空肠大肠弯曲菌快速检测试剂盒的制备和检测方法技术

本发明专利技术涉及一种用环介导等温扩增技术的空肠大肠弯曲菌快速检测试剂盒的制备和检测方法。该试剂盒内有环介导等温扩增反应液、Ｂｓｔ　　ＤＮＡ聚合酶、显色剂；反应液含有反应缓冲液、ｄＮＴＰ、硫酸镁、上游内引物５－ＡＣＡＧＣＴＡＴＡＣＣＡＣＴＴＧＡＡＣＣＡＴＴＴＡＡＡＧＴＧＡＡＣＣＴＧＡ　　ＴＧＴＴＴＴＡＣＣＴ－３、下游内引物５－ＡＣＡＡＡＣＡＴＣＣＣＧＣＣＴＣＡＴＡＧＴＴＴＡＡＴ　　ＣＴＣＴＴＣＴＡＡＧＣＴＴＧＣＡＴＣＴ－３、上游外引物５－ＴＴＣＣＡＡＡＴＴＡＴＧ　　ＡＴＧＧＴＴＣＡＧＡ－３、下游外引物５－ＴＧＧＡＣＣＴＴＴＡＡＴＡＡＡＣＴＧＣＡＴＡＡ－３和甜菜碱；检测空肠大肠弯曲菌的方法包括细菌ＤＮＡ的提取、空肠大肠弯曲菌的环介导等温扩增、显色检测。其优点是快速、特异性强、灵敏度高而且成本低。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种空肠大肠弯曲菌快速检测试剂盒，其特征在于其中的试剂包括（１）－（４）：　　　　（１）环介导等温扩增反应液：　　　　包括１０×Ｔｈｅｒｍｏｐｏｌ反应缓冲液、３００－５００μｍｏｌ／Ｌ　ｄＮＴＰ、２－４ｍｍｏｌ／Ｌ硫酸镁、０．８－１．２μｍｏｌ上游内引物、０．８－１．２μｍｏｌ／Ｌ下游内引物、０．２－０．３μｍｏｌ／Ｌ上游外引物、０．２－０．３μｍｏｌ／Ｌ下游外引物和１－１．５ｍｏｌ／Ｌ甜菜碱；其中１０×Ｔｈｅｒｍｏｐｏｌ反应缓冲液含有２００ｍｍｏｌ／Ｌ　　ｐＨ８．８的三羟基甲基氨基甲烷－盐酸、１００ｍｍｏｌ／Ｌ氯化钾、１００ｍｍｏｌ／Ｌ硫酸铵、２０ｍｍｏｌ／Ｌ硫酸镁和１％曲拉通Ｘ－１００；　　　　其中上游内引物：　　　　５－ＡＣＡＧＣＴＡＴＡＣＣＡＣＴＴＧＡＡＣＣＡＴＴＴＡ－ＡＡＧＴＧＡＡＣＣＴＧＡＴＧＴＴＴＴＡＣＣＴ－３、　　　　下游内引物：　　　　５－ＡＣＡＡＡＣＡＴＣＣＣＧＣＣＴＣＡＴＡＧＴＴＴＡＡ－ＴＣＴＣＴＴＣＴＡＡＧＣＴＴＧＣＡＴＣＴ－３、　　　　上游外引物：５－ＴＴＣＣＡＡＡＴＴＡＴＧＡＴＧＧＴＴＣＡＧＡ－３、　　　　下游外引物：５－ＴＧＧＡＣＣＴＴＴＡＡＴＡＡＡＣＴＧＣＡＴＡＡ－３；　　　　（２）ＵＮＧ酶：１Ｕ／μＬ；　　　　（３）Ｂｓｔ　　ＤＮＡ聚合酶：８Ｕ／μＬ；　　　　（４）显色剂：为１０％的荧光染料ＳＹＢＲ　　ＧＲＥＥＮ　　Ｉ或者ＤＮＡＧｒｅｅｎ。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：高宏伟，昃向君，陈颖，雷质文，林超，
申请(专利权)人：山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心，
类型：发明
国别省市：95[中国|青岛]