了哥王提取物、其制备方法及其在制备抗炎药物中的应用技术

本发明专利技术涉及一种了哥王提取物、其制备方法及其在制备药物中的应用，提取的化合物的结构式如图。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及一种了哥王提取物、其制备方法及其在制备药物中的应用，特别是涉及从植物了哥王中提取一种具有抗炎效果的化合物。技术背景 困扰人们的日常炎性疾病包括，关节炎症例如骨关节炎、类风湿性关节炎、类风 湿性脊椎炎、痛风关节炎等；炎性皮肤病例如湿疹、牛皮癣、皮炎等；炎性眼疾例如眼色素 层炎、结膜炎等；肺部疾病例如哮喘、支气管炎、急性呼吸窘迫综合症等；菌血症、那毒素血 症、口疮溃疡、龈炎、胰腺炎等；胃肠道疾病例如节段性回肠炎、萎縮性胃炎、溃疡性结肠炎、 腹腔炎、消化性溃疡、应激性肠道综合症例如由幽门螺旋杆菌感染而引起的粘膜炎症或者 由非甾体类抗炎药引起的肠胃病等等。 有关各种炎症致病作用的机理是已知体内一氧化氮(N0)是介导细胞免疫和炎 症的毒性物质。其前体是左旋精氨酸(L-arg)，L-arg在NO合成酶(N0S)的作用下生成N0。目前已经分离出三种不同类型的NOS，包括内皮NO合成酶(eN0S)，神经元N0合成酶(nN0S) 及诱导型NO合成酶(iN0S)。目前已知，巨噬细胞、肝细胞、平滑肌细胞、腺癌细胞以及上皮 细胞均能表达iNOS。某些炎性细胞因子和微生物产物如脂多糖(LPS)则可诱导iNOS表达。 iN0S—旦被诱导即可表达出高度活性，产生大量N0，进而导致细胞损伤，造成炎症恶化，甚 至导致癌症。 因此，长时间以来，人们致力于寻找N0合成酶的抑制剂来治疗与之相关的炎性疾 病。但这些抑制剂大多局限于化学合成的物质，副作用较大。 由于各种炎症长期困扰人类的健康生活，有关的科学工作者始终不遗余力地试图 开发新型的疗效确切、副作用少、研制成本低的抗炎活性化合物。加深对中草药的研究可能 是实现这个愿望的良好载体。 了哥王(Wikstroemia indica C. A. Mey)是分布在中国广东、广西、台湾等地的瑞 香科植物。很早就开始用于消肿、止痛、风湿、肿瘤等。此植物治疗慢性支气管炎和癌的临 床效果已得到肯定。在《中药大辞典》(上海人民出版社，1977年出版，51-53页)记载了 哥王生于山脚及山坡潮湿的灌丛中，该植物的茎、叶、根、果实均可入药，具有清热解毒、消 肿散结、止痛功效，治痈肿、风湿痛、跌打损伤。 在中国专利申请号为9811403. 9的"抗艾滋病新药了哥王提取物的制备方法"专 利中描述了提取了哥王中活性物质的方法，但并没有确认该活性物质群的化学结构和理化 参数，从而不能清楚地了解到起作用的物质性能，也就不能进一步的深入研究等。
技术实现思路
本专利技术的目的一是是通过分析提取了哥王中的活性成分，来寻找可用于制备抗炎 药物的有效活性化合物。 本专利技术的另一个目的是提供一种从了哥王植物中提取活性成分的方法。3 本专利技术还提供了从了哥王中提取的化合物用于制备治疗有关炎性疾病的药物用 途。OH 在本专利技术中提供了从了哥王中提取的式(1)化合物。^f^(1), 本专利技术从了哥王中提取活性式(1)化合物的方法包括如下步骤 1) 了哥王经甲醇提取后的提取液减压浓縮、干燥得到提取物； 2)将提取物用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇依次萃取； 3)将乙酸乙酯的萃取物经层析柱用甲醇洗脱； 4)对步骤3)收集到的洗脱液经高压液相色谱进一步分离精制，得到活性式(1)化 合物。 在上述提取方法中，减压浓縮优选在40摄氏度进行。 在上述提取方法中，高压液相色谱的流动相为甲醇水=30 : 70。 本专利技术的另一个方面是提供式(1)化合物或其药学上可接受的盐、对映体、外消 旋体或互变异构体在用于治疗或预防需抑制N0生成活性的疾病的药物制备中的用途。 本专利技术的另一个方面是提供式(1)化合物或其药学上可接受的盐、对映体、外消 旋体、互变异构体或生理官能衍生物在用于治疗或预防炎性疾病的药物制备中的用途。 