【技术实现步骤摘要】
本申请属于生物医药领域，具体涉及一种制备无水加帽生物组织材料的方法。
技术介绍
1、心包/瓣膜蛋白组织上的羧基与经戊二醛保存和固定后残留的醛基是造成生物瓣钙化的主要原因。对心包/瓣膜上的醛基和羧基进行封闭，减少钙化位点，是降低生物瓣钙化的有效途径。此外，为避免心包/瓣膜长期保存与戊二醛中，简化手术期间组装流程，提高手术效率，降低附加风险，对生物瓣膜进行脱水处理，形成干态瓣膜，可较好解决上述问题。
2、单独采用醇类混合溶剂的脱水方式是现有干态生物材料制备方法之一，但该方法容易造成生物组织材料的卷曲，改变形态并影响相关物理性能。此外，采用水含量梯度降低的含醇水溶液进行脱水的方法，由于脱水剂中始终含有一定比例水分，因此生物组织材料组织内最终会残留相当含量的水分，也难以实现真正意义上的干态。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的上述问题，本申请提供一种制备无水加帽生物组织材料的方法。
2、具体来说，本申请涉及如下方面：
3、1.一种制备无水加帽生物组织材料的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
4、将生物组织表面的羧基进行活化；
5、将羧基活化后的生物组织与乙醇胺反应，得到加帽生物组织；
6、清洗加帽生物组织；
7、将加帽生物组织依次放入水含量梯度降低的包含多元醇和短链脂肪醇的脱水剂中脱水。
8、2.根据项1所述的方法，其特征在于，将生物组织表面的羧基进行活化包括：
9、将生物组
10、3.根据项2所述的方法，其特征在于，所述羧基活化缓冲液选自2-(n-吗啉)乙磺酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、碳酸盐-碳酸氢盐缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液、硼酸盐缓冲液中的一种，优选为2-(n-吗啉)乙磺酸缓冲液。.
11、4.根据项2所述的方法，其特征在于，所述羧基活化缓冲液中缓冲剂的浓度为10-100mm，ph值为5.0-6.0，edc·hcl浓度为30-200mm，nhs或sulfo-nhs的浓度为3-20mm。
12、5.根据项1所述的方法，其特征在于，反应时乙醇胺的浓度为20-60mm。
13、6.根据项1所述的方法，其特征在于，反应在4-30℃下，30-160rpm下振荡15-120min。
14、7.根据项1所述的方法，其特征在于，在脱水过程中，脱水剂中水的体积含量由50-80％梯度降低至0。
15、8.根据项1所述的方法，其特征在于，脱水剂由多元醇、短链脂肪醇和水组成，或由多元醇和短链脂肪醇组成。
16、9.根据项1所述的方法，其特征在于，在脱水过程中，脱水剂中短链脂肪醇的含量保持不变。
17、10.根据项9所述的方法，其特征在于，脱水剂中短链脂肪醇的体积含量为10％-40％，优选20％。
18、11.根据项1所述的方法，其特征在于，在脱水过程中，脱水剂中多元醇的体积含量从10％递增至80％。
19、12.根据项1所述的方法，其特征在于，每次脱水过程中，脱水剂中水的体积含量梯度降低5％-20％。
20、13.根据项1所述的方法，其特征在于，多元醇选自聚醚二醇、甘油、丁二醇、丁三醇、己三醇、三乙二醇、戊二醇中的一种或两种以上，优选甘油。
21、14.根据项1所述的方法，其特征在于，短链脂肪醇选自甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇中的一种或两种以上，优选乙醇。
22、15.根据项1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：
23、在将加帽生物组织依次放入水含量梯度降低的包含多元醇和短链脂肪醇的脱水剂中脱水去除生物组织上的脱水剂后，将加帽生物组织真空干燥，得到无水加帽生物组织材料。
24、16.根据项1所述的方法，其特征在于，生物组织选自心包、皮肤、血管、腹膜、韧带、腱中的一种。
25、本申请的制备无水加帽生物组织材料的方法，将羧基、醛基活性位点封闭处理，在大大减少钙化位点的同时，避免采用戊二醛的保存，避免了戊二醛残留，进一步降低钙化风险并简化手术流程。
26、同时，本申请的方法在生物组织材料脱水过程中，生物组织的形态始终能较好保持，不会发生显著卷曲和变形等现象。脱水完毕后，生物组织内水含量极低。本申请的方法在生物组织材料的脱水过程中，短链脂肪醇的含量保持在适当的范围内，有助于保持生物组织形态稳定同时最大程度脱水。另外，本申请的方法在生物组织材料的脱水过程中，短链脂肪醇的含量始终保持不变，有利于简化脱水剂的配制。
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1.一种制备无水加帽生物组织材料的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将生物组织表面的羧基进行活化包括：
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述羧基活化缓冲液选自2-(N-吗啉)乙磺酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、碳酸盐-碳酸氢盐缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液、硼酸盐缓冲液中的一种，优选为2-(N-吗啉)乙磺酸缓冲液。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述羧基活化缓冲液中缓冲剂的浓度为10-100mM，pH值为5.0-6.0，EDC·HCl浓度为30-200mM，NHS或sulfo-NHS的浓度为3-20mM。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应时乙醇胺的浓度为20-60mM。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应在4-30℃下，30-160RPM下振荡15-120min。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在脱水过程中，脱水剂中水的体积含量由50-80％梯度降低至0。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在脱水过程中，脱水剂中短链脂肪醇的含量保持不变。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，脱水剂中短链脂肪醇的体积含量为10％-40％，优选20％。
11.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在脱水过程中，脱水剂中多元醇的体积含量从10％递增至80％。
12.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，每次脱水过程中，脱水剂中水的体积含量梯度降低5％-20％。
13.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，多元醇选自聚醚二醇、甘油、丁二醇、丁三醇、己三醇、三乙二醇、戊二醇中的一种或两种以上，优选甘油。
14.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，短链脂肪醇选自甲醇、乙醇、异丙醇、正丙醇中的一种或两种以上，优选乙醇。
15.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：
16.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，生物组织选自心包、皮肤、血管、腹膜、韧带、腱中的一种。
...【技术特征摘要】
1.一种制备无水加帽生物组织材料的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将生物组织表面的羧基进行活化包括：
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述羧基活化缓冲液选自2-(n-吗啉)乙磺酸缓冲液、磷酸盐缓冲液、碳酸盐-碳酸氢盐缓冲液、4-羟乙基哌嗪乙磺酸缓冲液、硼酸盐缓冲液中的一种，优选为2-(n-吗啉)乙磺酸缓冲液。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述羧基活化缓冲液中缓冲剂的浓度为10-100mm，ph值为5.0-6.0，edc·hcl浓度为30-200mm，nhs或sulfo-nhs的浓度为3-20mm。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应时乙醇胺的浓度为20-60mm。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，反应在4-30℃下，30-160rpm下振荡15-120min。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在脱水过程中，脱水剂中水的体积含量由50-80％梯度降低至0。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：吴尧，陈茂，冯沅，康珂，左一聪，詹航敏，杨夏燕，虞奇峰，
申请(专利权)人：四川大学，
类型：发明
国别省市：
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