【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及抗体，具体为一种抗犬pd-1抗体及其用途。
技术介绍
1、肿瘤是人类和动物的一种常见病、多发病，其中犬恶性肿瘤已经成为导致犬死亡的主要原因。相关研究数据显示，每4只犬中就有一只被诊断为肿瘤，10岁以上犬患肿瘤的比例更是高达50%以上。目前犬肿瘤的临床治疗手段主要包括手术、化学治疗和放射性治疗。常见的化疗药物包括环磷酰胺、多柔比星、长春新碱和泼尼松龙等，这些均存在肿瘤特异性差和毒副作用大等缺点。免疫治疗是一种新兴的治疗手段，对化疗反应不佳的患者使用免疫治疗可能有效且副作用小，免疫治疗的研究和应用已在人类肿瘤中取得了重大突破，而将免疫治疗推广至动物肿瘤具有重要意义。
2、程序性细胞死亡受体1（pd-1），是一个大小约55 kda的ⅰ型跨膜糖蛋白，属于cd28超家族受体，主要在t细胞、b淋巴细胞和活化的巨噬细胞表面表达。pd-1蛋白有两个配体：pd-l1和pd-l2。在正常生理条件下，pd-1与pd-l1/pd-l2的结合会抑制t细胞的活化，进而保护机体免受自身免疫系统的攻击；但是，多种实体瘤以及一些血液瘤，包括黑色素瘤、乳腺癌、各种消化系统肿瘤、淋巴瘤、白血病等癌细胞也大量表达pd-l1。肿瘤细胞膜上的pd-l1与t细胞上的pd-1结合，抑制t细胞的活化，从而成功逃避机体免疫系统的识别和攻击，实现肿瘤细胞的免疫逃逸。同时研究发现，肿瘤细胞上pd-l1的表达与多个肿瘤类型的不良预后相关。因此，阻断pd-1和pd-l1结合是一种肿瘤免疫治疗的思路。
技术实现思路
2、为实现上述专利技术目的，本专利技术采用的技术方案为：
3、本专利技术的第一个方面，是提供了一种能够与犬pd-1结合的抗体或其抗原结合片段的cdr序列。
4、所述一种能够与犬pd-1结合的抗体或其抗原结合片段包含重链可变区的cdr1、2、3和/或轻链可变区的cdr1、2、3。
5、根据本专利技术的实施例，所述一种能够与犬pd-1结合的抗体或其抗原结合片段包含选自下列至少之一的cdr序列或与其具有至少85%同一性的氨基酸序列：重链可变区的cdr序列选自seq id no:2-4、8-11、14所示，轻链可变区的cdr序列选自seq id no:5-7、12-13、15所示。
6、值得注意的是，上述记载中，其保护范围为可变区限定的上述序列范围内所有可能得到的cdr序列：上述重链和轻链可变区的cdr1-3，可以为现有技术中不同编码体系所得到的，包括但不限于kabat、chothia、imgt、north、abm、contact等编码体系，采用其他已知或未知的编码系统确定的cdr也在本申请的保护范围内。此外，在不同数据库（例如不同的商业、非商业、科研等用于预测cdr位置的数据库，包括但不限于abysis数据库、imgt数据库、tabs数据库、智慧芽bio数据库等），采用的包括但不限于kabat、chothia、imgt、north、abm、contact等编码体系，其预测得到的的cdr序列也在本申请的保护范围内。因不同的数据库对于同一抗体可变区序列使用同一编码体系进行预测得到的cdr如有一定差异，也在本专利技术的保护范围内。
7、进一步的，所述一种能够与犬pd-1结合的抗体或其抗原结合片段包含重链可变区和/或轻链可变区，序列为：seq id no:16所示的重链可变区、seq id no:17所示的轻链可变区；
8、或，seq id no:18所示的重链可变区、seq id no:21所示的轻链可变区；
9、或，seq id no:18所示的重链可变区、seq id no:22所示的轻链可变区；
10、或，seq id no:18所示的重链可变区、seq id no:23所示的轻链可变区；
11、或，seq id no:19所示的重链可变区、seq id no:21所示的轻链可变区；
12、或，seq id no:19所示的重链可变区、seq id no:22所示的轻链可变区；
13、或，seq id no:19所示的重链可变区、seq id no:23所示的轻链可变区；
14、或，seq id no:20所示的重链可变区、seq id no:21所示的轻链可变区；
15、或，seq id no:20所示的重链可变区、seq id no:22所示的轻链可变区；
16、或，seq id no:20所示的重链可变区、seq id no:23所示的轻链可变区；
17、或与以上具有至少85%同一性的氨基酸序列。
18、进一步的，本专利技术提出了一种能够与犬pd-1结合的抗体或其抗原结合片段。根据本专利技术的实施例，所述一种能够与犬pd-1结合的抗体或其抗原结合片段包含：选自下列至少之一的cdr序列或与其具有至少85%同一性的氨基酸序列：重链可变区的cdr序列选自seqid no:2-4、8-11、14所示，轻链可变区的cdr序列选自seq id no:5-7、12-13、15所示，或与其具有至少85%同一性的氨基酸序列。
19、进一步的，所述一种能够与犬pd-1结合的抗体或其抗原结合片段包含选自下列至少之一的cdr序列或与其具有至少85%同一性的氨基酸序列：
20、选自如seq id no:2、8、14任一项所示的重链可变区cdr1，选自如seq id no:3、9、10任一项所示的重链可变区cdr2，选自如seq id no:4、11、任一项所示的重链可变区cdr3；选自seq id no:5、12任一项所示的轻链可变区cdr1，选自seq id no:6、13、15任一项所示的轻链可变区cdr2，选自seq id no:7所示的轻链可变区cdr3，或与其具有至少85%同一性的氨基酸序列。
