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一种高效对虾免疫调节剂制造技术

技术编号:4288132 阅读:283 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术充分利用巴菲蛤加工厂下脚料,通过正交实验确定明显影响因素,控制水解程度为34%-40%,平均多肽长度为3左右;通过超声波法优化提取得到活性江蓠菜硫酸酯多糖,并根据处方设计原理添加复合维生素和其他辅料,制成一种复合氨基酸作为饲料风味剂、活性寡肽和多糖复合免疫调节剂,引诱鱼虾进食,提高食欲和促进生长,提高鱼虾产量,同时提高鱼虾免疫能力,减少鱼(虾)病产生,节约成本,且能直接搅混添加于饲料中,方便投料。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术利用巴菲蛤加工厂下脚料水解降解得到活性寡肽,江蓠菜提取得到活性硫酸酯多 糖,复合制成免疫增强剂。属于水产养殖业营养添加剂产业。二. 研究背景及目的水产养殖事业的快速发展,创造了显著的社会效益和经济效益,与此同时,水环境曰趋 恶化的现实,亦为水产养殖中疾病控制带来了难题。水产养殖水域广阔,养殖动物水下患病 不易被发现,难以及时施治。因此,业内专家早已提出"防重于治"。如何提高水产动物免疫 抗病能力,是水产养殖业急需解决的问题。我国饲料添加剂工业发展潜力巨大,饲料添加剂资源的开发与应用对饲料产品质量、饲料饲养效果起着决定性作用。针对单一添加剂对基础料匹配的专业性不够高,复合型添加剂 巳经开始普及使用。免疫调节剂也属于添加剂范畴。免疫调节剂是一类非特异性地增强机体免疫功能的药物,且选择性不高,往往一种药物 具有多种功能,也可以属于伺料添加剂范围。1、活性肽现代营养学研究发现动物摄食蛋白质经消化道的酶作用后,大多是以低肽形式消化吸 收的,以游离氨基酸形式吸收的比例很小。进一步的试验又揭示了肽比游离氨基酸消化更快、 吸收更多,表明肽的生物效价和营养价值比游离氨基酸更高。这也正是活性肽的无穷魅力所 在。生物活性肽是蛋白质中20个天然氨基酸以不同组成和排列方式构成的从二肽到复杂的线 性、环形结构的不同肽类的总称,是源于蛋白质的多功能化合物。活性肽具有多种体内代谢和生理调节功能,易消化吸收,有促进免疫、激素调节、抗菌、 抗病毒、降血压、降血脂等作用,食用安全性极高,是当前国际食品界最热门的研究课题和 极具发展前景的功能因子。巴菲蛤浓縮液汁该浓縮液为广西某巴菲哈加工厂下脚料浓縮而成,它含有丰富蛋白质、复合氨基酸及活 性多肽等营养物质,能为对虾等水产动物提供丰富营养物质,主要包括最重要的必需氮基酸(赖氨酸、谷氨酸),其中谷氨酸、核苷酸和肽类物质可做为鲜味剂,而甘氨酸、L-精氨酸、 L一丙氨酸等复合氨基酸作为饲料风味剂,引诱对虾进食,提高食欲和促进生长,提高对虾产 量,同时提高对虾免疫能力,减少对虾病产生,节约成本。 2、免疫活性多糖多糖是一类重要的天然活性物质,具有广谱的非特异性免疫促进作用,能够明显增强机 体的细胞免疫和体液免疫功能。江篱(Gmcilaria)是大型底栖海藻,属红藻门(Rhodophyta).自古以"龙须菜"、"鹿角菜"、"凤 尾菜"等名称入药,古代药著描述该药生于东南海边石上,味甘性寒,有软坚化痰、清热利水 的功效。江蓠菜不仅是一种天然补碘饲料添加剂,而且含有多种氨基酸、维生素、矿物质、 还含有大量的非含氮具有生物活性的有机化合物(海藻多糖等)以及刺激动物生长的活性物 质。同时又是工业生成琼脂的原料。江蓠菜是红藻中一类巨型的经济藻,产量巨大,目前基本上都是作为饲料或食品使用, 没有深加工产品,附加值低。本专利技术利用的海洋藻类原料来源广泛,又兼为药食两用品种, 安全性好,生产工艺简便高效。其中硫琼脂长期以来被看作是提取琼胶糖的废弃物。随着对海藻硫酸多糖生物学功能的 深入研究,发现江蓠属硫酸酯多糖在体内外均具有抗凝血作用、抗病毒、抗肿瘤等生理活性。 多糖具有多方面的生物活性,诸如抗病毒、抗肿瘤与免疫调节等;而且对机体正常细胞没有 毒副作用,可能成为理想的药物来源。利用江蓠菜硫酸酯多糖的免疫调节功能,可应用于水 产养殖中,提高对虾免疫能力,减少对虾病产生,节约成本。本专利技术的主要目的是充分利用巴菲蛤浓縮液汁和江蓠菜硫酸酯多糖的活性成分复合制备 成一种具有促进对虾生长发育,减少对虾病产生的免疫增强剂。
