检测人K-ras基因外显子12、13突变的核苷酸序列、方法及试剂盒技术

技术编号:5129458 阅读:654 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及检测人K-ras基因外显子12、13突变的核苷酸序列、检测人K-ras基因外显子12、13突变的方法及试剂盒。所述的检测人K-ras基因外显子12、13突变的核苷酸序列,包含由SEQ ID NO:1至SEQ IDNO:10所示的任一核苷酸序列。其中,SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列两端标记有JUP荧光集团,SEQ ID NO:4~10所示的核苷酸序列两端标记有MAR荧光集团。本发明专利技术的试剂盒可用于指导对爱必妥等EGFR抗体药物临床用药。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及检测人K-ras基因外显子12、13突变的核苷酸序列、检测人K_ras基 因外显子12、13突变的方法及试剂盒。
技术介绍
靶向治疗是近年来肿瘤领域的新热点,同以往经典的化疗治疗效果比较,靶向 药物显著延长患者的无进展生存期(PFS)和整体生存期(OS),同时降低药物的不良反 应。美国FDA已经成功的将下列药物批准用于上述肿瘤的治疗,如Trastuzumab(赫 塞汀)治疗乳腺癌,Gefitinib(易瑞沙)和Erlotinib(特罗凯)治疗非小细胞肺癌, Cetuximab (爱必妥)治疗结直肠癌,Sunitinib (舒尼替尼)和Sorafenib (索拉非尼)治疗 肾细胞癌。由于在靶向治疗之前需要进行靶向诊断,所以如何准确地进行靶向诊断是决定 治疗有效与否的前提。大量临床研究资料证实,Kras基因突变状态与针对EGFR的药 物,如Cetuximab (爱必妥)和Panitumumab (帕尼单抗)等的疗效有关,应用抗EGFR的 药物治疗肿瘤有必要检测Kras基因的突变。Kras基因突变检测已被写入最新版的《NCCN结直肠癌临床实践指南》,新指 南传递给广大医生和本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测人K-ras基因外显子12、13突变的核苷酸序列,其特征在于,包含由SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:10所示的任一核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.一种检测人K-raS基因外显子12、13突变的核苷酸序列,其特征在于,包含由SEQ IDNO 1至SEQ ID NO 10所示的任一核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的检测人K-ras基因外显子12、13突变的核苷酸序列,其特 征在于,SEQ ID NO: 3所示的核苷酸序列两端标记有JUP荧光集团,SEQ ID NO 4 10所示的核苷酸序列两端标记有MAR荧光集团。3.根据权利要求1所述的检测人K-ras基因外显子12、13突变的核苷酸序列,其特 征在于,所述核苷酸序列包含SEQ ID NO: 1所示的上游引物、SEQ ID NO: 2所示的下 游引物、SEQ ID NO 3所示的野生型探和SEQ ID NO 4 SEQ ID NO 10所示的突 变型探针中的至少一个。4.根据权利要求1所述的检测人K-ras基因外显子12、13突变的核苷酸序列,其特 征在于,所述核苷酸序列包含SEQ ID NO: 1所示的上游引物、SEQ ID NO: 2所示的下 游引物、SEQ ID NO 3所示的野生型探针和SEQ ID NO 4 SEQ ID NO 10所示的 突变型探针。5.—种检测人K-ras基因外显子12、13突变的方法,其特征在于,包括以下步骤(1)提取核酸样本;(2)以步骤(1)提取的核酸为模板,用权利要求1至4任意一项所述的引物和探针序 列,多重荧光PCR扩增病原体的靶核酸序列;(3)采用荧光检测仪对扩增产物进行分析,并分析结果。6.根据权利要求5所述的检测人K-ras基因外显子12、13突变的方法,其特征在 于,所述的多重荧光PCR的反应体系为50 μ L反应体系中含有40 μ L反应体系中 含有2.5 μ L 10 X PCR reaction buffer (Mg2+free),3mmol/L Mg2+,0.125...

【专利技术属性】
技术研发人员:熊慧
申请(专利权)人:上海源奇生物医药科技有限公司
类型:发明
国别省市:31

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