一种稳定的脂质体组合物制造技术

一种稳定的脂质体组合物，由饱和磷脂和胆固醇作为成膜脂质，加入维生素Ｅ作为抗氧剂，以蔗糖作为冻干赋形剂，采用薄膜蒸发－冷冻干燥的方法制备。这种脂质体可作为抗癌药物紫杉醇的载体，稳定性试验结果表明其在放置过程中稳定，动物试验结果表明制得的紫杉醇脂质体组合物具有与市售紫杉醇注射液相当的抑瘤作用，而耐受性提高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于药物制剂领域，涉及一种稳定的脂质体组合物，具体涉及一种以饱和磷脂和胆固醇为成膜脂质的脂质体组合物，尤其涉及一种包含紫杉醇的脂质体组合物。
技术介绍
脂质体(liposome)的主要成分和结构与人体细胞膜相近，生物相容性优良，已广泛被用作药物传输的载体。脂质体常用的脂质材料有天然卵磷脂、天然大豆磷脂。这些脂质由于其分子中含有不饱和的脂肪酸基，易氧化水解成过氧化物、丙二醛、脂肪酸及溶血磷脂，后者可进一步水解成甘油磷酸复合物及脂肪酸等。磷脂的氧化水解还可使膜的流动性降低，促进药物渗漏。这些不稳定因素不利于脂质体产品的制备、贮存和临床上的安全使用。脂肪酸基饱和的磷脂可有效避免上述氧化水解过程。这种含有饱和脂肪酸基的磷脂称为饱和磷脂，如氢化饱和卵磷脂、氢化饱和大豆磷脂，及合成磷脂如二棕榈酰磷脂酰胆碱、二硬脂酰磷酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰丝氨酸、二硬脂酰磷酰丝氨酸、二棕榈酰磷脂酰甘油、二硬脂酰磷酰甘油、二棕榈酰磷脂酰肌醇、二硬脂酰磷酰肌醇、二棕榈酰磷脂酸、二硬脂酰磷酸，以及二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺。这些饱和磷脂具有不易氧化、水解慢，在体内稳定的优点。其中氢化饱和卵磷脂、氢化饱和大豆磷脂价格低廉，来源广泛，是制备脂质体较理想的饱和磷脂。但饱和磷脂制备脂质体亦存在一些问题，如饱和磷脂相变温度高，制备过程中需要较高温度，由此会影响到热敏药物的稳定性。饱和磷脂具有较强的刚性，形成脂质体弯曲的双分子膜比较困难。在先的公开文献对饱和磷脂用于制备脂质体作了很多探索，多采用两种或以上的饱和和/或不饱和磷脂制备脂质体。CN95192734提及以基本饱和的中性磷脂和基本饱和的带电磷脂制备大多层脂质体，用以包封非电解水溶性药物。在该公开文件中，制备得到的脂质体粒径大小在0.5～3.0微米的范围内，如此宽范围粒径分布的脂质体在给药后，很难达到被动靶向集中的目的，且用于静脉给药存在风险。还有研究利用饱和磷脂的相变温度通常高于不饱和磷脂的相变温度的特点以避免被包裹的药物的泄漏，提高脂质体的稳定性。这方面的研究有CN01135935所提及的，采用相变温度高的第一磷脂与相变温度低(低于贮存温度)的第二磷脂制备脂质体。其中第一磷脂选自氢化天然磷脂或长碳链饱和的磷脂，第二磷脂选自不饱和磷脂或短碳链饱和的磷脂，因其相变温度的不同，而使双层膜上双相共存，形成两相之间的边界障碍，避免疏水性药物的自行聚集析出和破坏脂质体的结构及稳定，因此提高疏水性药物的包封量，使得药脂比提高。在该公开文件中，采用两种及以上的饱和或/和不饱和磷脂，未提及以一种饱和磷脂和胆固醇制备脂质体的技术方案。抗癌药物紫杉醇(paclitaxe)是从短叶红豆杉(Taxus brevifolia Nutt.)的树皮中提取的天然产物，具有良好的抗肿瘤活性，但因其在水中的溶解度极微，仅在甲醇、乙醇、二甲基亚砜等有机溶剂中可溶，因而给紫杉醇静脉给药带来极大困难。解决其溶解性的公知的方法之一，是采用表面活性剂聚氧乙烯蓖麻油和乙醇作为溶剂溶解紫杉醇，如1992年美国食品药品管理局(FDA)批准的紫杉醇注射液(美国百时美施贵宝公司生产，商品名为Taxol，在中国注册的商品名为泰素)。聚氧乙烯蓖麻油虽能增加紫杉醇的水溶性，但由于其在体内降解时能释放组织胺，从而可能发生严重的超过敏反应。此外，紫杉醇本身亦有毒性。因此我们期望制备一种不含聚氧乙烯蓖麻油和乙醇，在体内能够定向分布，从而降低全身毒性的紫杉醇制剂。为达到此目的，脂质体不失为其理想的载体之一。紫杉醇脂质体的研究从1990年代初开始进行。