一种由蓝色上转换纳米材料间接产生发光方法，它包括：发蓝光的红外上转换荧光材料与长波紫外荧光材料；上述材料表面分别被修饰处理；取红外上转换荧光材料１份（重量比），取长波紫外荧光材料０．０１－１０份（重量比），按上述比例均匀混合；使用红外９８０ｎｍ激光激发红外上转换荧光材料，可产生４４０－４８０ｎｍ的蓝色发光，该蓝色发光作为二次激发光源，间接激发长波紫外荧光材料发光，产生４９０－６５０ｎｍ的可见光。本技术可以用于微生物领域的定性定量多重检测。
A process for indirectly producing luminescent materials from blue converted nanomaterials
A blue up conversion nano material indirect light-emitting method, which comprises: a blue light-emitting infrared up conversion fluorescent materials and UV fluorescent materials; the surface materials were modified; the infrared up conversion fluorescent materials 1 (weight ratio), long wave ultraviolet fluorescent material 0.0110 continuous (weight ratio) and evenly mixed according to the proportion; the use of infrared 980nm laser excited infrared upconversion fluorescent materials, can produce 440480nm blue light, the blue emitting two times as excitation source, indirect excitation of long wave ultraviolet fluorescent material to produce light, visible light 490650nm. This technique can be used for qualitative, quantitative and multiplex detection in the microbial field.
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物反应检测与监测
技术介绍
上转换荧光材料作为标记物在生物领域中己得到一定程度的应用，其独特的上转换发光 特性使得生物检测技术具有稳定性好、灵敏度高、操作简便快速、可定性定量等优点。但这 种传统的直接激发发射模式，使得检测过程必需依赖固相材料等手段实现未与检测物结合的 游离标记物的彻底分离，否则任何残留的游离标记物均会成为假阳性信号的来源。此外，更 是无法实现通过对混合体系中标记物信号强度的检测实现微观生物反应进行程度的监测。专 利200410034105. 5， 200410034104. 0， 200420049580. 5对生物领域中上转换荧光材料应用方 法已有充分的介绍。现有蓝色上转换荧光材料制备多是颗粒较的大的体材料或微晶体陶瓷玻璃态材料体系， 其发光效率较高，但无法用于生物技术。已有纳米材料合成技术，为提发光高效率添加较多 的助熔剂，这类方法制备的材料杂质含量高，如专利01138927.3， 01138920.6， 200410017067.2， 200510123022.8已经有充分的揭示。本专利技术的一种蓝色上转换纳米材料间接发光方法，是制备一种蓝色上转换纳米荧光材 料，由近红外激光激发产生蓝色发光，该蓝色发光可以在特定距离内间接激发第二种长波紫 外荧光材料发光。利用这种间接传递模式，在待检样品的溶液中加入蓝色上转换纳米荧光材 料标记的生物活性分子A (抗体、抗原、表达蛋白等)与长波紫外荧光材料标记的生物活性 分子B (抗体、抗原、表达蛋白等)，当A与B分别与待检样品中的目标被检物结合后，由于 A-目标被检物-B的生物结合使得上转换纳米荧光材料与长波紫外荧光材料之间的距离在特定 值内，此时以近红外光激发通过能量间接传递模式产生的可见光便可指示这种特异生物反应 的发生。由此，在实际应用中无需后续的任何分离操作，只需将待检样品与两种标记物混合 即可实现简便快捷的定性定量检测。同时，在反应过程中可随时对可见光进行检测，以监测 生物反应进行的速度与程度。满足应用研究与基础研究的不同需求。
技术实现思路
，它包括发蓝光的红外上转换荧光材料与长波紫外荧光材料；上述材料表面分别被修饰处理；取红外上转换荧光材料1份(重量' 比)，取长波紫外荧光材料0.01-10份(重量比)，按上述比例均匀混合；使用红外980nm激 光激发红外上转换荧光材料，可产生440-480nm的蓝色发光，该蓝色发光作为二次激发光源， 间接激发长波紫外荧光材料发光，产生490-650nm的可见光。红外上转换荧光材料与长波紫 外荧光材料混合比例大小取决于长波紫外荧光材料的发光效率与种类。由于长波紫外荧光材 料是被蓝光所激发发光，所以要求其在颗粒较小时，有较高的发光效率。发蓝光的红外上转换荧光材料制备方法为，含有Y、 Gd、 La的氟化物材料中的一种或一 种以上混合物，加入45-50%重量比的YbF3，同时加入12-25y。重量比TmF3，均匀混合后，在氩 气中于300-450度烧结1-6小时，制备出有蓝色发光的红外上转换荧光颗粒材料，其在9S0nm 激光激发，可产生440-480rai蓝色发光，颗粒度在70-800nm。