2β－取代鬼臼衍生物及其制备方法技术

下述通式化合物：　　　　＊＊＊　　　　其中Ｒ↓［１］为α－羟基或β－羟基，Ｒ↓［２］为氢或甲基，Ｘ为卤素原子或甲基。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及的是用于制备抗肿瘤药物的化合物及其制备方法。
技术介绍
70年代发现的天然产物鬼臼毒素的半合成糖甙衍生物Etoposide(VP-16)，其已成为目前临床上使用的最重要抗肿瘤药物之一，但它的毒副作用，特别是对骨髓有抑制作用，使临床应用受到一定的限制。在上述鬼臼毒素衍生物的结构中，2-位的a-构型是抗肿瘤活性所必需的，但由于热力学稳定性使2-位的α-构型在体内与β-构型的苦鬼臼毒素产生一个动态平衡，但苦鬼臼毒素无抗肿瘤活性，从而使鬼臼毒素的在体内的抗肿瘤活性受到影响。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题克服上述现有技术的缺陷，提供一种破坏药物在体内的动态平衡的鬼臼毒素衍生物及其制备方法，其明显提高鬼臼毒素衍生物在体内的抗肿瘤活性。本专利技术是用于制备一类抗肿瘤药物的化合物及其制备方法，代表化合物的化学名称为2β-溴代鬼臼毒素衍生物，结构式如下所示 式中R1为α-羟基或β-羟基，R2为氢或甲基，X为卤素原子或甲基。本专利技术的专利技术点是在2-位引入了一个基团，从而破坏了药物在体内的动态平衡，明显提高了鬼臼毒素衍生物的抗肿瘤活性。上述结构式的化合物，当R1为α-羟基，R2为甲基，X为溴原子，其化学名称为2β-溴代鬼臼毒素，熔点为107-110℃，IR(KBr，cm-1)3420(-OH)，1772(-内酯C＝O)，1591，1540，1479(芳环C＝C)，1239，1129(C-O-C)，930(OCH2O)。上述结构式的化合物，当R1为β-羟基，R2为氢，X为溴原子，其化学名称为2β-溴-4β-脱氧-4’-去甲基表鬼臼毒素，熔点为167-168℃，IR(KBr，cm-1)3472(-OH)，1755(-内酯C＝O)，1587，1505，1482(芳环C＝C)，1238，1126(C-O-C)，931(OCH2O)。本专利技术2β-溴代鬼臼衍生物的制备通用步骤如下1)将4位含吡喃保护基(或其他保护基)的鬼臼毒素或4，4’位含吡喃保护基的表鬼臼毒素溶于四氢呋喃(THF)中，缓慢滴加到二异丙基胺基锂溶液中，保持反应温度在-78℃，滴加20-40分钟；2)接着缓慢滴加溶有Br2的THF混合液，控制反应温度在-78℃，滴加20-40分钟，然后在室温下搅拌8-12小时，整个反应过程均在N2保护下进行；3)反应结束后，加有机溶剂，用饱和氯化铵洗涤，分出有机层，干燥，减压蒸去溶剂；4)将由3)得到的化合物溶于混合液(10％HCl∶THF＝1∶9)中，回馏，冷却，加有机溶剂，依次用饱和NaHCO3、水洗涤，分出有机层，用无水Na2SO4干燥，减压蒸去溶剂，用硅胶柱或制备薄板层析纯化产物，得到本专利技术所述的化合物。本专利技术利用在2-位引入的基团，破坏了药物在体内的动态平衡，在体外对人肺腺癌、人肝癌和P388小鼠白血病有很强的抑制细胞生长的作用，明显提高了鬼臼毒素衍生物的抗肿瘤活性。具体实施例方式实施例12β-溴代鬼臼毒素的制备将含有LDA的体系降温到-78℃，将1.0g 4位含吡喃保护基(或其他保护基如氨基)的鬼臼毒素溶于10mlTHF的混合液慢慢滴加到含有LDA的反应体系中，滴加速度保持在反应体系温度在-78℃，约30分钟。然后再慢慢滴加含有0.4mlBr2的10mlTHF混合液，控制反应温度在-78℃，约30分钟。然后在室温下搅拌12小时，整个反应过程均在N2保护下进行。待反应结束后，加100mlCH2Cl2，用饱和NH4Cl洗涤，分出有机层，无水硫酸钠干燥，减压蒸去溶剂。