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一株耐酸酵母及其代谢工程构建产L-乳酸重组菌的方法技术

技术编号:6605672 阅读:323 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一株耐酸酵母及其代谢工程构建产L-乳酸重组菌的方法,属于基因工程技术领域。本发明专利技术筛选分离得到一株能在pH2.5条件下生长且不利用乳酸的酵母,鉴定为木兰假丝酵母C4(CandidamagnoliaeC4),在中国典型培养物保藏中心保藏,保藏编号为CCTCCNO:M2010362;将来源于米根霉As3.819的乳酸脱氢酶编码基因(ldhA)插入含有G418抗性基因的酵母穿梭载体,构建了重组质粒pYX212-kanMX-ldhA;电转化入木兰假丝酵母C4中,得到一株具有产L-乳酸能力的重组菌株木兰假丝酵母C42,其产乳酸量达到42g/L。本发明专利技术所构建的木兰假丝酵母C42具有耐乳酸的明显优势,在生产中可以大幅度降低中和剂CaCO3的用量,减少环境污染。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一株耐酸酵母的筛选,以及产L-乳酸重组菌的构建方法,属于基因工程

技术介绍
乳酸(Lactic acid)是一种重要的有机酸,广泛地存在于人体、动物、植物和微生物中。乳酸因其安全性、光学特性及其特殊的分子结构被广泛应用于食品、医药和化妆品等工业。乳酸分子内含有一个不对称的C原子,存在光学异构现象,具有D-型和L-型两种。由于人体只能利用L (+)-乳酸,因此世界卫生组织提倡在食品及医药行业使用L (+)-乳酸取代目前普遍使用的DL (+)-乳酸;另外L-乳酸的一个重要用途为合成聚乳酸,聚乳酸因可以由可再生资源生产并能被生物所降解而被认为是最有发展前景的聚合物之一。L-乳酸的主要生产方法为微生物发酵法。现国内外研究的L-乳酸生产菌主要集中在乳杆菌、Lac tobacillus )、芽孢杆菌(Macillus )、乳球菌Uac tococcus )和根霉 0%办0/7狀)。在乳酸发酵过程中,pH值会随着乳酸的生成而逐渐降低,由于细菌和根霉菌耐酸性较差,当发酵液处于酸性时将影响菌株的生长和发酵能力。因此,工业上乳酸发酵过程常采用CaCO3作为中和剂,以维持最适pH本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株能够在以乳酸调节pH到2.5的培养环境中生长但不利用乳酸的菌株,命名为木兰假丝酵母C4(Candida magnoliae C4),已在中国典型培养物保藏中心保藏,保藏编号为CCTCC NO:M2010362。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:石贵阳张梁丁重阳顾正华王正祥张勤李由然
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:32

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