脂质体输送以维生素E为基础的化合物制造技术

本发明专利技术提供一种治疗细胞增殖性疾病的方法，通过将包含在递送囊泡中的一种组合物递送给需要这种治疗的个体，该组合物含有以维生素Ｅ为基础的抗癌化合物，此抗癌化合物具有的结构式中Ｒ’是氢或羧酸；Ｒ↑［２］和Ｒ↑［３］是氢或Ｒ↑［４］；Ｒ↑［４］是甲基；Ｒ↑［５］是烷基。还提供含这些化合物的囊泡。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及药物学和癌症治疗领域。本专利技术更具体说涉及递送维生素E为基础的脂质体制品，作为治疗和防治癌症的有效方法。相关领域描述导致生存(存活)和导致死亡(凋亡)的调节控制很复杂，包括多种胞内信号传递途径和多种相互作用的基因产物的调控。癌细胞可能表现为促进细胞增殖的基因和其产物表达的增高，从而使癌细胞数量增加。除了导致-生命基的因表达增高外，癌细胞能下调控制-死亡信号的基因和其产物，从而导致威胁生命的癌细胞积聚和转移增加。不受调控的细胞增殖加以死亡诱导信号途径的抑制赋予了癌细胞生长和存活的优势。细胞数量是否增加不取决于负作用和正作用生长调节基因产物表达的平衡、及功能性细胞死亡信号途径的存在与否。负作用生长调节基因的作用是阻断(停滞)细胞于细胞周期中；而正作用生长调节基因则刺激细胞在细胞周期中前进。参与细胞凋亡的基因可以是前凋亡或抗凋亡基因，它们之间的动态平衡确定了细胞是活还是死亡。存在多种病理性细胞增殖情况，对此需要新的治疗策略和制剂来提供效益。这些病理情况可发生于几乎所有能够异常性增殖或对细胞死亡信号产生异常反应的细胞类型中。显示病理或异常性生长和死亡特征的细胞类型有成纤维细胞、血管内皮细胞和上皮细胞。因此，需要新的方法来治疗个体的所有或几乎所有器官和组织系统中的局部性或扩散性病理情况。大部分癌症随着时间的推移都经历过遗传性损伤和渐进变化并最终可能变为高度转移性而难以治疗，无论它们是男性特异的如前列腺或睾丸，或是女性特异如的乳房、卵巢或子宫颈，或它们是否影响男性和女性的相同器官如肝、皮肤或肺。手术去除局部癌证明仅在癌瘤没有扩散超原发病灶时有效。一旦癌扩散到其它组织和器官，手术方法必须加上其它更特异的根除疾病或恶性细胞的方法才有效。大部分治疗疾病或恶性细胞的常用补充方法如化疗或放疗的作用不止局限于肿瘤细胞，虽然它们对恶性细胞有更高比例的破坏作用，但常一定程度地影响到正常细胞。一些天然维生素E化合物和一些维生素E的衍生物已用作前细胞凋亡和DNA合成抑制剂，因而是强抗癌剂。维生素E在结构上包括苯并二氢吡喃醇头部和烷基侧链。维生素E有8个主要的天然形式alpha(α)、beta(β)、gamma(γ)和delta(δ)生育酚以及α、β、γ和δ生育三烯甘油酯(生育三烯甘油酯)。生育酚与生育三烯甘油酯的区别在于它们有饱和植基侧链而不是未饱和的异戊二烯基侧链。四种形式的生育酚和生育三烯甘油酯的区别在于苯并二氢吡喃醇头上甲基数量(α有3个，β和γ有2个，δ有1个)，如表1所示。表1生育酚和生育三烯甘油酯的一般结构 一些研究描述了RRR-α-琥珀酸生育酚(琥珀酸维生素E；VES)的强抗肿瘤活性，它是RRR-α-生育酚的可水解性酯衍生物。Prasad和Edwards-Prasad第一个描述了琥珀酸维生素E而不是维生素E其它形式具有诱导小鼠黑素瘤B-16细胞形态改变和抑制生长的能力，并提出琥珀酸维生素E可能是一种有用的肿瘤治疗剂(1)。另外的研究证明琥珀酸维生素E是多种各类上皮性癌细胞，包括乳房、前列腺、肺和结肠以及体外造血淋巴样白血病和淋巴瘤细胞生长年的强抑制剂(2-7)。最近的研究证明琥珀酸维生素E腹膜内(i.p.)给予时在动物异种移植和同种异体移植模型中具有抗肿瘤活性(8-11)，提示其可能的治疗潜能。腹膜内(i.p.)或口服(p.o.)给予琥珀酸维生素E已显示对小鼠致癌物质[苯并芘]-诱导的前胃癌发生有抑制作用，提示能作为一种抗致癌制剂(12)。研究证明琥珀酸维生素E可通过阻断DNA合成、诱导细胞分化和诱导细胞凋亡来浓度-和时间-依赖性抑制癌细胞生长(5、6、10、13-15，未发表数据)。抑制细胞增殖包括部分通过MAP激酶MEK1和ERK1介导的G0/G1细胞周期阻断，以及上调关键性细胞周期调节蛋白p21(waf1/cip1)(30)。