去保护基反应将上述反应得到的化合物于20ml混合液(10％HCl∶THF＝1∶9)中，回馏2小时，冷却。加CH2Cl2至100ml，用饱和NaHCO3、水洗涤各一次，分出有机层，用无水Na2SO4干燥，减压蒸去溶剂，用硅胶柱层析纯化产物(淋洗液∶乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1∶1)，为白色固体。m.p.107-110℃，得率32％，IR(KBr，cm-1)3420(-OH)，1772(γ-内酯C＝O)，1591，1540，1479(芳环C＝C)，1239，1129(C-O-C)，930(OCH2O)。1HNMR(CDCl3，TMS)δ(ppm)7.11(s，1H，5-H)，6.51(s，1H，8-H)，6.37(s，2H，2’6’-H)，5.99(brs，2H，OCH2O)，4.78(d，J＝5.1Hz，1H，1-H)，4.61(d，1H，4-H)，4.12(dd，J＝7.5，9.0Hz，11-Ha)，3.81(s，3H，4’-OCH3)，3.76(s，6H，3’5’-OCH3)，3.74(s，1H，11Hb)，2.83(ddd，J＝9.6，9.0，6.8Hz，1H，3-H)，2.04(s，1H，4-OH)。MS(EI)(m/z，％)414(M+-Br，100％)，399(M+-Br-CH3，4％)，299(3.34)，229(3.47)，79(3.98)。化合物2β-溴代鬼臼毒素进行了抗肿瘤生物活性体外筛选试验。用药浓度分别为10-4、10-5、10-6、10-7、10-8mol/L；对肿瘤细胞生长的抑制率的评价标准无效10-5mol/L＜85％；弱效10-5mol/L≥85％或10-6mol/L≥50％、强效10-6mol/L≥85％或10-7mol/L≥50％。A-549人肺腺癌和BEL-7402人肝癌使用的是磺酰罗丹明B(sulforhodamineB，SRB)蛋白染色法，作用时间为72小时；对P388小鼠白血病和HL-60人白血病使用的是四氮唑盐(microculturetetrozolium，MTT)还原法，作用时间为48小时。药理试验数据如下(表1-3)表1对肿瘤细胞BEL-7402生长的抑制率％浓度(mol/L) 10-410-510-610-710-8评价2β-溴代鬼臼毒素94.4 90.8 91.2 90.9 0强效表2对肿瘤细胞A-549生长的抑制率％浓度(mol/L) 10-410-510-610-710-8评价2β-溴代鬼臼毒素96.1 91.3 90 90.1 9.7 强效表3对肿瘤细胞P388生长的抑制率％浓度(mol/L) 10-410-510-610-710-8评价2β-溴代鬼臼毒素100 100 100 97.1 96.9 强效实施例22β-溴-4β-脱氧-4’-去甲基表鬼臼毒的制备将含有LDA的体系降温到-78℃，将1.0g 4，4’位含四氢吡喃保护基的表鬼臼毒素溶于10ml THF的混合液慢慢滴加到含有LDA的反应体系中，滴加速度保持在反应体系温度在-78℃，约30分钟。然后再慢慢滴加含有0.4mlBr2的10mlTHF混合液，控制反应温度在-78℃，约需30分钟。然后在室温下搅拌10，整个反应过程均在N2保护下进行。待反应结束后，加100mlCH2Cl2，用饱和NH4Cl洗涤，分出有机层，无水硫酸钠干燥，减压蒸去溶剂。去保护基反应将上述反应得到的化合物于20ml混合液(10％HCl∶THF＝1∶9)中，回馏2小时，冷却。加CH2Cl2至100ml，用饱和NaHCO3、水洗涤各一次，分出有机层，用无水Na2SO4干燥，减压蒸去溶剂，用制备薄板进行纯化(展开剂∶乙酸乙酯∶正己烷＝1∶1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈绍明，
申请(专利权)人：陈绍明，
类型：发明
国别省市：