一种实时荧光定量RT-PCR检测FMDV的方法技术

本发明专利技术公开了一种实时荧光定量RT-PCR检测FMDV群及其O型、AsiaⅠ型方法，经过对本发明专利技术所建立的方法进行了特异性、灵敏度的验证，结果显示可以较好的将FMDV同偶蹄目其他易感病毒以及O型和AsiaⅠ型区分开，且灵敏度可以达到10个拷贝数的模板用量。本发明专利技术所建立的方法整个反应过程是闭管操作，在最大程度上减少了体系的污染。从获得待检样品到提取核酸，配制荧光定量RT-PCR反应体系，直到出现反应结果，整个过程可以在2.5h内完成，在保证检验结果的基础上大大缩短了检验所需时间。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及检测
，特别涉及一种可以精确、特异、快速检测口蹄疫病毒群特异性、0型特异性、Asia I特异性的方法。
技术介绍
ΠSitiS (Foot and mouth disease, FMD) i由 FMDV (Foot and mouth disease virus)感染引起的偶蹄动物共患的急性、热性和接触性传染病。由于该病发病迅速，传染性较强可能带来严重的影响，因此世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类疫病。该病一经检出，相应的家畜及畜产品就禁止运输和出口，造成巨大的经济和政治影响。我国于2005年对外公布了 Asia I型FMD疫情，加上以前报道FMD，已经有2个血清型的口蹄疫疫情在国内出现过。FMD的爆发和流行除了对畜牧业生产造成巨大的损失外，对人民生活所需要的奶品、肉品供应也造成很大的影响，故各国对FMD的检验检疫非常严格。目前对于口蹄疫病毒的检测方法主要有病毒分离、补体结合实验(CFT)、病毒中和试验(VNT)、动物接种试验及ELISA方法。这些方法操作起来过程繁琐且需时较长，特异性和灵敏度也无法满足目前检测需要。在病毒分离试验中培养细胞过程尤为细心谨慎以本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一种用于实时荧光定量ＲＴ－ＰＣＲ检测ＦＭＤＶ群及其Ｏ型、ＡｓｉａⅠ型的特异性引物，其特征在于，ＦＭＤＶ群特异性引物序列如ＳＥＱ　ＮＯ．１－２所示；ＦＭＤＶ　Ｏ型特异性引物序列如ＳＥＱ　ＮＯ．４－５所示；ＦＭＤＶ　ＡｓｉａⅠ型特异性引物序列如ＳＥＱ　ＮＯ．７－８所示。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：罗宝正，王振全，薄清如，沙才华，徐海聂，廖秀云，陈伟生，李红星，
申请(专利权)人：珠海出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：44