与抗体和聚亚烷基二醇结合的脂质体制造技术

一种脂质体，它是在脂质末端的一部分被马来酰亚胺化的脂质体上通过硫醚基结合了含聚亚烷基二醇部分的化合物，并通过硫醚基进一步结合了抗体而得到的脂质体，相对于包含在脂质体中的１摩尔马来酰亚胺化脂质，所述化合物的结合量和所述抗体的结合量分别为１５－５０ｍｏｌ％和０．１－２ｍｏｌ％。该脂质体具有优良的血中滞留性和治疗效果。（*该技术在2020年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及脂质体。更具体地说，涉及与抗体和/或聚亚烷基二醇结合的、具有优良的血中滞留性和治疗效果的脂质体。
技术介绍
作为向特定部位输送大量药剂的手段，提出了将药剂封入脂质体，使抗体结合到脂质体表面的方法。特别是在癌的治疗领域，有许多关于其中封入了抗肿瘤药、与抗体结合的脂质体的有效性的报道(Konno等，Cancer Tes.，47，4471，1987；特开昭58-134032号公报)。进而，作为对脂质体存在的问题，即封入物的漏出、脂质体的凝集以及在网状内皮器官中的捕获等的改善方法，提出了向脂质体上结合聚亚烷基二醇的方法(特开平1-249717号公报、特开平2-149512号公报、Klibanovet，A.L.等，FEBS Lett.，268，235，1990)。在特开平4-346918号公报中，公开了与蛋白质结合的含有药剂的脂质体，其特征在于具有蛋白质和包含聚亚烷基二醇部分的化合物残基，所述蛋白质和化合物残基分别通过各自的硫羟基与内含药剂的脂质体表面的马来酰亚胺基结合。这种脂质体是使结合在抗体上的硫羟基和结合在含聚亚烷基二醇部分的化合物上的硫羟基与脂质体表面的马来酰亚胺基反应来制备的，它的特征在于如通过历来的脂质体所观察到的那样，在肝脏、脾脏等网状内皮系统中的非特异性摄入得到抑制，实现了选择性的化学疗法。在上述公报中，虽然对与脂质体结合的含聚亚烷基二醇部分的化合物的量没有具体说明，但是记载了使0.1mol％-20mol％的硫羟化抗体与1mol马来酰亚胺基(马来酰亚胺化脂质)反应，向残余的马来酰亚胺基中加入过量的含硫羟化聚亚烷基二醇部分的化合物，优选以等于或大于2当量的量加入，得到与抗体结合的聚亚烷基二醇改性脂质体(0016段)。此外，在实施例中所具体记载的脂质体的制备方法中，使100mg全脂质与5微摩尔含硫羟化聚乙二醇部分的化合物(换算后相当于全脂质的3.1mol％)反应，认为使大量过剩的含硫羟化聚乙二醇部分的化合物与脂质反应，可以得到理论量(残存在脂质体表面的马来酰亚胺基的量)的聚乙二醇改性脂质体。此外，在上述公报中，虽然对与脂质体结合的抗体的量也没有具体说明，但是说明了使0.1mol％-20mol％的硫羟化抗体(换算后相对于100mg全脂质为0.3-60mg)与1mol马来酰亚胺基(马来酰亚胺化脂质)反应，在实施例中所具体记载的脂质体的制备方法中，使5mg(换算后相当于马来酰亚胺化脂质的1.7mol％)抗体与100mg全脂质结合，在上述公报中，没有具体公开除此之后的结合量。
技术实现思路
本专利技术者们在特开平4-346918号公报记载的脂质体的基础上，为提供在具有更高血中滞留性的同时也具有卓越安全性的脂质体而进行了深入研究。结果令人惊讶地发现，在特开平4-346918号公报所记载的脂质体中，当将对脂质体进行改性的聚亚烷基二醇的量减至低于理论值(残存在脂质体表面的马来酰亚胺基的量)后，改性量低于理论值的脂质体也可以获得与历来已知的脂质体几乎同等的血中滞留性。而且，本专利技术者们在特开平4-346918号公报记载的脂质体的基础上，为提供能实现更好治疗效果的脂质体而进行了深入研究。结果令人惊讶地发现，在特开平4-346918号公报的实施例所记载的脂质体中，当将抗体的结合量减少后，能够达到远远高于上述公报的实施例所记载的脂质体的治疗效果。本专利技术在这些发现的基础上得以完成。