【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物，具体涉及可快速检测非洲猪瘟病毒的引物组及试剂盒。
技术介绍
1、非洲猪瘟(african swine fever，asf)，是由非洲猪瘟病毒(african swinefever virus，asfv)感染引起的一种急性、高度接触性传染病，病程短，死亡率高达100％，是目前对世界养猪业危害最严重的烈性传染病之一。非洲猪瘟在我国动物病原微生物名录中被列为一类动物病原微生物，快速精确地检测对非洲猪瘟的防治至关重要。
2、但是非洲猪瘟的序列gc含量较高，常规rpa引物灵敏度只能到达100拷贝，不能满足非洲猪瘟检测的要求。rpa引物的长度一般为30～35nt，引物过短会影响重组效率，引物过长可能会增加二级结构的可能性。因此，设计高特异、高灵敏度引物是rpa检测试剂应用的限制因素和rpa检测试剂开发的关键前提。
3、综上，如果能开发一种可特异性针对非洲猪瘟病毒的高灵敏度rpa引物组，将具有重要的现实意义。
技术实现思路
1、本专利技术的目的是提供可快速检测非洲猪瘟病毒的引物组及试剂盒。
2、为实现上述专利技术目的，本专利技术所采用的技术方案是：一组引物组，所述引物组包括：正向引物：ccgatcacattacctattattaaaaacatttcc；反向引物：aactaatataaaattctcttgctctggatacg。
3、相应的，与所述引物组对应的探针，所述探针为：gataagtttccatcaaagttctgcagc
4、相应的，所述引物组及所述探针在检测非洲猪瘟病毒中的应用。
5、优选的，检测非洲猪瘟病毒的检测体系包括：10μm的正向引物2.1μl、10μm的反向引物2.1μl、探针0.6μl、荧光基础缓冲液29.5μl、无核酸酶水11.2μl、待检测的dna模板5μl、醋酸镁2.5μl。
6、优选的，将所述检测体系制备为冻干制剂后进行使用，冻干制剂的冻干保护剂包括：海藻糖、甘露醇和甘氨酸。
7、相应的，包含所述引物组及所述探针的试剂盒。
8、相应的，利用所述引物组及所述探针制备的试剂盒。
9、相应的，所述试剂盒在检测非洲猪瘟病毒中的应用。
10、优选的，所述试剂盒中包括正向引物、反向引物、探针、荧光基础缓冲液、无核酸酶水、待检测的dna模板和醋酸镁。
11、优选的，试剂盒中的试剂为冻干制剂，冻干制剂的冻干保护剂包括：海藻糖、甘露醇和甘氨酸。
12、本专利技术具有以下有益效果：本专利技术提供了一种可在室温环境下快速检测非洲猪瘟病毒的引物组。整个检测反应过程无需pcr仪，反应15min即可完成检测，针对非洲猪瘟病毒的特异性强，且灵敏度可达到单拷贝。本专利技术还针对该引物组配套开发了冻干保护剂，在不降低检测效果的情况下，有效扩大使用范围，降低了保存和运输难度。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一组引物组，其特征在于：所述引物组包括：正向引物：CCGATCACATTACCTATTATTAAAAACATTTCC；反向引物：AACTAATATAAAATTCTCTTGCTCTGGATACG。
2.与权利要求1所述引物组对应的探针，其特征在于：所述探针为：GATAAGTTTCCATCAAAGTTCTGCAGCTCT/i6FAMdT/A/idSp/A/iBHQ1dT/ACCCTTCCACTACG3`C3Spacer。
3.权利要求1所述引物组及权利要求2所述探针在检测非洲猪瘟病毒中的应用。
4.根据权利要求3所述应用，其特征在于：检测非洲猪瘟病毒的检测体系包括：10μM的正向引物2.1μL、10μM的反向引物2.1μL、探针0.6μL、荧光基础缓冲液29.5μL、无核酸酶水11.2μL、待检测的DNA模板5μL、醋酸镁2.5μL。
5.根据权利要求3所述应用，其特征在于：将所述检测体系制备为冻干制剂后进行使用，冻干制剂的冻干保护剂包括：海藻糖、甘露醇和甘氨酸。
6.包含权利要求1所述引物组及权利要求2所述探针的试剂盒
7.利用权利要求1所述引物组及权利要求2所述探针制备的试剂盒。
8.权利要求6或7所述试剂盒在检测非洲猪瘟病毒中的应用。
9.根据权利要求8所述应用，其特征在于：所述试剂盒中包括正向引物、反向引物、探针、荧光基础缓冲液、无核酸酶水、待检测的DNA模板和醋酸镁。
10.根据权利要求9所述应用，其特征在于：试剂盒中的试剂为冻干制剂，冻干制剂的冻干保护剂包括：海藻糖、甘露醇和甘氨酸。
...【技术特征摘要】
1.一组引物组，其特征在于：所述引物组包括：正向引物：ccgatcacattacctattattaaaaacatttcc；反向引物：aactaatataaaattctcttgctctggatacg。
2.与权利要求1所述引物组对应的探针，其特征在于：所述探针为：gataagtttccatcaaagttctgcagctct/i6famdt/a/idsp/a/ibhq1dt/acccttccactacg3`c3spacer。
3.权利要求1所述引物组及权利要求2所述探针在检测非洲猪瘟病毒中的应用。
4.根据权利要求3所述应用，其特征在于：检测非洲猪瘟病毒的检测体系包括：10μm的正向引物2.1μl、10μm的反向引物2.1μl、探针0.6μl、荧光基础缓冲液29.5μl、无...
【专利技术属性】
技术研发人员：马海玲，孙晓亮，宋东亮，
申请(专利权)人：翌圣生物科技上海股份有限公司，
类型：发明
国别省市：
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