【技术实现步骤摘要】
木专利技术属于免疫分析医学领域，木专利技术公开丫 -种D-聚体时间分辨荧光免疫分析试剂盒及其制备方法。
技术介绍
[)-聚体(D-dimer)是纤维蛋Π笮体(SFM)经活化因rXTTTa交联后冉经纤溶_ 水解产'+:的一种特异降解产物，D-聚体浓度升高反映体内纤维蛋Π溶解性增强,有助于血栓前状态及血栓形成性疾病的诊断,疗效观察及预后判断。B前检测D-聚体的免疫分析方法 要有乳胶凝集法，Sj联免疫法，免疫过滤胶体金 色反应法。上述方法都有各Π的缺点乳胶凝集法只能定性检测，不能测定血浆巾 D-聚体含it的变化。_联免疫法操作容易受到酶活性变化的影响，结果不太准确。免疫过滤胶体金显色反应法特异性不好。
技术实现思路
木专利技术的0的是克服现有技术巾的小足.提供-种D-聚体时间分辨荧光免疫分析试剂盒。木专利技术的第个B的是提供-种D-聚体时间分辨荧光免疫分析试剂盒的制备方法。木专利技术的技术方案概述如下[)-聚体时间分辨荧光免疫分析试剂盒，山下述成分组成DD-聚体校准品，用下述方法制成ffl人血浆或人红血球将D-聚体抗原纯品稀释成系列浓度.毎瓶装0. 5毫7卜每个浓度点，真...
【技术保护点】
１．Ｄ－二聚体时间分辨荧光免疫分析试剂盒，其特征是由下述成分组成：１）Ｄ－二聚体校准品，用下述方法制成：用人血浆或人红血球将Ｄ－二聚体抗原纯品稀释成系列浓度，每瓶装０．５毫升每个浓度点，真空干燥，所述Ｄ－二聚体抗原纯度≥９０％；２）Ｄ－二聚体单克隆抗体包被的微孔板；３）铕元素标记的另一株Ｄ－二聚体单克隆抗体；４）洗涤液，用下述方法制成：取１．２１２ｇ三羟甲基氨基甲烷，溶于９００ｍＬ去离子水中，用盐酸调节ｐＨ值为７．８，加去离子水至１０００ｍＬ，再加入氯化钠９ｇ，加入Ｔｗｅｅｎ２００．１ｍＬ，完全溶解；５）增强液，用下述方法制成：取１０００ｍＬ双蒸水，加入３．６ｍＬ冰醋酸，０...
【技术特征摘要】
1.D-聚体时间分辨荧光免疫分析试剂盒,其特征是山下述成分组成DD-聚体校准品，用下述方法制成用人血浆或人红血球将D-聚体抗原纯品稀释成系列浓度，每瓶装0.5毫升毎个浓度点.真空十燥,所述D-聚体抗原纯度乡90% ；2)D-聚体φ.克隆抗体包被的微孔板..3)铕元素标β的另一株I)-聚体中.克隆抗体；4)洗涤液，用下述方法制成取1.212g三羟甲基鉍基甲烷，溶于900ml.去离了-水巾，用盐酸调节PH值为7. 8’加去离子水至1 OOOinI,,再加入氯化钠9g,加入Tween200. ImL,完全溶5)增强液，用下述方法制成取1OOOmL双蒸水’加入3. 6mL冰醋酸，0. 5g醋酸钠’ 0.002 0. OlgP-萘甲酰三氟丙酮,0.01 0. 05g三辛基氧化膦，1 ~~ 2mL Triton X-100, 混勻；6)分析缓冲液.用下述方法制成取6.06三羟甲基氨基甲烷，溶于900ml.去离子水中， 用盐酸调节PH值为7.8，加去离子水至IOOOmL,再加入IOg牛血清白蛋白，完全溶解。2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于所述D-聚体中克隆抗体包被的微孔板是用下述方法制成将D-聚体中克隆抗体溶解于包被稀释液中，使其浓度为5ug/mL,加入微孔板中，使200 μ 1/孔，37。C放置24小时’用包被稀释液250微升/孔洗板1次,再用质 浓度为2 。BSA溶液封闭，室温十燥，所述包被稀释液是用下述方法制成取6. 06三轻甲基氨基甲烷.溶于900mL去离子水中，用盐酸调节pH值为7. 8’加去离子水至IOOOinL. 冉加入IOg牛血淸Π蛋Π,完企溶解。3.根据权利要求1所述的试剂盒.其特征是所述铕元索标E的另一株D-聚体中克隆抗体是ffl下述方法制成将50 100 μ g D-聚体中克隆抗体溶于50 μ 1 0. OlM pH = 8. 5的碳酸盐缓冲液中，加入使用IOOu 1双蒸水溶解的40mg的异硫氰酸苄基亚乙基三胺四乙酸铕钠，在4'C反应12-18小时，将反应液转移到预先用0. 05M pH = 7. 8 Tris-HCl缓冲液平衡的Sephadex G50柱上层析分离，以0. 05M pH = 7. 8 Tris-HCl平衡液洗脱，自动收集,用紫外分光光度计检测蛋Π浓度,收集第-个大畔-。4.D-聚体时间分辨荧...
【专利技术属性】
技术研发人员：董全文，
申请(专利权)人：协和生物制药天津有限公司，
类型：发明
国别省市：12
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