制备过程中氩气可以有效阻止 材料被氧化，改善发光效率与控制色纯度；低温度可以抑制颗粒的生长。长波紫外荧光材料，应是在440-480咖可以吸收能量，且发射光谱为490-650咖，并为 稳定单色发光微颗粒材料。红外上转换荧光材料与长波紫外荧光材料表面分别可以使用溶胶-凝胶法修饰处理，处理 后其表面适合连接不同的生物活性物质，可用于生物检测。红外上转换荧光材料与长波紫外荧光材料，可不根互混合，并分别单独制备成生物试剂 检测层，层状组合成试剂盒后应用。具体实施例方式发蓝光的红外上转换荧光材料制备方法为含有Y、 Gd、 La的氟化物材料中的一种或一 种以上混合物，加入45-50%重量比的YbF3，同时加入12-25%重量比TmF3，在氩气中于300-450 度烧结1-6小时，制备出蓝色发光的红外上转换荧光微颗粒材料，其由980nm激光激发，可 发出440-480nm蓝色发光，颗粒在70-800nm。当烧结温度低于350度，时间低于2小时，可 以制备出直径平均在100nm以下的颗粒，其发光强度较弱；当烧结温度大于400度，时间大 于4小时，材料成为块状，经粉碎后可以制备出直径平均在700 nm以上的颗粒，其发光强度 较强；烧结过程应在氩气保护气氛中进行，其制备的材料发射光谱才可以达到小于470nm， 在空气中烧结的材料发射光谱在470nm以上。红外上转换荧光材料发射光谱在470mi以下，并在有较高的发光效率时，可以大幅度提 高间接转换激发长波紫外荧材料的发光效率。由长波段紫外线激发的荧光材料我们通称长波紫外荧材料，可以是有机或无机荧光材料， 并且为稳定单色发光，不可以被红外980nm激发发光。其吸收光谱在440-480nm时，可以有效产生发光，发射光谱为490-650nm，这样一来可以有效避免上转换荧光材料与紫外荧光 材料在蓝色发光区域的重叠，适合自动检测仪器的光谱识别与分析，也适合视觉直接观察判 定。如异硫ffl酸荧光素、四甲基异硫氰酸罗丹明、藻红蛋白，无机YAG荧光材料等。长波紫外荧光材料合成与使用技术较为成熟，其颗粒度选择与控制幅度较大，当颗粒较 小时其与红外荧光材料混合比例应减小。如有机长波紫外荧光材料其发光效率高，并可以达 到分子独立发光。有机长波紫外荧光材料在生物工程领域中已经广泛应用。发蓝光的红外上转换荧光材料与长波紫外荧光材料，可以分别使用溶胶-凝胶法将其表面 处理，使用正硅酸乙酯，经水解后可以形成Si02包敷膜。处理修饰后的发光颗粒分散有大幅 度提高，同时易于混合、易与有机生物活性分子连接。取红外上转换荧光材料l份(重量比)，取长波紫外荧光材料0.01-IO份(重量比)，按 上述比例均匀混合；使用红外980nm激光激发红外上转换荧光材料，其可发出440-480nm蓝 色发光，该蓝色发光可以形成二次激发光源，间接激发长波紫外荧光材料，产生490-650nm 的可见光。红外上转换荧光材料与长波紫外激发的荧光材料，可不相互混合，并分别单独制备成生 物检测试剂层，层状组合试剂盒后应用。本专利技术优点在于现场检测简便快捷红外上转换荧光材料与长波紫外荧光材料之间特殊的间接发光模式， 使得任何以二者作为标记物的检测技术在实际操作中只需将两种标记物与待检样品混合即 可，无需任何复杂的分离操作，简化了现场检测的操作流程，并縮短的检测时间。基础研究深入透彻红外上转换荧光材料与长波紫外荧光材料之间特殊的间接发光模式， 使得可见光信号的产生直接表征了微观生物反应的进行程度与速度，因而适用于对基础研究 中蛋白-蛋白、蛋白-核酸、核酸-核酸等相互作用的系统分析。实施例l制备发蓝光的红外上转换荧光材料取YF3 90克，GdF3 10克，加入YbF3 45克，TmF3 13克，氩气中于450度烧结5小时，制备出的红外上转换荧光材料在980rai激光激发，可发 出480nra蓝色发光，颗粒在700nm。将材料放10%浓度正硅酸乙酯水溶液中浸泡3小时，取出 烘干。取出以上红外上转换荧光材料1克。长波紫外荧光材料为异硫氰本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种由蓝色上转换纳米材料间接产生发光方法，它包括：发蓝光的红外上转换荧光材料与长波紫外荧光材料；上述材料表面分别被修饰处理；取红外上转换荧光材料１份（重量比），取长波紫外荧光材料０．０１－１０份（重量比），按上述比例均匀混合；使用红外９８０ｎｍ激光激发红外上转换荧光材料，可产生４４０－４８０ｎｍ的蓝色发光，该蓝色发光作为二次激发光源，间接激发长波紫外荧光材料发光，产生４９０－６５０ｎｍ的可见光。
【技术特征摘要】
1.一种由蓝色上转换纳米材料间接产生发光方法，它包括发蓝光的红外上转换荧光材料与长波紫外荧光材料；上述材料表面分别被修饰处理；取红外上转换荧光材料1份(重量比)，取长波紫外荧光材料0.01-10份(重量比)，按上述比例均匀混合；使用红外980nm激光激发红外上转换荧光材料，可产生440-480nm的蓝色发光，该蓝色发光作为二次激发光源，间接激发长波紫外荧光材料发光，产生490-650nm的可见光。2. 如权利要求l所述，发蓝光的红外上转换荧光材料制备方法为含有Y、 Gd、 La的氟化物 材料中的一种或一种以上混合物，加入45-50%重量比的YbF3，同时加入12-25%重量比的 T...
【专利技术属性】
技术研发人员：郑岩，边静宇，耿树范，杨瑞馥，周蕾，黄惠杰，张友宝，黄立华，
申请(专利权)人：上海科炎光电技术有限公司，
类型：发明
国别省市：31[]
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