本发明专利技术涉及天然药物领域，具体公开了一种中华补血草多糖的提取方法。其特征是用下列方法制得：将中华补血草全根干燥，粉碎，用蒸馏水提取１～３次，合并提取液，浓缩、乙醇沉淀、取沉淀物冷冻干燥，即得，其中提取温度为９０℃～１００℃，水浴提取之前超声，超声时间为４０ｍｉｎ～６０ｍｉｎ。本发明专利技术在常规多糖提取的工艺上进行优化，提取得到的中华补血草多糖的提取率达到１２．８０％。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及天然药物领域，具体公开了一种中华补血草多糖的优化提取工艺。
技术介绍
中华补血草(Limonium sinense (Girard)Kuntze)，又名匙叶草、盐云草、海菠菜、 海赤芍等，为补血草属(Limonium Mill.)多年生泌盐草本植物，喜生于沿海盐渍化的低 洼湿地上，分布于东北、华北、西北及西藏和沿海各省区，在江苏主要分布在苏北连云港、 灌云、射阳、东台、如东、南通等沿海地区的滩涂及盐碱湿地上(陈兴龙，安树青，李国旗， 等.中国海岸带耐盐经济植物资源.南京林业大学学报，1999，23 (4) :81-84;郭巧生，苏筱 娟.江苏省沿海滩涂野生药用植物生物多样性及其保护.中国野生植物资源，1999，18 (3)； 28-30)。除具有较高观赏价值和环境保护等作用外，民间流传使用其治疗一些疾病。已有研究发现，该植物化学成分十分丰富，含有氨基酸、无机元素、维生素、黄酮 类、鞣质、多糖、生物碱、有机酸等多种成分(Lin LC, Chou CJ. Flavonoids and phenolics fromLimonium sinense. Planta Med. 2000, ,66(4) :382_3 ；郭洪祝，袁久荣，中华补血草 化学成分的研究.中草药，1994，(8) ；398-400))。该植物具有补血、止血、抗菌消炎、散 瘀、调经、益脾、健胃等多种药理功效，临床上主要用于治疗功能性子宫出血症。目前学者 们对其药理作用的研究主要集中在抗菌、抗病毒、补血止血方面(Lin LC, Kuo YC, Chou CJ.Anti-herpes simplex virustype-lflavonoids and a new flavanone from the root of Limonium sinense. Planta Med. 2000,66(4) :333_336 ；甘露，赵玉英·补血草属 类化合物研究概况.西北药学杂志.1997，12(3). 135-140) 0我们前期的研究发现，中 华补血草根提取物具有显著抗肿瘤及对抗正常细胞损伤的活性(汤新慧，高静，徐力致， 等·中华补血草用于制备抗肿瘤药物的用途(ZL200610086169.9)，国家专利技术专利，2008 ； Xinhui Tang,Jing Gao,Jin Chen,et al. Expression of VDAC regulated by extractsof Limonium sinense Ktze root against CCl4_induced liver damage. International Journal ofMolecular Sciences. 2007,8 ；204-213 ；Xinhui Tang, Jing Gao, Jin Chen, et al. Mitochondrial modulationis involved in the hepatoprotection of Limonium sinense extract against liver damage in mice. Journal of Ethnopharmacology. 2008, 120(3) ；427-431)。多糖是由十个到上万个单糖基以糖苷键结合而成的天然大分子物质，由于其分子式为(CH2O)n，所以又称其为“碳水化合物”。它属于非细胞毒物质，作为药物应用的最大优 点是毒副作用较少，且来源广泛，因此，活性多糖可以作为理想而有效的生化药物和功能食 品(陈惠黎主编.糖复合物的结构与功能.上海医科大学出版社，1997:336.)。多糖具有 许多功效，抗肿瘤及提高机体免疫功能是其中一个主要作用(赵国华，李志孝，陈宗道.山 药多糖RDPS-I的结构分析及抗肿瘤活性.药学学报，2003，38(1) :37_41 ；胡国强，杨保华， 张忠泉.山药多糖对大鼠血糖及胰岛释放的影响.山东中医杂志，2004，23(4) :230-231)。
