一种快速检测志贺菌的方法技术

本发明专利技术属于食源性致病菌的快速检测技术，具体说是一种检测志贺菌ＤＮＡ的环介导等温扩增（ｌｏｏｐ－ｍｅｄｉａｔｅｄ　ｉｓｏｔｈｅｒｍａｌ　ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ，ＬＡＭＰ）方法。包括由样品处理试剂、ＬＡＭＰ反应试剂、Ｂｓｔ　ＤＮＡ聚合酶的大片段、琼脂糖、溴酚蓝上样缓冲溶液、溴化乙锭溶液组成的试剂的配制，以及扩增产物的检测和沉淀产生的检测程序。其步骤是：首先设计特异性引物；其次是提取样品ＤＮＡ；第三是反应体系的配制。该法较之目前采用的传统细菌培养方法、免疫检测方法和其它分子生物学方法具有操作简单、快速、无需特殊仪器试剂且灵敏特异的优点。可应用于食品和其它样品中志贺菌的快速检测。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种检测志贺菌的环介导等温ＤＮＡ扩增检测方法，包括设计志贺菌ｉｐａＨ基因特异性引物，其特征在于，志贺菌引物序列为：　ｉｐａＨ－Ｆ３：５′－ＧＣＣＴＴＴＣＣＧＡＴＡＣＣＧＴＣＴＣＴ；　ｉｐａＨ－Ｂ３：５′－ＴＧＡＴＧＧＡＣＣＡＧＧ ＡＧＧＧＴＴ；　ｉｐａＨ－ＦＩＰ：５′－ＴＣＣＧＣＡＧＡＧＧＣＡＣＴＧＡＧＴＴＴＴＴＣＡＣＧＣＡＡＴＡＣＣＴＣＣＧＧＡＴＴＣ；　ｉｐａＨ－ＢＩＰ：５′－ＴＣＧＡＣＡＧＣＡＧＴＣＴＴＴＣＧＣＴＧＴＴＣＣＧＧＡＧＡＴＦＧＴＴＣＣＡＴ ＧＴＧＡ；　ｉｐａＨ－ＬＢ：５′－ＴＧＣＡＧＣＧＡＣＣＴＧＴＴＣＡＣＧ；　ｉｐａＨ－ＬＢ：５′－ＣＴＧＣＴＧＡＴＧＣＣＡＣＴＧＡＧＡＧＣ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈福生，朱胜梅，
申请(专利权)人：陈福生，朱胜梅，
类型：发明
国别省市：83[中国|武汉]