【技术实现步骤摘要】
本申请涉及生物，尤其涉及一种含牛链球菌和牛球虫的双靶点重组抗原及其重组抗体。
技术介绍
1、牛链球菌和牛球虫分属细菌和原虫，两者均寄生于牛的消化道中，在牦牛中的感染率呈现上升趋势，且均能在受感染动物的粪便中检出病原体，两种病原在易感动物间的流行不仅对畜牧业造成损失，还对牧区居民和牧区工作人员的健康造成了严重威胁，同时将会带来较大的经济损失，目前有效控制球虫病和牛链球菌的感染严重依赖于管理措施以及抗球虫和抗菌药物，但是药物的长期使用也使耐药性成为球虫病治疗和牛链球菌感染治疗的潜在威胁，而妥善的管理需要耗费较大的人力物力；疫苗是通过其自身的抗原性诱导机体产生相应的特异性抗体对具有相同抗原性的外来病原体相互作用发生抗菌或者是杀菌作用。重组抗原疫苗在畜牧业中可应用于畜禽疫病的预防和控制，且这些重组疫苗能够提供免疫保护，减少畜禽中相应疾病的发生和传播，从而降低养殖业的损失。
2、igy抗体是一种特殊类型的抗体，它是由鸟类(特别是鸡)产生的免疫球蛋白y(igy)；相比于哺乳动物产生的igg抗体，igy抗体产量丰富，鸟类能够产生大量的igy抗体，因此可以通过鸡蛋收集大量的抗体；特异性高，igy抗体可以高度特异地识别和结合抗原，这使其在生物医学研究和诊断中具有很高的准确性；相对于其他动物(如小鼠、兔子)产生的抗体，igy抗体的制备成本相对较低，这使其在大规模应用中具备优势，此外该抗体具有较小的交叉反应。但是目前重组疫苗大多数只针对某一种特定的病原体，或者针对某一病原体的多种亚型，很少同时针对两种或者两种以上病原体，同时目前也没有针对
3、因此设计牛链球菌和牛球虫双基因融合蛋白的重组疫苗及其特异性抗体有利于从细菌和原虫两个方面减少易感动物所受到的威胁，进而减少易感动物受到的威胁，在利于牧业发展的同时也保障了人类的健康。
技术实现思路
1、本申请提供了一种含牛链球菌和牛球虫的双靶点重组抗原及其重组抗体，以解决现有技术中目前重组疫苗暂时没有针对牛球虫病和牛链球菌病的疫苗和治疗性抗体的技术问题。
2、第一方面，本申请提供了一种含牛链球菌和牛球虫的双靶点重组抗原，所述双靶点重组抗原包括牛球虫的顶膜抗原1或免疫定位蛋白1，以及牛链球菌的杆状决定蛋白，所述顶膜抗原1与所述杆状决定蛋白之间串联，或，所述免疫定位蛋白1与所述杆状决定蛋白之间串联。
3、可选的，所述双靶点重组抗原还包括霍乱毒素b亚基，所述霍乱毒素b亚基设于所述顶膜抗原1的n端或c端，或，
4、所述霍乱毒素b亚基设于所述免疫定位蛋白1的n端或c端，或，
5、所述霍乱毒素b亚基设于所述杆状决定蛋白的n端或c端。
6、可选的，所述霍乱毒素b亚基具有如seq id no.1所示的核苷酸序列。
7、可选的，所述双靶点重组抗原还包括接头序列，所述接头序列包括柔性接头序列和双赖氨酸，所述柔性接头序列设于所述双靶点重组抗原的长表位肽之间，所述双赖氨酸设于所述双靶点重组抗原的短肽链之间。
8、可选的，所述双靶点重组抗原按照5’～3’的顺序包括霍乱毒素b亚基、顶膜抗原1和杆状决定蛋白。
9、可选的，所述双靶点重组抗原具有如seq id no.2所示的核苷酸序列。
10、可选的，所述双靶点重组抗原具有如seq id no.3所示的氨基酸序列。
11、第二方面，本申请提供了一种含牛链球菌和牛球虫的双靶点重组抗体，所述重组抗体由第一方面所述的双靶点重组抗原制备得到。
12、第三方面，本申请提供了一种制备第二方面所述的双靶点重组抗体的方法，所述方法包括：
13、设计第一方面所述的双靶点重组抗原的目的基因序列；
14、合成所述目的基因序列，并采用设计的引物组对所述目的基因序列进行pcr扩增，后导入表达载体的可表达区域，得到含目的基因的表达载体；
15、向感受态细胞中导入所述目的基因的表达载体，以使所述基因序列转化并表达，得到重组抗原；
16、采用所述重组抗原免疫鸟类动物模型，得到双靶点重组抗体。
