以上的优质窖泥中优选所得，优质窖泥中含己酸菌彡1.0X108个/ml，丁酸菌彡5.0X105个/ml ；在三角瓶中装入除95%的酒精外的液体窖泥培养基组分，将三角瓶于0. IMpa高压灭菌30min，冷至32°C，按10%接种，按液体窖泥培养基的配方要求加入95%的酒精，用硅胶塞密封，30 32°C培养7天；其中所述优质窖泥的选定标准为水分(％):38 42 ；PH值5 7;己酸菌(XlO7个/ g.干土)彡 1. 0 ；丁酸菌(X IO4 个 / g.干土)彡 5. 0 ；氨态氮(mg/100g·干土) 180 450 ；有效磷(mg/100g·干土)120 240 ；腐殖质(％) :10 15 ；所述液体窖泥培养基包含的各个组分及其重量百分比为丢糟浸液45 50%，大曲粉2%,底锅水2%, K2HPO4 0. 3%, NaAC: 0. 3%, 95% 的酒精2 4%,黄水3 5%,水37 45% ；C、卡氏罐培养在卡氏罐中装入除95...
【专利技术属性】
技术研发人员：杜礼泉，唐聪，
申请(专利权)人：四川省绵阳市丰谷酒业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：51
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。