大豆总黄酮及其制备方法和药物新用途技术

本发明专利技术是关于大豆总黄酮及其提取工艺和药物新用途的发明专利技术，本发明专利技术公开了大豆总黄酮的提取工艺，还公开了大豆总黄酮在制备治疗高脂血证的药物中的应用，大豆总黄酮在制备降低肝内甘油三脂的药物中的应用，大豆总黄酮在制备调节脂质代谢紊乱的药物中的应用，以及大豆总黄酮在制备降低脂质过氧化物的药物中的应用。（*该技术在2019年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术是关于大豆总黄酮制备方法及其药物新用途的专利技术，具体讲是从大豆坯中提取总黄酮，并将大豆总黄酮制备成治疗高脂血症的保健食品和药物。现代医学研究表明，高脂血症(hyperlipoproteinemia,HLP)是一种脂代谢疾病，是引发心脑血管疾病及脂肪肝的重要危险因素之一，只有采用科学、合理的策略，有效地控制血脂，才能预防相关疾病的发生。天然药物治疗高脂血症具有应用广泛，疗效确切，毒副作用小的优势，因而受到患者好评和临床医学专家的重视。古今中外的医学书籍常将大豆列为能使人类长寿健康的首要食品。明代李时珍认为“食服大豆令人长肌肤，益颜色、填骨髓，加气力，补虚能食。”；能“宽中益气、和脾胃，消胀满，下大肠浊气”。我国大豆年产量1380万吨左右，占世界第三位，豆类及豆制品含有多种防癌、抗癌、预防和治疗心血管疾病物质，其中包括大豆黄酮、大豆皂苷、凝集素、蛋白酶抑制剂、纤维素、钙、硒、植酸、叶酸等，利用丰富的大豆资源生产保健食品及药物对提高我国人民身体健康素质有其现实意义和巨大的经济效益。本专利技术目的是提供大豆总黄酮提取方法及其药物新用途，该新用途是大豆总黄酮在制备防治高脂血症药物中的应用。本专利技术运用现代科学方法，提取大豆总黄酮，并研究了其抗血脂升高的作用，发现大豆总黄酮能有效的抑制血脂的增高，减少肝内的甘油三脂堆积，调节脂质代谢紊乱，降低血清和肝脂质过氧化物的生成。其药理作用与进口药物诺衡相当，但价格低廉，为防治高脂血症提供了新的用药依据，完成了本专利技术。本专利技术的大豆总黄酮是从大豆坯中提取获得的，该方法是以大豆坯为原料，将所有黄酮共轭物转化为黄酮甙，并从所说的大豆坯原料中提取富含大豆黄酮的物质。本专利技术所述的从大豆坯中回收大豆黄酮的方法包括用乙醇从大豆坯中提取总黄酮，这里的总黄酮包括金雀黄素共轭物、金雀黄素甙、金雀黄素甙元、大豆甙共轭物、大豆甙、大豆甙元等化合物；将黄酮共轭物转化为黄酮甙；然后用一种溶剂回收大豆黄酮，并制成大豆黄酮含量较高的保健品或药品。具体方法如下用40-90％乙醇提取大豆坯两次，合并两次的提取液后，回收酒精。该法所得的提取液，可提取大豆黄酮总量的70-95％。然后用NaOH调节上述所得的提取液，使pH为7-11，维持提取液在20-80℃ 1-12小时，该法可将95％的黄酮共轭物转化为黄酮甙。向上述所得的提取液中加入适量体积正丁醇，第一次萃取1-12小时；收集丁醇部分，再加入适量体积正丁醇，第二次萃取1-12小时；收集丁醇部分，合并二次丁醇萃取液，回收丁醇后，得干燥的棕黄色固体物，即为大豆总黄酮。本专利技术的大豆总黄酮作为药物活性成分，可以按照常规的制备方法，制备成适合于临床使用的任何剂型药物及其任何保健品，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、丸剂、膏剂等。实验例 大豆总黄酮对实验性大鼠高脂血症的治疗作用一．实验材料1动物Wister雄性大鼠，6-8周，体重150-180g/只，共60只。由中医研究院动物室提供。2药物1)大豆提取物每毫升含总黄酮5mg；2)阳性对照药诺衡，美国派德药厂生产，900mg/片；3)胆酸钠海淀区微生物培养基制品厂生产；4)丙基硫氧嘧啶5)试剂及药盒(1)甘油三酯(TG)试剂盒，由北京化工厂临床试剂分厂生产，编号990319；(2)总胆固醇测定试剂盒(TC)，由北京化工厂临床试剂分厂生产，编号990408；(3)血清高密度脂蛋白试剂盒，北京化工厂临床试剂分厂生产，编号990522。二．实验方法1、制备高脂饲料1％胆固醇，10％猪油，0.2％甲基硫氧嘧啶，0.5％胆酸，5％蔗糖，83.3％基础饲料。