秀珍菇液体菌种、菌丝体及半连续制备工艺制造技术

一种秀珍菇液体菌种的半连续制备工艺，涉及菌种培养领域，该工艺是将秀珍菇母种经过活化发酵培养，得到秀珍菇菌种，然后将秀珍菇菌种放入发酵培养基中进行培养3‑5天，得到培养菌液，将培养菌液按重量分为N等份，在每等份培养菌液中加入新鲜的发酵培养基，使每等份添加发酵培养基后的培养菌液的重量与培养菌液总重量相等，继续培养2‑4天，得到秀珍菇液体菌种。该工艺是间隔相同时间，分出发酵液的一部分，然后增添同等体积的新鲜发酵液发酵，秀珍菇液体菌种的产量很高、成本低，易于推广使用。本发明专利技术还提供一种秀珍菇液体菌种，其成活率高，质量好，易于保藏；本发明专利技术还提供一种秀珍菇菌丝体，可作为秀珍菇有效成分提取分离及深加工的原料。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及菌种培养领域，具体而言，涉及一种秀珍菇液体菌种、菌丝体及半连续制备工艺。
技术介绍
食用菌作为一种重要的生物资源，不仅味道鲜美、低脂肪、低能量，还富含膳食纤维、维生素和蛋白质等营养素，正发展成为继动物性食品、植物性食品之外的第三类食品，即菌物性食品。此外，食用菌还可以提高人体免疫功能、防治多种慢性病，在抗衰老等方面也具有显著的功效。在众多食用菌中，秀珍菇(Pleurotus geesteranus)是侧耳科侧耳属的一种，俗称环柄香菇。秀珍菇中含有许多营养成分，如氨基酸、矿物质等，还有丰富的蛋白质，而且脂肪的量较低，经过烹饪的秀珍菇风味独特，十分可口。食用秀珍菇对我们的身体也是具有相当多的益处，因为它能够改善我们自身的免疫力，也可以对人们所担心的血脂及胆固醇起到一定的降低作用，倍受广大消费者喜爱。秀珍菇具有很好的发展潜力和经济效益，而且具有非常好的国内市场和出口前景，因此市场需求量越来越大。以前小作坊式的固体培养方式已经远远不能满足秀珍菇产业快速发展的趋势，大规模机械化的生产已是必然，因此采用现代生物工程技术的液体深层发酵培养越来越受到重视。液体深层发酵是采用生物培养(发酵)设备，通过液体深层培养(发酵)的方式生产食用菌菌球，作为食用菌栽培的种子，或作为有效成分提取分离及深加工的原料。液体深层发酵培养的液体菌种具有固体菌种不可比拟的优势：制种快、活力强、纯度高、防污染、缩短栽培周期。另外，根据生产过程中发酵连续度的不同以及对微生物培养情况的不同，可以将液体深层发酵分为三种类型：连续发酵、分批发酵以及补料分批发酵。其中，补料分批发酵是在整个分批发酵的过程中，向发酵罐或者是发酵瓶中有间断性的添加新鲜培养基，但是不会将用过的发酵液连续地倒出，因此最终发酵液的含量会增加。补料分批发酵是处于连续发酵与分批发酵中间的一类发酵方式，对比分批发酵，补料分批发酵能够减少发酵液的粘度以及底物的浓度，也能提升微生物利用营养因素及氧气的能力，同时可以缓解底物的遏制作用，最终使微生物的产量有较大的提升。但是目前补料分批发酵多应用在酶制剂、有机酸以及抗生素等微生物产品的制备，很少应用于培养食用菌的液体菌种。究其原因，是因为目前的补料分批发酵培养食用菌虽然可在一定程度上提交产量，但是由于工序太过繁琐，导致成本高，很难推广使用。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种秀珍菇液体菌种的制备方法，秀珍菇液体菌种的产量很高、成本低，易于推广使用。本专利技术的另一目的在于提供一种秀珍菇液体菌种，其成活率高，质量好，易于保藏。本专利技术的另一目的在于提供一种秀珍菇菌丝体，可作为秀珍菇有效成分提取分离及深加工的原料。本专利技术的实施例是这样实现的：一种秀珍菇液体菌种的半连续制备工艺，其包括以下步骤：将秀珍菇母种经过活化发酵培养，得到秀珍菇菌种；将秀珍菇菌种放入发酵培养基中进行培养3-5天，得到培养菌液，将培养菌液按重量分为N等份，N＝4-6，在每等份培养菌液中加入新鲜的发酵培养基，使添加发酵培养基后的每等份培养菌液的重量与培养菌液总重量相等，继续培养2-4天，得到秀珍菇液体菌种。在本专利技术较佳的实施例中，上述发酵培养基的制备工艺为：按重量份数计，称取30-50份可溶性淀粉，35-65份酵母膏放入800-1200份水中煮15-25min，用3-5层纱布过滤，得滤液；在滤液中加入1-2份KCl，0.004-0.006份维生素B1，分装后，于120-122℃高温灭菌15-25min。在本专利技术较佳的实施例中，上述秀珍菇菌种和培养菌液培养方式为：于20-30℃，转速120-160r/min的条件下摇床培养。在本专利技术较佳的实施例中，上述秀珍菇菌种的加入量为发酵培养基质量的8-12％。在本专利技术较佳的实施例中，上述将秀珍菇母种进行活化发酵培养的方法是：将秀珍菇母种活化后，转接到斜面培养基上，放入26-30℃的恒温培养箱中培养，得到斜面菌种；将斜面菌种接入液体培养基中，斜面菌种的加入量为液体培养基的3-6g/L，于25-29℃，转速170-230r/min的条件下摇床培养5-7天。在本专利技术较佳的实施例中，上述斜面培养基的制备工艺为：按重量份数计，称取30-50份去皮马铃薯，加入160-240份水，煮15-25min，用3-5层纱布过滤，得滤液；向滤液添加3-5份蔗糖，3-5份琼脂粉，补水至总重量为160-240份，混匀融化后进行分装，于120-122℃高温灭菌15-25min。在本专利技术较佳的实施例中，上述液体培养基的制备工艺为：按重量份数计，称取30-50份去皮马铃薯，加入160-240份水，煮15-25min，用3-5层纱布过滤，得滤液；向滤液添加3-5份蔗糖，补水至总重量为160-240份，混匀融化后进行分装，于120-122℃高温灭菌15-25min。一种秀珍菇液体菌种，采用上述的半连续制备工艺制得。在本专利技术较佳的实施例中，上述秀珍菇液体菌种的保藏温度为0-5℃。一种秀珍菇菌丝体，将上述的秀珍菇液体菌种经过微滤膜过滤去除滤液得到。本专利技术实施例的有益效果是：本专利技术实施例将秀珍菇母种经过活化发酵培养，得到秀珍菇菌种，然后将秀珍菇菌种放入发酵培养基中进行培养3-5天，得到培养菌液，将培养菌液按重量分为N等份，在每等份培养菌液中加入新鲜的发酵培养基，使每等份添加发酵培养基后的培养菌液的重量与培养菌液总重量相等，继续培养2-4天，得到秀珍菇液体菌种。本专利技术实施例间隔相同时间，倒出之前发酵液的一部分，然后增添同等体积的新鲜发酵液发酵，秀珍菇液体菌种的产量很高、成本低，易于推广使用；而且制得的秀珍菇液体菌种成活率高，质量好，易于保藏；进一步得到的秀珍菇菌丝体，可作为秀珍菇有效成分提取分离及深加工的原料。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本专利技术实施例的秀珍菇液体菌种、菌丝体及半连续制备工艺进行具体说明。本专利技术实施例提供一种秀珍菇液体菌种的半连续制备工艺，其包括以下步骤：S1、将秀珍菇母种经过活化发酵培养，得到秀珍菇菌种，具体方法如下：S1A、将秀珍菇母种活化后，转接到斜面培养基上，放入26-30℃，优选28℃的恒温培养箱中培养，得到斜面菌种。其中，斜面培养基的制备工艺为：按重量份数计，称取30-50份去皮马铃薯，加入160-240份水，煮15-25min，用3-5层纱布过滤，得滤液；向滤液添加3-5份蔗糖，3-5份琼脂粉，补水至总重量为160-240份，混匀融化后进行分装，于120-122℃高温灭菌15-25min。优选地，按重量份数计，称取40份去皮马铃薯，加入200份水，煮20min，用4层纱布过滤，得滤液；向滤液添加4份蔗糖，4份琼脂粉，补水至总重量为200份，混匀融化后进行分装，于121℃高温灭菌20min，即得。S1B、将斜面菌种接入液体培养基中，斜面菌种的加入量为液体培养基的3-6g/L，于25-29℃，转速170-230r/min的条件下摇床培养5-7天。优选地，斜面菌种的加入量为液体培养基的4.5g/L，于27℃，转速200r本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种秀珍菇液体菌种的半连续制备工艺，其特征在于，其包括以下步骤：将秀珍菇母种经过活化发酵培养，得到秀珍菇菌种；将所述秀珍菇菌种放入发酵培养基中进行培养3‑5天，得到培养菌液，将所述培养菌液按重量分为N等份，N＝4‑6，在每等份所述培养菌液中加入新鲜的发酵培养基，使添加所述发酵培养基后的每等份所述培养菌液的重量与所述培养菌液总重量相等，继续培养2‑4天，得到秀珍菇液体菌种。