适宜的盐包括与有机和无机酸或碱形成的盐；药学上可接受的盐包括与下列酸形 成的盐盐酸、氢溴酸、硫酸、柠檬酸、酒石酸、磷酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、三氟乙酸、琥珀酸、 草酸、富马酸、马来酸、丁酮二酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、苯磺酸、羟乙磺酸；药学上可 接受的碱式盐包括铵盐、碱金属盐、如钠盐和钾盐、碱土金属盐如钙盐和镁盐以及与有机碱 如二环己基胺和N-甲基-D-葡糖胺形成的盐。 生理官能衍生物的实例包括酯、酰胺、氨基甲酸酯，优选酯和酰胺。 本专利技术的化合物还可有利地与第二种药学活性物质，尤其是可诱导的环氧酶(C0X-2)同工酶的选择性抑制剂联合用药，具体地本专利技术提供的化合物或其药学上可接受的盐、对映体、外消旋体或互变异构体与C0X-2抑制剂联合用药以治疗炎症、炎性疾病以及与炎症相关的疾病的用途。 炎性疾病及临床病症包括关节疾病，特别是关节炎(例如类风湿性关节炎、骨关 节炎)、或胃肠道疾病(如溃疡性结肠炎、胃炎、以及其它感染引起的粘膜炎症、由非甾体抗 炎药引起的肠病)、肺部疾病(如成人呼吸道窘迫症、哮喘、囊纤维化、慢性阻塞性肺部疾 病)、心脏病(如心肌炎)、神经组织疾病(如多发性硬化病)、胰腺疾病(如糖尿病及并发 症)、肾疾病(如肾小球性肾炎)、皮肤病(如皮炎、牛皮癣、湿疹、荨麻疹)、眼部疾病(如青 光眼)、移植器官疾病(如排斥反应)、多器官疾病(如系统性红斑狼疮)及病毒和细菌感 染后的炎性后遗症。 此外，本专利技术提供的化合物可以有助于预防或治疗与HIV感染有关的淋巴细胞的 丢失、增加放射治疗期间肿瘤细胞的放射性敏感性、降低肿瘤的生长、肿瘤发展、血管生成 和肿瘤转移。 本专利技术提供的化合物还可以用于制备保健食品、饮料、或饲料等。 在本专利技术中提供的提取了哥王中活性化合物的方法简单实用，所提取的活性化合4物结构明确，并具有确切的NO抑制生成活性，达到抗炎的作用，没有细胞毒性。具体实施方式 实施例1 :提取物的制备与化合物结构的确定 将2. 3kg的了哥王的茎或全草粉碎，加入80X甲醇(甲醇水=8 : 2)10升，提 取三次，在4(TC减压浓縮干燥，得到286g提取物。把全部的提取物溶解于2升水中，依次 用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇各2升分3次萃取，这些萃取液在4(TC下减压浓縮干燥，得到 正己烷萃取物6. 5g、乙酸乙酯萃取物62. Og、正丁醇萃取物25. Og。对各种萃取物进行NO 生成抑制活性实验(参照实施例2)，在供试品浓度为100iig/ml的条件下，正己烷萃取物 (76. 1% )、乙酸乙酯萃取物(86. 9% ) 、丁醇萃取物(6. 45% ) ， NO生成抑制率得到肯定；全 部萃取物在MTT细胞毒性实验中都被认定没有细胞毒性。 取活性最强的乙酸乙酯萃取物62g，用S印hadexLH-20层析柱(6. 5X35cm)进行 分离，依次用30%甲醇、70%的甲醇、甲醇洗脱，401:下减压浓縮干燥，得出四个洗脱馏分 fr. 1 (6. 9g) 、 fr. 2 (14. 7g) 、 fr. 3 (12. lg) 、 fr. 4 (2. 7g)。对这些萃取物再次进行NO生成抑 制实验，NO生成抑制率为fr. 1 (22. 6 % ) 、 fr. 2 (89. 7 % ) 、 fr. 3 (58. 6 % ) 、 fr. 4 (89. 7 % )。 取萃取物fr. 2，用silica层析柱(wako gel C_300、2. 2 X 22本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：王立岩，北中进，
申请(专利权)人：学校法人日本大学，王立岩，
类型：发明
国别省市：JP[日本]