【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，尤其涉及一种rh-bfgf的稳定溶液。
技术介绍
1、随着蛋白分离技术的发展，高纯度蛋白药物明显减少了各种已知或未知的副作用或毒性影响。然而，在基因工程蛋白药物发展过程中，如何处理好药物的不稳定性是其中最难也是最具挑战性的一个内容。一般而言，蛋白质不稳定性包括两个方面:化学不稳定性和物理不稳定性。化学不稳定性主要是指蛋白质一级结构上氨基酸残基发生修饰或者变化，主要有以下几种反应:氧化作用、还原作用、脱酰胺反应、水解作用、精氨酸转化、β-消除和消旋作用。而物理不稳定性主要涉及到蛋白质的二级、三级、四级结构的变化，从而使蛋白质分子的空间构象发生改变。这些变化都能够由外界各种因素引起。例如：温度、ph、离子强度、振荡、变性试剂等等。不管是化学还是物理上的不稳定性都将会导致蛋白药物活性的降低或丧失，而这些发生变化的蛋白药物一般都禁止在人体上应用。因此为增强蛋白质结构的稳定性，延长其使用期限，科学家们做了许多研究来了解和优化蛋白药物的稳定性，研究发现可以通过改变蛋白质本身的结构特性(内部)或者所处溶剂的性质(外部)来提高蛋白质的稳定。
2、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor bfgf)是一种多功能的多肽生长因子，也是fgf家族的原型成员之一.从组织中提取的bfgf存在着细微的不均一性，相对分子质量为17000～20000，rh-bfgf是单链蛋白，相对分子质量为17×103，有两个功能区，即肝素结合区和受体结合区，它除促进中胚层源和神经外胚层源的大部分细
3、bfgf受溶液环境影响的因素较多，包括缓冲液类型、ph值、盐的种类及浓度等，在溶液状态下稳定性差，较易发生聚合，从而影响其纯度及生物活性，这使得其在溶液状态下的贮存有一定的困难，而现有的关于bfgf稳定性体系的研究并不多见，且有关bfgf在溶液体系中，2-8℃条件下的稳定性并未见报道。文献报道，在纯化过程中多以磷酸盐缓冲体系为主，对于其在磷酸盐缓冲体系中的稳定性并未见详细报道。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种长期稳定性优异的rh-bfgf的稳定溶液体系。
2、为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种rh-bfgf的稳定溶液，所述rh-bfgf的稳定溶液包括以下组分：rh-bfgf、氯化钠、表面活性剂、糖类物质和tris-hcl缓冲液；
3、所述表面活性剂为吐温类表面活性剂，所述糖类物质包括蔗糖和/或海藻糖；
4、所述rh-bfgf的稳定溶液的ph值为6-9。
5、本专利技术提供的一种rh-bfgf的稳定溶液通过选择特定的组分以及适宜的ph值，组分之间具有良好的相容性，从而能够实现rh-bfgf的长期稳定性，从外观来看，长时间放置不会出现分层、浑浊等现象，rh-bfgf的纯度也无明显改变，且从生物学活性角度来看，长时间放置后rh-bfgf的活性不会明显下降。
6、作为本专利技术所述rh-bfgf的稳定溶液的优选实施方式，所述rh-bfgf的稳定溶液包括以下浓度的组分：rh-bfgf 0.1-2g/l、氯化钠0.05-2mol/l、表面活性剂0.1-1.0g/l、糖类物质10-100g/l、tris-hcl 0.1-50mmol/l。
7、作为本专利技术所述rh-bfgf的稳定溶液的优选实施方式，所述rh-bfgf的稳定溶液包括以下浓度的组分：rh-bfgf 0.5-1.5g/l、氯化钠0.1-0.5mol/l、表面活性剂0.3-0.8g/l、糖类物质20-50g/l、tris-hcl 10-30mmol/l。
8、作为本专利技术所述rh-bfgf的稳定溶液的优选实施方式，所述rh-bfgf的稳定溶液包括以下浓度的组分：rh-bfgf 0.5-1.5g/l、氯化钠0.1-0.5mol/l、表面活性剂0.4-0.6g/l、糖类物质30-40g/l、tris-hcl 15-25mmol/l。
9、本专利技术研究发现，rh-bfgf的稳定溶液中组分的浓度会对rh-bfgf的稳定性带来影响，当进一步选择组分的浓度在上述范围内时，尤其在进一步优选的范围内时，得到的rh-bfgf的稳定性更优，即在相同的时间内rh-bfgf的生物活性降低越少，且纯度下降幅度也越小。
10、作为本专利技术所述rh-bfgf的稳定溶液的优选实施方式，所述rh-bfgf的稳定溶液的ph值为6.5-8.5。
11、作为本专利技术所述rh-bfgf的稳定溶液的优选实施方式，所述rh-bfgf的稳定溶液的ph值为7-8。
12、本专利技术研究发现，rh-bfgf的稳定溶液的ph值也会对rh-bfgf的稳定性带来影响，当进一步选择ph值为6.5-8.5，尤其是7-8时，得到的rh-bfgf的稳定溶液体系整体稳定性更优异，相同时间内rh-bfgf的活性和纯度衰减更慢。