各物混匀，加水搅拌，弄平切块，放入烘干箱中烘干，温度100℃左右。2、动物分组，喂养与给药取大鼠60只，随机分为正常组，模型组，阳性药诺恒组(各10只)以及总黄酮组(30只)正常组每日给予普通饲料喂养，其余各组每日给予高脂饲(20g/只)，待全部吃完后再补给足量正常基础饲料。阳性对照组每日每只给诺衡16.76mg，治疗组分大，中，小三个剂量组每日每只分别给总黄酮2ml/100g体重，1ml/100g体重和0.5ml/100g体重，以上均灌胃给药，每日一次。正常组，模型组均给予生理盐水，每日每只2ml/100g体重。所有动物自由饮水，共饲养15或30日。3、标本采集所有大鼠于取材前一天停高脂饲料，并禁食12小时。断头取血及肝脏，制备血清及肝匀浆，储存于-20℃备用。4、观察项目及测定方法胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C，HDL-C)，采用酶法，用724型可见光分光光度计测定，试剂盒由北京化工厂临床试剂分厂生产；肝组织中TC、TG的提取采用法，测定用酶法；蛋白含量测定用酚试剂法；MDA用改良八木国夫法测丙二醛(malondiadehycle,MDA)。5、统计学处理采用t检验三．结果本实验用高脂饲料饲喂大鼠造成高脂血症模型，进食高脂饲料后，高脂大鼠与正常组相比体重上升缓慢，但模型组与治疗组体重并无明显差异。高脂饲料饲喂后两周，模型组TC已有明显升高，但TG仍然正常，当饲喂时间增至四周，血清TG、TC两项均高于正常，两组数据比较有显著意义(P＜0.005)(表1)。故实验时间定为四周。动物饲喂四周后，大豆总黄酮大、中剂量组大鼠血清TG.TC较模型组明显降低，差别有显著意义(P＜0.05)；阳性对照药(诺衡)组大鼠血清TC也较模型组明显降低，差别有显著意义(P＜0.05)，但对TG作用不明显。大豆总黄酮与诺衡组比较，中药大、中剂量降低TG作用强于阳性对照药，降低TC差别无意义(P＞0.05)。为进一步观察肝组织中甘油三酯堆集，本实验还测定了肝组织中的TG。结果显示，大豆总黄酮中、小剂量组能明显降低其水平，与模型组比较有显著意义(P＜0.05)(表2)。大豆总黄酮大中剂量组能明显升高血清高密度脂蛋白，与模型组数据比较有显著意义(P＜0.05)，诺恒组及大豆总黄酮小剂量组升高高密度脂蛋白，但无统计学意义。模型组血清低密度脂蛋白较正常组有显著增高，两组数据比较有显著意义(P＜0.001)，诺恒组及大豆总黄酮大、中剂量组降低低密度脂蛋白有极显著意义(P＜0.001)(表3)。血清MDA测定数据显示，诺恒组、大剂量组、中剂量组均能明显降低MDA水平，与模型组比较均有显著意义(P＜0.005)；肝组织MDA测定数据显示，诺恒组、大剂量组均能明显降低MDA水平，与模型组比较均有显著意义(P＜0.05)(表4)。表1大豆总黄酮对大鼠血清甘油三脂及胆固醇的影响(X±SE) *与正常组比较P＜0.05；#与模型组比较p＜0.05.表2大豆总黄酮对大鼠血清脂蛋白的影响(X±SE) *与正常组比较P＜0.05；#与模型组比较p＜0.05.表3大豆总黄酮对大鼠肝组织甘油三脂及胆固醇的影响(X±SE) *与正常组比较P＜0.05；#与模型组比较p＜0.05.表4大豆总黄酮对大鼠血清和肝组织MDA的影响(X+SE) *与正常组比较P＜0.05；#与模型组比较p＜0.05.四．讨论本研究结果显示大豆提取物(总黄酮)有明显的对抗实验性高脂血症、脂肪在肝脏中蓄积的作用。复制动物高脂血症模型是研究动脉粥样硬化的疾病的重要方法。大鼠虽然对高脂饮食较耐受，但价廉，来源广，取本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种大豆黄酮提取物，其特征在于该总黄酮是下述方提取获得：用４０－９０％乙醇提取大豆坯两次，合并两次的提取液后，回收酒精即得。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：王继峰，
申请(专利权)人：王继峰，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]