技术实现思路
本专利技术技术要点充分利用巴菲蛤加工厂下脚料,通过酸水解,严格控制水解程度,保持水解程度为30-40%,降解成平均肽链长度为3左右的具有免疫调节作用的小肽;通过工艺 优化制备江蓠菜硫酸酯多糖。高效对虾免疫调节剂,按重量百分比由以下组分组成巴菲蛤水解氨基酸及活性寡肽 70-80%江蓠菜硫酸酯多糖 4-5% 复合维生素 3-4% 增氧剂 3-4% 褐藻酸钠 适量 防腐剂 适量具体步骤1、巴菲蛤水解氨基酸及活性寡肽制备(1) 工艺流程巴菲蛤浓縮膏一一盐酸水解一一赶酸一一碱中和一一透析除盐一一脱苦 ——浓缩成膏(2) 蛋白质水解度测定茚三酮比色法,水解度的计算公式为A NDH = _ x廳oTN式中DH为水解度;A N为酶解物中的氨基态氮含量;TN为样品的总氮量。(3) 氨基酸种类即含量测定氨基酸直接分析法(DIONEX ICS-2500离子色谱仪)表l.巴菲蛤下脚料浓縮汁干粉中氨基酸种类及含量氨基酸含量(ug/g)氨基酸含量(ug/g)精氨酸5.45组氨酸3.37赖氨酸5.66缬氨酸6.06丙氨酸7.61异亮氨酸6.40苏氨酸5.28亮氨酸17.71甘氨酸13.84蛋氨酸1.95谷氨酸29.04酪氨酸1.51天冬氨酸11,81苯基丙氨酸0.93(4)平均肽链长度-1/DH 通过研究酸度,水解时间,物料比,水解温度四个因素对酸水解混合蛋白质程度的影响, 确定因素因素水平表,通过1^34正交实验确定最佳水解工艺,控制水解程度为34%—40%, 平均多肽长度为3左右。2、 通过酸水超声波提取分离得到江蓠菜硫酸酯多糖。(1) 工艺流程江蓠菜一一乙醚/无水乙醇脱色脱脂一一酸水热提取一一离心分离一一 减压浓縮一一乙醇沉淀一一丙酮、乙醚、无水乙醇洗涤一一真空干燥一一粉碎成干粉(2) 多糖含量的测定(苯酚一硫酸法)(3) 硫酸基的Dodgson法定量测定称取江蓠菜,在功率500W超声波作用下分别以不同浓度的HC1、提取时间、物料比和提取 温度进行单因素试验。为了确定超声酸提的最佳工艺条件,根据单因素实验结果,设计U34 正交实验。3、 按照中国对虾对维生素的需求量添加各维生素在lkg混合膏中添加,LAPP (维生素C 多聚磷酸酯)4g,肌醇4g,胆碱4g, Va1万IU, Vd 5000IU, VE 350mg, VB5 40mg, VB3 100mg, VB11 10mg4、 加入其他辅料,直接研磨添加充分混合制成瓶装产品,低温保存。 实施案例一1、 巴菲蛤水解氨基酸及活性寡肽制备通过研究酸度2-6mol/L,水解时间l-5小时,物料比l: 5-8,水解温度50-90'C四个因素对 酸水解混合蛋白质程度的影响,确定因素因素水平表,通过1^934正交实验得出结论对水解 度影响顺序是时间>温度>酸度>物料比。其最佳工艺制备:水解酸度(盐酸)浓度为4-5mol/L, 时间为4-5小时,,温度为70-80。C,最终把水解度控制在30-40%,即平均肽链长度约等于3。按 照最佳工艺条件制备巴菲蛤氨基酸活性寡肽浓缩膏1000-1200克,水解、赶酸、碱中和、透析 除盐、活性炭脱苦,最后减压浓縮成与原料相当总量的灰黄色膏状物。2、 通过超声波酸法从江蓠菜提取硫酸酯多糖,由单因素试验,考察了酸浓度、时间、物 料比及温度对硫酸酯多糖提取率的影响,确定正交试验方案,得出最佳工艺条件为酸度(盐 酸)为0.01-0.02mol/L,超声波提取时间为20-25min,温度为60-7(TC,乙醇分级沉淀值得多糖 含量为20-21.70%,硫酸根含量为10-10.23%的江蓠菜硫酸酯多糖。按照最佳工艺条件,取500本文档来自技高网
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【技术保护点】
高效对虾免疫调节剂,按重量百分比由以下组分组成:    巴菲蛤水解氨基酸及活性寡肽 70-80%    江蓠菜硫酸酯多糖 4-6%    复合维生素 4-6%    增氧剂 3-5%    褐藻酸钠适量    防腐剂适量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:黄翔鹄李活宋文东董晓慧林海生纪丽丽王浩颜建斌马德运
申请(专利权)人:黄翔鹄
类型:发明
国别省市:44[中国|广东]

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