【技术实现步骤摘要】
一种用于检测pH值的荧光探针及其制备方法与专用检测 试剂盒
本专利技术涉及一种用于检测pH值的荧光探针及其制备方法与专用检测试剂盒，属 于化学分析、生物分析领域。
技术介绍
溶酶体（lysosomes)是真核细胞中的一种细胞器，pH值约为3. 8?5. 0,为单层 膜包被的囊状结构，直径约为〇. 025?0. 8微米，内含多种水解酶。溶酶体的基本功能是对 生物大分子等物质的消化与清除，并在维持细胞的正常代谢活动及防御微生物的侵染方面 扮演着重要的角色。因此，检测溶酶体pH值及其随环境因素的改变均具有重要的意义。目 前市场上具备标记溶酶体功能的探针有：美国探针公司的LysoTracker Red DND-99(Abs: 577nm ;Em :590nm), LysoTracker Deep Red(Abs :577nm ;Em :590nm)等；同时具备标记 溶酶体和比率测定溶酶体pH值功能的探针有：美国探针公司的LysoSensor? Yellow/ Blue DND-160 (PDMP0) (Abs ：329nm>384nm ；Em ：440nm>540nm), LysoSensor?Yellow/Blue dextran(Abs :335nm、381nm ;Em :452nm、521nm)等。这些探针存在诸如分析波长短，或不能 进行比率测定等弊端。而同时具备标记溶酶体和比率测定溶酶体pH值功能的近红外探针 尚未见报道。 半菁类染料具有良好的稳定性，被广泛应用于生物分析中；而基于半菁类染料衍 生的可选择性标记与...
【技术保护点】
式Ⅰ所示化合物，式Ⅰ中，X为碳原子数为1～6的烷基、磺酸基取代的碳原子数为1～6的烷基、磺酸钠基取代的碳原子数为1～6的烷基和磺酸钾基取代的碳原子数为1～6的烷基中的任一种；Y的结构式如式Ⅱ所示：
【技术特征摘要】
1. 式I所示化合物，式I中，X为碳原子数为1?6的烷基、磺酸基取代的碳原子数为1?6的烷基、磺酸 钠基取代的碳原子数为1?6的烷基和磺酸钾基取代的碳原子数为1?6的烷基中的任一 种； Y的结构式如式II所示：2. 根据权利要求1所述的化合物，其特征在于：其结构式如式III，3. 权利要求1或2所述化合物的制备方法，包括如下步骤： (1) 式IV所示二羟基苯甲醛和吗啉经还原反应，得到式V所示取代吗啉甲基苯基二 醇；1 惰性气氛下，在碱存在的条件下，式V所示取代吗啉甲基苯基二醇与式VI所示三碳 菁类染料经取代分解重排反应，即得式I所示化合物；式VI 式VI中，X为碳原子数为1?6的烷基、磺酸基取代的碳原子数为1?6的烷基、磺酸 钠基取代的碳原子数为1?6的烷基和磺酸钾基取代的碳原子数为1?6的烷基中的任一 种；式I中，X为碳原子数为1?6的烷基、磺酸基取代的碳原子数为1?6的烷基、磺酸 钠基取代的碳原子数为1?6的烷基和磺酸钾基取代的碳原子数为1?6的烷基中的任一 种； Y的结构式如式II所示：4. 根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：步骤（1)中，式IV所示二羟基苯甲醛 和所述吗啉的摩尔比为1?5 :1 ; 所述还原反应在还原剂作用下进行；所述还原剂与式IV所示二羟基苯甲醛的摩尔比为 1 ?5 :1 ; 所述还原剂为H2、LiAlH4和NaBH4中任一种； 所述还原反应的反应温度可为0?50°C ;反应时间可为10?200min ; 所述还原反应在有机溶剂中进行；所述有机溶剂为甲醇。5. 根据权利要求3或4所述的制备方法，其特征在于：步骤⑵中，所述碱与式V所示 取代吗啉甲基苯基二醇的摩尔比为0. 01?1 :1 ; 所述碱为有机碱和无机碱中的至少一种； 所述有机碱为三乙胺和吡啶中至少一种；所述无机碱为碳酸钾、氢氧化钠、碳酸钠和碳 酸氢钠中至少一种； 式VI所示三碳菁类染料与式V...
【专利技术属性】
技术研发人员：马会民，万琼琼，
申请(专利权)人：中国科学院化学研究所，
类型：发明
国别省市：北京;11
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