诱导分化的特征是形态变化、β酪蛋白信使增加、乳脂表达、细胞角蛋白18蛋白升高和Her2/neu蛋白下调(13)。分化部分通过活化MEK1、ERK1/2和磷酸化c-Jun蛋白而介导(13、14)。RRR-α-琥珀酸生育酚能调节多种细胞凋亡信号，尤其值得注意的是它能将Fas/Fas配基不反应的肿瘤细胞转变成Fas/Fas配基反应性，和能将转化生长因子-β(TGF-α)不反应的肿瘤细胞转变成TGF-α反应性，使这两个途径恢复会聚于JNK/c-Jun，接着使Bax蛋白转位到线粒体，诱导线粒体渗透转换，然后细胞色素c释放到细胞质中，活化胱冬酶9和3，切割多(ADP-核糖)聚合酶(PARP)以及引起细胞凋亡(15、29、31)。琥珀酸维生素E值得注意的不仅是它能诱导对肿瘤细胞生长的抑制作用，而且是它对正常细胞和组织没有毒性(2-7、11)。使用不可水解的琥珀酸维生素E衍生物显示它是完整的化合物且其二种切割产物任一种(即RRR-α-生育酚或琥珀酸)均具有抗增殖作用(4)。因此，认为此种维生素E衍生物的抗增殖作用并非是由于其抗氧化剂性质而致。RRR-α-琥珀酸生育酚(VES)是RRR-α-生育酚的一种衍生物，其结构上酯键修饰苯并二氢吡喃头部的6位含琥珀酰部分而不是羟基部分。这种RRR-α-生育酚的酯键相连琥珀酸部分，是维生素E影响生物作用的最强形式，此生物作用包括触发细胞凋亡和抑制DNA合成。此种维生素E形式能诱导肿瘤细胞凋亡，而对正常细胞没有凋亡诱导作用。维生素E的琥珀酸形式可作为完整的有效抗癌剂；然而，细胞和组织中的酯酶能切割该琥珀酸部分，从而将RRR-α-生育酚的琥珀酸形式转变成游离的RRR-α-生育酚，使此化合物作为抗癌剂无效。RRR-α-生育酚显示在上皮或免疫来源的细胞中既不抗增殖也无前细胞凋亡活性。构建以RRR-α-生育酚或RRR-α-生育三烯甘油酯为基础的化合物，是经酯键在α-生育酚或α-生育三烯甘油酯的苯并二氢吡喃醇头部第一个环的C6位进行修饰，而提供具强抗癌性质的化合物。据报导在没有细胞酯酶的细胞中这种化合物在细胞培养中以及体内可保持完整。在美国专利6,417,223中，市场上购买的纯化形式RRR-α-生育酚可用作合成维生素E类似物的起始原料。对RRR-α-生育酚分子的以下三部分进行了修饰苯并二氢吡喃头部酚环的6位碳；苯并二氢吡喃头部，包括酚和杂环；或植基尾部。在RRR-α-生育酚中，酚环的6位碳具有抗氧化剂活性的关键性羟基(-OH)部分。根据在多种人类癌细胞而不是正常人细胞中诱导细胞凋亡的能力筛选类似物并对类似物作结构功能分析，表明以生育酚为基础的类似物从H-键供体到植基尾梢的总长度为29，尾梢本身长度17。具有完全甲基化的闭合酚环、饱和的闭合杂环和经醚键附着于酚环6位碳的不可水解性的乙酸部分，表现出最强的抗癌活性(附图说明图1)。通过口服、饮食、管饲、皮下、腹膜内、局部、静脉内、肌肉内、呼吸道等递送治疗剂的方法，对药物水平和组织分布有重要影响。美国专利号6,090,407证明抗癌药物紫衫醇和喜树碱可加入到脂质体中经喷雾递送给个体的呼吸道。通过脂质体吸入给予这些抗癌药物是一种比肌肉内注射或口服更快和更有效的递送方式。与通过肌肉内注射递送9-硝基喜树碱相比，采用脂质体气雾剂递送植物生物碱9-硝基喜树碱在免疫缺陷性裸鼠中是抑制人乳房癌(28)、结肠癌和肺癌异本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗细胞增殖性疾病的方法，其特征在于，所述方法包括将包含在递送囊泡中的组合物给予需要这种治疗的个体的步骤，所述组合物包括维生素Ｅ为基础的抗癌化合物，所述化合物具有以下结构式＊＊＊其中，Ｒ↑［１］是氢或羧酸；Ｒ↑［２］和Ｒ ↑［３］是氢或Ｒ↑［４］；Ｒ↑［４］是甲基；Ｒ↑［５］是烷基或烯烃基。

【技术特征摘要】