在WO9513053中，提及以带有负电荷的脂质和两性脂质制备紫杉烷类药物的脂质体，以使制备的脂质体带有电荷，防止聚集。公知的，微粒所带的电荷将影响其在体内的处置。还有研究使用特殊的脂质，如在WO9318751、US5424073、US5648090、CN99801424中，提及紫杉醇脂质体配方中，添加一种特别的磷脂，心磷脂(cardiolipid)；这种磷脂较为特殊，其分子结构具有一个较大的亲水基与四个脂肪碳链，从而提升包裹的紫杉醇的量。但这种磷脂非常昂贵。在中国已经上市的注射用紫杉醇脂质体，如南京思科药业有限公司生产的力扑素，仍存在发生超敏反应的风险，需要提前注射地塞米松等进行抗过敏性预处理。因此，迫切需要提供一种更为安全、有效的新型紫杉醇脂质体组合物。
技术实现思路
本专利技术提供了一种以饱和磷脂和胆固醇作为成膜脂质的脂质体组合物及其制备方法。本专利技术还提供了一种在制备和贮存过程中稳定的含有抗癌药物的脂质体组合物及其制备方法。尤其提供了一种稳定的紫杉醇脂质体组合物，其不含聚氧乙基代蓖麻油，避免了含聚氧乙基代蓖麻油导致的超敏反应，提高了用药安全性和患者的顺应性。制备本专利技术脂质体的必需组分之一是饱和磷脂。通常，这种饱和磷脂含有的饱和脂肪酸基的碳原子数为14～18。碳原子数小于14，脂质体容纳内水相的能力降低，并且给予后，脂质体在血中的稳定性降低。另一方面，碳原子数过多，生物相容性降低，并且由于其碳链增长，相变温度升高，生产脂质体过程中需要非常高的温度，这对药物及脂质体的稳定性都是不利的因素。因此，本专利技术所使用的饱和磷脂选自例如氢化饱和的大豆磷脂或卵磷脂、二棕榈酰磷酯胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱。本专利技术使用的饱和磷脂不限于以上磷脂种类，凡含有的饱和脂肪酸基的碳原子数为14～18的磷脂，均可用于本专利技术的目的。本专利技术优选的饱和磷脂选自氢化饱和的大豆磷脂、氢化饱和的卵磷脂、二棕榈酰磷酯胆碱、二硬脂酰磷脂酰胆碱。如本领域技术人员所公知，饱和磷脂相变温度高，刚性大，单独形成弯曲的稳定的双分子膜有一定困难。在本专利技术脂质体中，添加胆固醇与饱和磷脂一起作为成膜脂质，可以调节脂质双分子膜的流动性。按照本专利技术，胆固醇与饱和磷脂的摩尔比例为1∶5至1∶1，优选1∶3至1∶1。除上述必需的饱和磷脂和胆固醇之外，可以任选的加入抗氧剂如天然型或合成的维生素E，以防止药物的氧化。按照本专利技术，抗氧剂与成膜脂质的重量比为1∶1000至1∶100，优选1∶300至1∶100。采用常用的脂质体制备方法可以得到本专利技术的脂质体，例如采用高压匀化法、微孔挤压法、超声分散法，优选采用高压匀化法。上述提到的参考文献中的制备方法均引入本文作为参考。如本领域技术人员所公知，其中含有活性化合物的脂质体可用冷冻干燥来稳定，以制成适宜的组合物形式。在该过程中，需要加入冷冻赋形剂，依靠其稳定膜作用，保证脂质体的完整性。已知的冷冻赋形剂是多元醇类，如甘油、葡萄糖、蔗糖、乳糖、海藻糖、氨基酸等。在本专利技术中，优选蔗糖作为冻干赋形剂。按照本专利技术，冻干赋形剂与成膜脂质的重量之比为1∶8至1∶1，本专利技术优选1∶4至1∶1。本专利技术的载药脂质体组合物形式可通过上述冷冻干燥的方法来制备。例如，将活性成分、饱和磷脂、胆固醇，如果必要，和抗氧化剂，按比例溶解在适宜的溶剂中成澄明溶液，在50℃～65℃恒温下，按照常规方法，如减压蒸发法，如果必要，在惰性气体存在下减压蒸发，除去该液体混合物中的溶剂，使之成膜，再加入溶有按比例计算的冻干赋形剂的水溶液，水化、超声或匀浆至细度为0.1～0.3微米之间，以0.22微米的微孔滤膜过滤除菌，分装入西林瓶等适宜的容器中，通过冷冻干燥从该混本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脂质体，其特征在于，脂质体的成膜脂质由饱和磷脂和胆固醇组成，活性成分包裹在脂质体中。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：郭建辉，刘善奎，翟晨淏，
申请(专利权)人：上海艾力斯医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]