积雪苷在制备预防或治疗心肌纤维化的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了积雪苷在制备预防或治疗心肌纤维化的药物中的应用。本发明专利技术通过用积雪苷对自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）心肌纤维化的影响，证实了积雪苷具有抗心肌纤维化的作用。因而，积雪苷可作为活性成份用于制备抗心肌纤维化的药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及积雪苷在制药中的应用，尤其涉及积雪苷在制备预防或治疗心肌纤维化的药物中的应用。
技术介绍
积雪草是一种植物药，积雪苷是从积雪草中提取的物质，也称为积雪甙(Asiaticoside)，化学结构见式I。 式I研究发现积雪苷外用抗皮肤粘膜损伤后，具有纤维疤痕过增生作用，该化合物作为相关用途的化妆品和药品均有上市，在这些产品中积雪苷是其主要活性成份。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于通过设计动物实验方法，研究积雪苷的抗心肌纤维化作用。因此，本专利技术的目的是提供积雪苷在制备预防或治疗心肌纤维化的药物中的应用。本专利技术应用大鼠作为实验动物，应用市售的积雪苷为样品进行实验。本专利技术通过下列具体实验研究积雪苷的抗心肌纤维化作用。本专利技术应用自发性高血压大鼠(SHR)作为实验动物模型，是按文献(Kuijpers MH和de Jong W在Spontaneous hypertension in the fawn-hoodedrata cardiovascular disease model.J Hypertens Suppl.1986 Oct；4(3)S41-4)方法进行的。该方法提出fawn-hooded rat能在5周龄即可出现自发性高血压，随着年龄增长而增高，在1岁龄时可达180-240mmHg，并伴随着心脏、肾脏、肝脏、脾脏等器官的重量增加，组织病理学可见心肌纤维化以及心肌梗死等改变。以后曾有很多学者把SHR应用于高血压导致心肌纤维化的研究中，包括下列文献(Barone FC，Campbell WG Jr，Nelson AH，Feuerstein GZCarvedilol prevents severe hypertensive cardiomyopathy and remodeling.JHypertens.1998 Jun；16(6)871-84，以及Huikeshoven M，Van Der Wal AC，Tukkie R，Beek JF.The old spontaneously hypertensive rat as a model fortransmyocardial laser revascularisation research.Lasers Med Sci.2003；18(1)12-8)。故自发行高血压大鼠是研究高血压导致心肌纤维化的一个很可靠的模型。本专利技术的积极进步效果在于积雪苷具有抗心肌纤维化作用，由于积雪苷单体可以从积雪草中直接提取，而且提取率较高，价格不贵，所以积雪苷的应用有很好的开发前景。具体实施例方式实施例1材料与方法1.动物及材料SHR大鼠，雄性，由上海高血压研究所提供；MRB-IIIA型电脑大鼠血压心率测定仪，由上海高血压研究所制造；Ang II测定试剂盒，由北京北方生物技术研究所提供2样品名称积雪苷 广西昌州天然产物开发有限公司或上海医药工业研究院制造，溶于蒸馏水中卡托普利 济南东风制药有限公司，溶于生理盐水3剂量 积雪苷6g/kg、18g/kg和54g/kg三个剂量实验方法50只12周龄雄性SHR大鼠随机分成5组，每组10只①大剂量积雪苷组，给予积雪苷54g/kg；②中剂量积雪苷组，给予积雪苷18g/kg；③小剂量积雪苷组，给予积雪苷6g/kg；④阳性药组，给予卡托普利35mg/kg；⑤SHR空白对照组，给予等体积的蒸馏水。