也就是说，本专利技术提供将含聚亚烷基二醇部分的化合物通过硫醚基结合到脂质末端的一部分被马来酰亚胺化的脂质体上而得到的脂质体，相对于包含在脂质体中的1mol马来酰亚胺化脂质，所述化合物的结合量为15-50mol％；提供相对于1mol马来酰亚胺化脂质，所述化合物的结合量为15-30mol％的上述脂质体；提供所述脂质体为使马来酰亚胺化脂质的马来酰亚胺基与添加了硫羟基的含聚亚烷基二醇部分的化合物反应得到的脂质体的上述脂质体；提供所述化合物结合到脂质体表面的上述脂质体；提供所述聚亚烷基二醇为聚乙二醇的上述脂质体；提供所述化合物为具有2个聚乙二醇基团的化合物的上述脂质体；提供所述聚乙二醇的分子量为2,000-7,000道尔顿的上述脂质体；提供所述聚乙二醇的分子量为约5,000道尔顿的上述脂质体；提供脂质体的表面进一步结合了抗体的上述脂质体。而且，提供将抗体通过硫醚基结合到脂质末端的一部分被马来酰亚胺化的脂质体上而得到的脂质体，相对于包含在脂质体中的1mol马来酰亚胺化脂质，所述抗体的结合量为0.1-2mol％；提供相对于1mol马来酰亚胺化脂质，所述抗体的结合量为0.4-0.7mol％的上述脂质体；提供所述脂质体为使具有马来酰亚胺基的脂质体与来自抗体的含硫基团反应形成硫醚键而得到的脂质体的上述脂质体；提供所述抗体为GAH抗体的上述脂质体；提供所述抗体为抗体片段F(ab’)2的上述脂质体；提供脂质体的表面进一步结合了含聚亚烷基二醇部分的化合物的上述脂质体。而且，提供将含聚亚烷基二醇部分的化合物和抗体通过硫醚基结合到脂质末端的一部分被马来酰亚胺化的脂质体上在而得到的脂质体，相对于包含在脂质体中的1mol马来酰亚胺化脂质，所述化合物的结合量和所述抗体的结合量为15-30mol％和0.4-0.7mol％；提供所述脂质体为使马来酰亚胺化脂质的马来酰亚胺基与添加了硫羟基的含聚亚烷基二醇部分的化合物反应得到的脂质体的上述脂质体；提供所述化合物结合到脂质体表面的上述脂质体；提供所述聚亚烷基二醇为聚乙二醇的上述脂质体；提供所述化合物为具有2个聚乙二醇基团的化合物的上述脂质体；提供所述聚乙二醇的分子量为2,000-7,000道尔顿的上述脂质体；提供所述聚乙二醇的分子量为约5,000道尔顿的上述脂质体；提供所述脂质体为使具有马来酰亚胺基的脂质体与来自抗体的含硫基团反应形成硫醚键而得到的脂质体的上述脂质体；提供所述抗体为GAH抗体的上述脂质体；提供所述抗体的抗体片段为F(ab’)2的上述脂质体。此外，提供作为癌症治疗药的上述脂质体；癌症种类为胃癌或大肠癌的所述癌症治疗药；以及使用所述脂质体的癌症治疗方法。附图说明图1是结合在脂质体(封入了DXR，未结合抗体)上的聚乙二醇量与血浆中DXR浓度之间的关系图。横轴表示PEG量(相对于1molDPPC的mol％)。相对于全脂质的mol％和相对于1mol马来酰亚胺化DPPE的mol％的换算值分别为0.16和8.9(0.25)、0.32和17.8(0.5)、0.48和26.7(0.75)、0.64和35.6(1)以及0.81和45(1.25)(括号内表示相对于1mol DPPC的mol％)。图2是结合在脂质体(封入了DXR，结合了抗体)上的聚乙二醇量与血浆中DXR浓度之间的关系图。横轴表示PEG量(相对于100mg脂质的PEG量(mg))。相对于1mol DPPC的mol％、相对于全脂质的mol％和相对于1mol马来酰亚胺化DPPE的mol％的换算值分别为0.25、0.16和8(2.5)；0.50、0.31和17(5)；0.75、0.47和26(7.5)；以及1.0、0.62和34(10)(括号内表示相对于100mg脂质的PEG量(mg))。图3表示结合在脂质体(封入了DXR)上的抗体量与肿瘤抑制效果(％T/C)之间的关系图。图4本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种脂质体，所述脂质体是将含聚亚烷基二醇部分的化合物通过硫醚基结合到脂质末端的一部分被马来酰亚胺化的脂质体上而形成的，该化合物的结合量相对于脂质体中所含的１摩尔马来酰亚胺化脂质为１５－５０ｍｏｌ％。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：田川俊明，细川齐子，
申请(专利权)人：三菱化学株式会社，
类型：发明
国别省市：JP[日本]