13、作为本专利技术所述rh-bfgf的稳定溶液的优选实施方式，所述表面活性剂为吐温-20或吐温-80。
14、本专利技术研究发现，选择表面活性剂为吐温类表面活性剂，尤其是吐温-20或吐温-80时，才能够更好的实现rh-bfgf的稳定。
15、在本专利技术的第二方面，本专利技术提出了一种所述rh-bfgf的稳定溶液的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：称取氯化钠、tris-hcl、表面活性剂和糖类物质加水溶解，溶解后调节ph值，接着加入rh-bfgf溶解，得rh-bfgf的稳定溶液。
16、本专利技术提供的制备方法操作简单，能够有利于实际应用。制备完成后置于2-8℃条件下放置保存。
17、作为本专利技术所述制备方法的优选实施方式，所述调节ph值为采用盐酸或氢氧化钠进行调节。
18、在本专利技术的第三方面，本专利技术提供了一种rh-bfgf的洗脱液，所述洗脱液包括以下浓度的组分：氯化钠0.05-2mol/l、表面活性剂0.1-1.0g/l、糖类物质10-100g/l、tris-hcl0.1-50mmol/本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种rh-bFGF的稳定溶液，其特征在于，所述rh-bFGF的稳定溶液包括以下组分：rh-bFGF、氯化钠、表面活性剂、糖类物质和Tris-HCl缓冲液；
2.根据权利要求1所述的rh-bFGF的稳定溶液，其特征在于，所述rh-bFGF的稳定溶液包括以下浓度的组分：rh-bFGF 0.1-2g/L、氯化钠0.05-2mol/L、表面活性剂0.1-1.0g/L、糖类物质10-100g/L、Tris-HCl 0.1-50mmol/L。
3.根据权利要求2所述的rh-bFGF的稳定溶液，其特征在于，所述rh-bFGF的稳定溶液包括以下浓度的组分：rh-bFGF 0.5-1.5g/L、氯化钠0.1-0.5mol/L、表面活性剂0.3-0.8g/L、糖类物质20-50g/L、Tris-HCl 10-30mmol/L。
4.根据权利要求2所述的rh-bFGF的稳定溶液，其特征在于，所述rh-bFGF的稳定溶液包括以下浓度的组分：rh-bFGF 0.5-1.5g/L、氯化钠0.1-0.5mol/L、表面活性剂0.4-0.6g/L、糖类物质30-40g/L
5.根据权利要求1所述的rh-bFGF的稳定溶液，其特征在于，所述rh-bFGF的稳定溶液的pH值为6.5-8.5。
6.根据权利要求1所述的rh-bFGF的稳定溶液，其特征在于，所述rh-bFGF的稳定溶液的pH值为7-8。
7.根据权利要求1所述的rh-bFGF的稳定溶液，其特征在于，所述表面活性剂为吐温-20或吐温-80。
8.如权利要求1-7任一项所述的rh-bFGF的稳定溶液的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：称取氯化钠、Tris-HCl、表面活性剂和糖类物质加水溶解，溶解后调节pH值，接着加入rh-bFGF溶解，得rh-bFGF的稳定溶液。
9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述调节pH值为采用盐酸或氢氧化钠进行调节。
10.一种rh-bFGF的洗脱液，其特征在于，所述洗脱液包括以下浓度的组分：氯化钠0.05-2mol/L、表面活性剂0.1-1.0g/L、糖类物质10-100g/L、Tris-HCl0.1-50mmol/L。
...【技术特征摘要】
1.一种rh-bfgf的稳定溶液，其特征在于，所述rh-bfgf的稳定溶液包括以下组分：rh-bfgf、氯化钠、表面活性剂、糖类物质和tris-hcl缓冲液；
2.根据权利要求1所述的rh-bfgf的稳定溶液，其特征在于，所述rh-bfgf的稳定溶液包括以下浓度的组分：rh-bfgf 0.1-2g/l、氯化钠0.05-2mol/l、表面活性剂0.1-1.0g/l、糖类物质10-100g/l、tris-hcl 0.1-50mmol/l。
3.根据权利要求2所述的rh-bfgf的稳定溶液，其特征在于，所述rh-bfgf的稳定溶液包括以下浓度的组分：rh-bfgf 0.5-1.5g/l、氯化钠0.1-0.5mol/l、表面活性剂0.3-0.8g/l、糖类物质20-50g/l、tris-hcl 10-30mmol/l。
4.根据权利要求2所述的rh-bfgf的稳定溶液，其特征在于，所述rh-bfgf的稳定溶液包括以下浓度的组分：rh-bfgf 0.5-1.5g/l、氯化钠0.1-0.5mol/l、表面活性剂0.4-0.6g/l、糖类物质30-40g/l...
【专利技术属性】
技术研发人员：梁庆，黄桂海，石俊芳，谭雅超，
申请(专利权)人：朗肽生物制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。