17、可选的，所述引物组的上游引物如seq id no.4所示，所述引物组的下游引物如seq id no.5所示。
18、本申请实施例提供的上述技术方案与现有技术相比具有如下优点：
19、本申请实施例提供的一种含牛链球菌和牛球虫的双靶点重组抗原，通过引入牛球虫的顶膜抗原1或免疫定位蛋白1，再引入牛链球菌的杆状决定蛋白，并使得二者串联在一起，因此可以得到包含牛球虫和牛链球菌双靶点的重组融合蛋白抗原，并可以利用该重组融合蛋白抗原得到对应的igy抗体，进而有利于对易感动物提供细菌和寄生虫两个方面的免疫保护，相比现有的依赖于管理措施、抗球虫药和抗菌药的控制感染措施，该重组融合蛋白抗原可以避免只能采用单一病原体的疫苗和抗体来预防和治疗这两类病原体感染的情况，因此更具有实用性。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一种含牛链球菌和牛球虫的双靶点重组抗原，其特征在于，所述双靶点重组抗原包括牛球虫的顶膜抗原1或免疫定位蛋白1，以及牛链球菌的杆状决定蛋白，所述顶膜抗原1与所述杆状决定蛋白之间串联，或，所述免疫定位蛋白1与所述杆状决定蛋白之间串联。
2.根据权利要求1所述的双靶点重组抗原，其特征在于，所述双靶点重组抗原还包括霍乱毒素B亚基，所述霍乱毒素B亚基设于所述顶膜抗原1的N端或C端，或，
3.根据权利要求2所述的双靶点重组抗原，其特征在于，所述霍乱毒素B亚基具有如SEQID NO.1所示的核苷酸序列。
4.根据权利要求2所述的双靶点重组抗原，其特征在于，所述双靶点重组抗原还包括接头序列，所述接头序列包括柔性接头序列和双赖氨酸，所述柔性接头序列设于所述双靶点重组抗原的长表位肽之间，所述双赖氨酸设于所述双靶点重组抗原的短肽链之间。
5.根据权利要求4所述的双靶点重组抗原，其特征在于，所述双靶点重组抗原按照5’～3’的顺序包括霍乱毒素B亚基、顶膜抗原1和杆状决定蛋白。
6.根据权利要求5所述的双靶点重组抗原，其特征在于，所述双靶点重组
7.根据权利要求6所述的双靶点重组抗原，其特征在于，所述双靶点重组抗原具有如SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。
8.一种含牛链球菌和牛球虫的双靶点重组抗体，其特征在于，所述重组抗体由如权利要求1-7任一项所述的双靶点重组抗原制备得到。
9.一种制备如权利要求8所述的双靶点重组抗体的方法，其特征在于，所述方法包括：
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述引物组的上游引物如SEQ ID NO.4所示，所述引物组的下游引物如SEQ ID NO.5所示。
...【技术特征摘要】
1.一种含牛链球菌和牛球虫的双靶点重组抗原，其特征在于，所述双靶点重组抗原包括牛球虫的顶膜抗原1或免疫定位蛋白1，以及牛链球菌的杆状决定蛋白，所述顶膜抗原1与所述杆状决定蛋白之间串联，或，所述免疫定位蛋白1与所述杆状决定蛋白之间串联。
2.根据权利要求1所述的双靶点重组抗原，其特征在于，所述双靶点重组抗原还包括霍乱毒素b亚基，所述霍乱毒素b亚基设于所述顶膜抗原1的n端或c端，或，
3.根据权利要求2所述的双靶点重组抗原，其特征在于，所述霍乱毒素b亚基具有如seqid no.1所示的核苷酸序列。
4.根据权利要求2所述的双靶点重组抗原，其特征在于，所述双靶点重组抗原还包括接头序列，所述接头序列包括柔性接头序列和双赖氨酸，所述柔性接头序列设于所述双靶点重组抗原的长表位肽之间，所述双赖氨酸设于所述双靶点重组抗原的短肽链之间。
5...
【专利技术属性】
技术研发人员：符立发，唐智慧，梁鸽，刘人捷，王保宁，索朗斯珠，黄家艳，拜占春，李子轩，贡嘎，曹随忠，罗润波，李杨，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。