骨基质明胶载体的去活方法技术

本发明专利技术属于生物医学的材料制备领域。特别适用于生物医学中骨形态发生蛋白（ＢＭＰ）的骨基质明胶载体。本发明专利技术方法是利用还原剂破坏其分子内和分子间的二硫键和天然活性的空间构象，使双体结构还原成单体结构，失去诱导活性并与胶原蛋白去复合。该方法的特点是破坏维持蛋白质生理活性的分子结构和构象，提高了抽提去活效率。（*该技术在2018年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术是属于生物医学的材料制备领域，特别适用于骨形态发生蛋白(BMP)的骨基质明胶载体。骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein，简称BMP)是一种具有独特诱导成骨功能的机体蛋白因子，在机体骨组织再生和修复过程中发挥着关键作用。现在已可从牛、马、猪、羊、兔、鼠和人骨或骨肉瘤中生化提取不同种属来源的骨形态发生蛋白(BMP)，或利用生物工程技术制备基因重组的人的骨形态发生蛋白(BMP)。利用其诱导成骨活性，有望实现人体断骨的快速再生连接和缺骨的快速再生修复，在骨科和口腔科临床具有广泛的应用前景，并具有重大的经济和社会效益。为了充分发挥骨形态发生蛋白(BMP)的独特的诱导成骨活性并取得良好的临床治疗效果，需要满足三个条件一、保证骨形态发生蛋白(BMP)的天然立体构象和双体结构的完整，使其活性不被破坏；二、使骨形态发生蛋白(BMP)与适当的载体复合，为被诱导转化的新生成骨细胞提供附着位点，同时载体还起到缓释和引导成骨方向和范围的作用；三、不引起免疫反应。骨基质明胶(bone matrix gelatine，简称BMG)是从牲骨中提取的，主要成分是胶原蛋白本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种骨基质明胶载体的去活方法，该方法是将新鲜的牲骨股骨去骺端，剔除肌肉、筋膜和骨髓后进行脱脂、脱水处理，其特征在于脱脂脱水处理是在１∶１的乙醇、乙醚中进行后并于４℃再进行破碎研磨，过筛，保留７５－４２５μｍ尺寸大小的组分，１ｍｏｌ盐酸脱钙，水洗至中性后再次脱脂并干燥，保存，再将所获材料脱钙骨基质ＤＢＭ经２ｍｏｌＣａＣＬ↓［２］，０．５ｍｏｌ乙二胺四乙酸钠（ＥＤＴＡ）ｐＨ８．０，５５℃温水顺序抽提（５倍体积，搅拌过夜）后，再采用含有还原剂与变性剂溶液，按５－１０倍体积与ＤＢＭ混合并于室温下抽提２４－４８小时，抽提后用８ｍｏｌ尿素洗涤，再用ｐＨ５．５的酸溶液于６０℃下处理８－１２小时，用水充分洗涤...

【技术特征摘要】
1.一种骨基质明胶载体的去活方法，该方法是将新鲜的牲骨股骨去骺端，剔除肌肉、筋膜和骨髓后进行脱脂、脱水处理，其特征在于脱脂脱水处理是在1∶1的乙醇、乙醚中进行后并于4℃再进行破碎研磨，过筛，保留75-425μm尺寸大小的组分，1mol盐酸脱钙，水洗至中性后再次脱脂并干燥，保存，再将所获材料脱钙骨基质DBM经2mol CaCL2,0.5mol乙二胺四乙酸钠(EDTA)pH8.0,55℃温水顺序抽提(5倍体积，搅拌过夜)后，再采用含有还原剂与变性剂溶液，按5-10倍体积与DBM混合并于室温下抽提24-4...

【专利技术属性】
技术研发人员：李晓光，孙福玉，沈淙，王春华，王勃生，杨志伟，姜雪松，
申请(专利权)人：冶金工业部钢铁研究总院，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]