【技术特征摘要】
1.一种秀珍菇液体菌种的半连续制备工艺，其特征在于，其包括以下步骤：将秀珍菇母种经过活化发酵培养，得到秀珍菇菌种；将所述秀珍菇菌种放入发酵培养基中进行培养3-5天，得到培养菌液，将所述培养菌液按重量分为N等份，N＝4-6，在每等份所述培养菌液中加入新鲜的发酵培养基，使添加所述发酵培养基后的每等份所述培养菌液的重量与所述培养菌液总重量相等，继续培养2-4天，得到秀珍菇液体菌种。2.根据权利要求1所述的秀珍菇液体菌种的半连续制备工艺，其特征在于，所述发酵培养基的制备工艺为：按重量份数计，称取30-50份可溶性淀粉，35-65份酵母膏放入800-1200份水中煮15-25min，用3-5层纱布过滤，得滤液；在所述滤液中加入1-2份KCl，0.004-0.006份维生素B1，分装后，于120-122℃高温灭菌15-25min。3.根据权利要求1所述的秀珍菇液体菌种的半连续制备工艺，其特征在于，所述秀珍菇菌种和所述培养菌液培养方式为：于20-30℃，转速120-160r/min的条件下摇床培养。4.根据权利要求1所述的秀珍菇液体菌种的半连续制备工艺，其特征在于，所述秀珍菇菌种的加入量为所述发酵培养基质量的8-12％。5.根据权利要求1所述的秀珍菇液体菌种的半连续制备工艺，其特征在于，将秀珍菇母种进行活化发酵培养的方法是：将所述秀珍菇母种活化后，转接到斜面培养基...

【专利技术属性】
技术研发人员：余晓红，李锋，薛锋，李凤伟，彭英云，徐汉亿，魏天翔，林欣文，王胜，
申请(专利权)人：盐城工学院，
类型：发明
国别省市：江苏;32