技术实现思路
本专利技术公开了一种中华补血草多糖的制备方法，本专利技术在常规多糖提取的工艺上 进行优化，提取得到的中华补血草多糖的提取率达到12. 80%。本专利技术的提取方法包括将中华补血草全根干燥，粉碎，用蒸馏水提取1 3次，合 并提取液，浓缩、乙醇沉淀、取沉淀物冷冻干燥，即得，其中提取温度为90°C 100°C，水浴 提取之前超声，超声时间为40min 60min。上述提取方法中中华补血草和蒸馏水的料液比选1 8 1 15。中华补血草和 蒸馏水的更优选重量体积比为1 12。上述提取方法中提取温度优选为95 °C。 提取时超声时间优选50min。用蒸馏水提取次数优选2次。 上述提取方法中，沉淀用乙醇的重量百分比浓度优选95 %。本专利技术制得的中华补血草多糖(简称LSEP)的提取率达到12.80%。体外抗氧 化效果较好，80 μ g/ml LSEP 清除 DPPH 达到 97%,600μ g/ml LSEP 清除 ABTS 达到 97%、 1000 μ g/mlLSEP 清除 OH.达到 70%。下面结合实施例对本专利技术作进一步的阐述。附图说明图1是提取次数对中华补血草多糖得率的影响图2是提取温度对中华补血草多糖得率的影响图3是超声时间对中华补血草多糖得率的影响图4是提取时间对中华补血草多糖得率的影响图5是料液比对中华补血草多糖得率的影响图6是响应面中超声时间和提取温度的响应面7是响应面中超声时间和提取温度的等高线8是响应面中料液比和提取温度的响应面9是响应面中料液比和提取温度的等高线10是响应面中料液比和超声时间的响应面11是响应面中料液比和超声时间的等高线图具体实施例方式实施例1将中华补血草全根干燥，粉碎，用蒸馏水提取，合并提取液，浓缩、乙醇沉淀、取沉 淀物冷冻干燥，即得中华补血草多糖。1、提取的单因素影响实验影响多糖提取率的因素很多，本实验选定温度、时间、料液比、提取次数、超声波5 个影响因素研究其对多糖提取率的影响。选取试验提取温度601，701，801，901和100°C五个水平；提取时间选取1，2， 3，4和5h五个水平；料液比选取1 8，1 10，1 12，1 14，1 16五个水平；提取次数选取1，2，3，4次四个水平；超声时间选取20min，40min, 60min, 80min ；分别进行单因素试验。1. 1提取次数的影响图1为温度100°C、料液比1 12、提取时间2h、超声20min时不同提取次数对多糖得率的影响。 由图1可知，提取次数在3次内，多糖得率增加明显，3次以后增加缓慢。因此提取 次数2 3次为宜。1. 2温度的影响图2为料液比1 12、提取时间2h、超声20min时、提取2次时不同温度对多糖得率的影响。由图2可知，随着提取温度的升高，多糖得率不断增大，在70°C前增加较为显著， 以后增加不太明显，温度在70，80的得率曲线较为平缓，同时从提取的多糖溶液可以看出， 随着温度的升高，多糖颜色加深。由此可得出，高温可能对多糖的结构与活性有一定的影 响，超过100°C多糖容易分解产生单糖而溶解在浓乙醇中进而影响多糖的提取率，所以选择 90°C 10本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种中华补血草多糖的提取方法，包括：将中华补血草全根干燥，粉碎，用蒸馏水提取１～３次，合并提取液，浓缩、乙醇沉淀、取沉淀物冷冻干燥，即得，其特征是：提取温度为９０℃～１００℃，水浴提取之前超声，超声时间为４０ｍｉｎ～６０ｍｉｎ。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：汤新慧，高静，严丽芳，于延球，杨小兰，
申请(专利权)人：盐城师范学院，江苏大学，
类型：发明
国别省市：32[中国|江苏]
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