各组均通过灌胃给药28天，实验结束，称量体重及测血压后处死。1.血压测量 在大鼠清醒状态下无创性测定尾动脉收缩压及心率，每周测定1次。2.左心室重量和体重的测定 动物称重(BW)，断头处死，取出心脏，先剪去周围大血管，吸干血液，称全心重(HW)，再剪去心房和右心室游离壁，称取左心室重量(LVM)，计算全心重、左心室重与体重比(HW/BW、LVM/BW)，以确定左心室肥厚的程度。3.心肌胶原形态学的观察及定量分析 在心肌冠状沟下约1mm处，取左心室心肌横切面；用Boum’s液固定，石蜡包埋，制片，切片厚约6μm；苦味酸天狼星红染色法使胶原特殊染色，心肌细胞呈黄色，胶原呈红色。采用光学显微镜测定，每个心肌切面内膜和外膜各取固定上下左右四个视野，用计算机图像分析，通过灰度调节区别胶原和非胶原成分，测量心肌切片的胶原容积分数(CVF＝心肌胶原面积/所测视野面积)。心肌小动脉为小动脉周围胶原和小动脉面积之比。4.测定血浆AngII的浓度 28天后，动物断头取血，测定血浆AngII水平。血浆Ang II浓度采用放免法(RIA)测定，按说明书操作，结果以pg/ml表示，测定范围为10pg/ml～2000pg/ml，批间变异系数为CVb＜15％，批内变异系数为CVw＜10％。结果1.积雪苷对SHR血压的影响 治疗4周后，卡托普利能明显降低SHR大鼠收缩压(SBP)(P＜0.05)，积雪苷对SHR大鼠收缩压无明显影响。2.积雪苷对SHR左心室肥厚的影响 各组大鼠在用药后的体重(BW)、全心重(HW)、左心室重量(LVM)、全心重/体重(HW/BW)、左心室重/体重(LVM/BW)见表1。与空白对照组比较，各用药组体重无明显改变(P＞0.05)；全心重(HW)、左心室重量(LVM)明显降低(P＜0.01)，大中小剂量组间呈现量效关系，说明积雪苷能在一定程度上抑制SHR左心室肥厚增加。表1 积雪苷治疗对SHR大鼠心肌肥厚参数的影响(x±s，n＝10) 与空白组比较，bP＜0.05，cP＜0.01；与大剂量组比较，eP＜0.05，fP＜0.013.积雪苷对SHR大鼠心肌纤维化的作用 各组大鼠在用药后的心内、外膜以及小动脉心肌胶原容积分数见表2。与空白对照组比较，各用药组心室内、外膜及心肌小动脉周围的胶原均有减少(P＜0.05)，大中小剂量组间呈现量效关系，表明积雪苷对SHR大鼠的心肌纤维均有显著的抑制作用。表2 积雪苷对SHR心内、外膜以及小动脉心肌胶原容积分数的影响(x±s，n＝10) 与空白组比较，bP＜0.05，cP＜0.01；与大剂量组比较，eP＜0.05，fP＜0.01结论根据以上实验表明积雪苷具有抗心肌纤维化的作用。而本实验利用积雪苷直接给予自发性高血压诱发心肌纤维化的大鼠模型实验，证明积雪苷确有抗心肌纤维化的效果。权利要求1.积雪苷在制备预防或治疗心肌纤维化的药物中的应用，其中该积雪苷具有下列化学结构式I 式I。全文摘要本专利技术公开了积雪苷在制备预防或治疗心肌纤维化的药物中的应用。本专利技术通过用积雪苷对自发性高血压大鼠(SHR)心肌纤维化的影响，证实了积雪苷具有抗心肌纤维化的作用。因而，积雪苷可作为活性成份用于制备抗心肌纤维化的药物。文档编号A61P9/00GK101032501SQ20061002440公开日2007年9月12日 申请日期2006年3月6日 优先权日2006年3月6日专利技术者贺兴东, 刘珉宇, 刘全海, 王小晨, 刘 英 申请人:上海医药工业研究院本文档来自技高网...

【技术保护点】
积雪苷在制备预防或治疗心肌纤维化的药物中的应用，其中该积雪苷具有下列化学结构式Ⅰ：　　　　＊＊＊　　式Ⅰ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：贺兴东，刘珉宇，刘全海，王小晨，刘英，
申请(专利权)人：上海医药工业研究院，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]