US 2001-12-19 60/342,156;US 2002-8-29 60/406,807;U1.一种治疗细胞增殖性疾病的方法，其特征在于，所述方法包括将包含在递送囊泡中的组合物给予需要这种治疗的个体的步骤，所述组合物包括维生素E为基础的抗癌化合物，所述化合物具有以下结构式 其中，R1是氢或羧酸；R2和R3是氢或R4；R4是甲基；R5是烷基或烯烃基。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括给予包含在递送囊泡中的含抗癌药物的组合物的步骤。3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述抗癌药物/递送囊泡组合物与所述以维生素E为基础的抗癌化合物/递送囊泡组合物组合或依次给药。4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述抗癌药物/递送囊泡组合物与所述维生素E为基础的抗癌化合物/递送囊泡组合物组合或依次给予，含所述维生素E为基础抗癌化合物的递送囊泡也包含所述抗癌药物。5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述抗癌药物是9-硝基喜树碱、顺氯氨铂、紫衫醇、doxirubicin或塞来昔布。6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述维生素E为基础的抗癌化合物是生育酚。7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生育酚选自β-生育酚、δ-生育酚和2，5，7，8-四甲基-(2R-(4R，8R，12-三甲基十三烷基)苯并二氢吡喃-6-基氧代)乙酸。8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述维生素E为基础的抗癌化合物是生育三烯甘油酯。9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述生育三烯甘油酯选自α-生育三烯甘油酯、β-生育三烯甘油酯、γ-生育三烯甘油酯、δ-生育三烯甘油酯和生育三烯甘油酯富集组分。10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述维生素E为基础的抗癌化合物是合成的维生素E化合物。11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述合成的维生素E化合物选自dl-α-生育酚、dl-α-乙酸生育酚、dl-α-烟酸生育酚和dl-α-磷酸生育酚。12.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述组合物是通过气雾剂雾化、气雾剂吸入器、管饲、口服摄取、口服软胶囊、透皮贴片、皮下注射、静脉内注射、肌肉内注射或腹膜内注射给予。13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，气雾剂雾化所述组合物是通过喷射喷雾器。14.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述递送囊泡是含脂类的脂质体。15.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述脂类是1，2-二月桂基-sn-甘油-3-磷酸胆碱。16.如权利要求14所述的方法，其特征在于，所述脂质体中所述以维生素E为基础的抗癌化合物的终浓度不大于20.0mg/ml。17.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述递送囊泡是纳米颗粒、微球体或niosome。18.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述维生素E为基础的抗癌化合物表现出抗增殖作用，上作用包括细胞凋亡、DNA合成停滞、细胞周期停滞或细胞分化。19.如权利要求18所述的方法，其特征在于，所述抗增殖作用通过检测生物标记和免疫组化试验，经定量分析、定性分析或二者的组合而确定...

【专利技术属性】
技术研发人员：BG杉德斯，K克莱恩，KA劳森，MS门查卡，JV耐特，CW韦伦，
申请(专利权)人：研究发展基金会，
类型：发明
国别省市：US[美国]