【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物合成
，特别是。
技术介绍
菁染料是指发色团共轭体系两端建立在N-N原子间的脒离子插烯物，具有较好 的平面刚性结构或大的平面共扼体系，荧光量子产率高，荧光波长长，能很好地与DNA 自身的淡蓝色荧光相区别，而且与DNA作用后荧光量子产率增强。因而，菁染料得到了 人们越来越多的重视。水溶性菁染料是性能优良的荧光标记染料，广泛用于抗体、核酸及其他生物分 子的标记和检测。菁染料目前也是基因芯片测试用的首选荧光标记物。但由于菁染料， 尤其是不对称菁染料的合成副反应多，副产物极性相近，产物的分离提纯非常困难。水 溶性菁染料分子极性大，分离提纯更加困难。文献报道这类化合物多采用HPLC法用 C-18 反相柱纯化(Bioconjugate Chem.，1993，4(2)，105-111)。吲哚类水溶性菁染料Cy3，Cy5，Cy7等是生物芯片、分子信标常用的荧光染 料，特别是Cy7由于最大吸收光谱一般位于(700-900)nm的近红外区域，可以避开生物 分子的自荧光背景干扰，近年来被广泛应用于DNA测序、生物大分子的定量测定、免疫 分析检测等领域。目前美国的Amershan Pharmacia Biotech公司已有商品化的Cy3、Cy5、 Cy7相关产品出售，但价格昂贵，售价达500美元/毫克。Cy3、Cy5的合成方法已有文 献报道(华东理工大学学报，2002，28(2)，212-215)。但Cy7至今尚无任何中外文献报 道其合成方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对上述技术分析，提供一种水溶性菁染料Cy7的制备及纯化 方法，该方法操作简单、成...
【技术保护点】
一种水溶性菁染料Ｃｙ７的制备及纯化方法，其特征在于步骤如下：１）将１－乙基－２，３，３－三甲基吲哚－５－磺酸盐与５－苯胺基戊二烯醛缩苯胺盐酸盐加入醋酸酐与醋酸混合溶液中，在氮气保护下进行反应，制得中间体１－乙基－２－（ζ－苯胺基甲基乙酮基）己烯基－３，３－二甲基吲哚－５－磺酸盐，不需要进一步提纯，可直接进行下一步反应；２）将１－（ε－羧戊基）－２，３，３－三甲川吲哚－５－磺酸盐加入到上述中间体１－乙基－２－（ζ－苯胺基甲基乙酮基）己烯基－３，３－二甲基吲哚－５－磺酸盐与醋酸酐、醋酸和醋酸钾的混合溶液中，在氮气保护下进行反应，制得水溶性菁染料Ｃｙ７初级产品；３）将上述Ｃｙ７初级产品采用制备薄层色谱法进行分离提纯，即以乙醇和醋酸的水溶液为展开剂，反复展开，刮下蓝色展开带，用甲醇淋洗硅胶，经抽率、浓缩，即可制得水溶性菁染料Ｃｙ７纯品。
【技术特征摘要】
1.一种水溶性菁染料Cy7的制备及纯化方法，其特征在于步骤如下1)将1-乙基-2，3，3-三甲基吲哚-5-磺酸盐与5-苯胺基戊二烯醛缩苯胺盐酸盐加 入醋酸酐与醋酸混合溶液中，在氮气保护下进行反应，制得中间体1-乙基_2-( ζ -苯胺 基甲基乙酮基)己烯基_3，3-二甲基吲哚-5-磺酸盐，不需要进一步提纯，可直接进行 下一步反应；2)将1-(ε_羧戊基)_2，3，3-三甲川吲哚-5-磺酸盐加入到上述中间体1-乙 基-2-( ζ-苯胺基甲基乙酮基)己烯基-3，3-二甲基吲哚-5-磺酸盐与醋酸酐、醋酸和 醋酸钾的混合溶液中，在氮气保护下进行反应，制得水溶性菁染料Cy7初级产品；3)将上述Cy7初级产品采用制备薄层色谱法进行分离提纯，即以乙醇和醋酸的水溶 液为展开剂，反复展开，刮下蓝色展开带，用甲醇淋洗硅胶，经抽率、浓缩，即可制得 ...
【专利技术属性】
技术研发人员：郗日沫，赵秀杰，王文虎，
申请(专利权)人：天津三箭生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：12
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