不对称还原制备(R)-1,3-丁二醇的方法及菌株技术

本发明专利技术提供了一株产羰基还原酶新菌株——克鲁斯假丝酵母(Candida?krusei)ZJB?09162，及其在催化不对称还原4-羟基-2-丁酮制备(R)-1，3-丁二醇中的应用。该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，430072，保藏编号CCTCC?No：M?2010335，保藏日期：2010年12月6日。本发明专利技术的有益效果主要体现在：提供了一种产4-羟基-2-丁酮羰基还原酶的新菌种，通过该菌种可制备高光学纯度的(R)-1，3-丁二醇，转化率＞90％，光学纯度＞99％；使用本发明专利技术的不对称还原工艺，反应条件温和，节能，环保，更重要的是显著提高了过程的原子经济性，具有很好的工业应用前景。

Method and strain for preparing (R) -1,3- butanediol by asymmetric reduction

The present invention provides a new strain for producing carbonyl reductase, Cruise Candida krusei ZJB 09162, and its application in the catalytic asymmetric reduction of 4- hydroxy -2- butanone (R) -1, 3- butanediol. The strain is preserved in a typical Chinese Culture Preservation Center. Address: China, Wuhan, Wuhan University, 430072, preservation numbers CCTCC, No:M, 2010335, and preservation date: December 6, 2010. The beneficial effect of the invention is mainly reflected in: provides a new strain producing 4- hydroxy -2- methyl ethyl ketone carbonyl reductase, the bacteria can be prepared with high optical purity of (R) -1, 3- butanediol, the conversion rate of more than 90%, the optical purity is more than 99%; the invention of the asymmetric reduction process, mild reaction conditions energy saving, environmental protection, and more important is to significantly improve the atom economy process, has good prospects for industrial applications.

【技术实现步骤摘要】
,3-丁二醇的方法及菌株的制作方法
本专利技术涉及一株产羰基还原酶新菌株一克鲁斯假丝酵母(CandidakruseDZJB 09162，及其在催化不对称还原4-羟基-2- 丁酮制备(R) _1，3- 丁二醇中的应用。
技术介绍
(R)-l，3_ 丁二醇，又可记作(R)-1，3_BD0 (结构见式(I))，是一种无色粘稠状，带甜味液体，能与水、乙醇、丙酮、丁酮等混溶。(R)_l，3-丁二醇是一种具有广泛用途的重要手性砌块，如在医药领域用于合成碳青霉烯类抗生素母核氮杂环丁酮，在农药领域用于合成杀虫剂和信息激素，同时它也是合成一大类香料的重要中间体。因此，开展(R)_l，3-丁二醇合成研究具有重要的实际应用价值。权利要求1.一株产羰基还原酶菌株一克鲁斯假丝酵母(Candida krusei)ZJB 09162，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址中国，武汉，武汉大学，430072，保藏编号CCTCC No =M 2010335，保藏日期2010年12月6日。2.如权利要求1所述的克鲁斯假丝酵母ZJB09162在不对称还原4-羟基-2-丁酮制备(R)-l，3-丁二醇中的应用。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述应用为以4-羟基-2-丁酮为底物，以克鲁斯假丝酵母ZJB 09162经培养获得的含酶菌体细胞为催化剂，在20 45°C下，于pH 6. 0 9. 0的缓冲液中进行不对称加氢还原反应8 36h，反应结束后反应液经分离纯化得到所述(R)-1，3-丁二醇。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述缓冲液中还添加有20 100g/L缓冲液的辅助底物，所述辅助底物为下列之一①葡萄糖、②乳糖、③蔗糖、④木糖、⑤果糖、⑥麦芽糖、⑦异丙醇、⑧乙醇、⑨丙三醇。5.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述缓冲液为下列之一pH6. 0 6. 6的柠檬酸缓冲液、pH 6. 5 7. 8的磷酸盐缓冲液或pH 7. 4 9. 0的Tris-HCl缓冲液。6.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述缓冲液中底物初始浓度为5 30g/L。7.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述含酶菌体细胞由如下方法获得将克鲁斯假丝酵母ZJB 09162接种至发酵培养基，在25 43°C、100 300rpm下培养M 72h，得到发酵液离心分离，即得到所述含酶菌体细胞；所述发酵培养基终浓度组成如下葡萄糖 10 60g/L，酵母膏 10 50g/L, MgSO4O. 2 1. 5g/L, (NH4)2HPO4O. 5 3. 5g/L, KH2PO4O. 5 3. 5g/L，溶剂为水，pH 5. 5 8. 5。全文摘要本专利技术提供了一株产羰基还原酶新菌株——克鲁斯假丝酵母(Candida krusei)ZJB 09162，及其在催化不对称还原4-羟基-2-丁酮制备(R)-1，3-丁二醇中的应用。该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，地址中国，武汉，武汉大学，430072，保藏编号CCTCC NoM 2010335，保藏日期2010年12月6日。本专利技术的有益效果主要体现在提供了一种产4-羟基-2-丁酮羰基还原酶的新菌种，通过该菌种可制备高光学纯度的(R)-1，3-丁二醇，转化率＞90％，光学纯度＞99％；使用本专利技术的不对称还原工艺，反应条件温和，节能，环保，更重要的是显著提高了过程的原子经济性，具有很好的工业应用前景。文档编号C12R1/72GK102154133SQ20111003066公开日2011年8月17日 申请日期2011年1月27日 优先权日2011年1月27日专利技术者沈寅初, 邱照宽, 郑仁朝, 郑裕国 申请人:浙江工业大学本文档来自技高网...

【技术保护点】
１．一株产羰基还原酶菌株——克鲁斯假丝酵母（Ｃａｎｄｉｄａ　ｋｒｕｓｅｉ）ＺＪＢ　０９１６２，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，４３００７２，保藏编号ＣＣＴＣＣ　Ｎｏ：Ｍ　２０１０３３５，保藏日期：２０１０年１２月６日。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：郑裕国，郑仁朝，邱照宽，沈寅初，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：86