21、根据本专利技术的实施例，所述一种能够与犬pd-1结合的抗体或其抗原结合片段包括重链可变区cdr以及能够达到85%以上同一性的氨基酸序列：分别如seq id no:2、3和4的氨基酸序列所示的重链可变区cdr1、cdr2、cdr3序列（上述序列依据kabat编码体系获得）；分别如seq id no: 8、9和4的氨基酸序列所示的重链可变区cdr1、cdr2、cdr3序列（上述序列依据chothia编码体系获得）；分别如seq id no: 14、10和11的氨基酸序列所示的重链可变区cdr1、cdr2、cdr3序列（上述序列依据imgt编码体系获得）。
22、根据本专利技术的实施例，所述一种能够与犬pd-1结合的抗体或其抗原结合片段包括轻链可变区cdr以及能够达到85%以上同一性的氨基酸序列：分别如seq id no: 5、6和7的氨基酸序列所示的轻链可变区cdr1、cdr2、cdr3序列（上述序列依据本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种抗PD-1抗体或抗原结合片段，其特征在于，能够与犬PD-1结合，所述抗体或抗原结合片段包含重链可变区的CDR1、2、3，和/或轻链可变区的CDR1、2、3；所述重链可变区选自SEQ ID NO:16、18-20所示，所述轻链可变区选自SEQ ID NO:17、21-23所示。
2.根据权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段包含重链可变区和/或轻链可变区：SEQ ID NO:16所示的重链可变区、SEQ ID NO:17所示的轻链可变区；
3.根据权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段包含选自下列至少之一的CDR序列或与其具有至少85%同一性的氨基酸序列：重链可变区的CDR序列选自SEQ ID NO:2-4、8-11、14所示，轻链可变区的CDR序列选自SEQ ID NO:5-7、12-13、15所示。
4.根据权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段的重链恒定区为犬IgG B突变体，氨基酸序列如SEQ ID NO:24所示；所述抗体或抗原结合片
5.根据权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段包括重链全长和/或轻链全长，所述抗体或抗原结合片段使用的重链全长序列选自SEQ IDNO:26、28-30任一项所示，所述抗体或抗原结合片段使用的轻链全长选自SEQ ID NO:27、31-33任一项所示；
6.一种核酸分子，其特征在于，所述核酸分子编码权利要求1~5任一项所述的抗体或其抗原结合片段，所述核酸分子为DNA或RNA。
7.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体的核苷酸序列包含权利要求6所述的核酸分子。
8.一种重组细胞，其特征在于，所述重组细胞是通过将权利要求7所述的表达载体引入至宿主细胞中而获得的。
9.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含权利要求1~5任一项所述的抗体或抗原结合片段，或权利要求6所述的核酸分子，或权利要求7所述的表达载体，或权利要求8所述的重组细胞。
10.权利要求1~5任一项所述的抗体或抗原结合片段，或权利要求6所述的核酸分子，或权利要求7所述的表达载体，或权利要求8所述的重组细胞，或权利要求9所述的药物组合物，在预防和/或治疗哺乳动物肿瘤中的用途；或用于制备预防和/或治疗哺乳动物肿瘤药物中的用途；或用于检测PD-1蛋白中的用途。
...【技术特征摘要】
1.一种抗pd-1抗体或抗原结合片段，其特征在于，能够与犬pd-1结合，所述抗体或抗原结合片段包含重链可变区的cdr1、2、3，和/或轻链可变区的cdr1、2、3；所述重链可变区选自seq id no:16、18-20所示，所述轻链可变区选自seq id no:17、21-23所示。
2.根据权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段包含重链可变区和/或轻链可变区：seq id no:16所示的重链可变区、seq id no:17所示的轻链可变区；
3.根据权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段包含选自下列至少之一的cdr序列或与其具有至少85%同一性的氨基酸序列：重链可变区的cdr序列选自seq id no:2-4、8-11、14所示，轻链可变区的cdr序列选自seq id no:5-7、12-13、15所示。
4.根据权利要求1所述的抗体或抗原结合片段，其特征在于，所述抗体或抗原结合片段的重链恒定区为犬igg b突变体，氨基酸序列如seq id no:24所示；所述抗体或抗原结合片段的轻链恒定区为犬kappa链结构域恒定区，氨基酸序列如seq id no:25所示。
5.根据权利要求1...
【专利技术属性】
技术研发人员：罗昊澍，谭泽民，杨友桥，段军叶，吴冰春，
申请(专利权)人：北京伟杰信生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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