【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于抗肿瘤药物，具体涉及王不留行蛋白、其提取方法以及在制备抗肿瘤药物中的应用。
技术介绍
1、王不留行(vaccaria segetalis)是一种常见传统中药，又名不留行，奶米，禁宫花等。始载于《神农本草经》，是石竹科植物麦蓝菜的干燥种子。性平，味苦。归肝、胃经。研究发现王不留行化学成分多样，包含三萜皂苷，环肽，黄酮类，氨基酸及多糖，此外还有淀粉、蛋白质等。药理作用十分广泛，具有抑制血管生成、防止骨质疏松、抗肿瘤、抗凝血等功效，临床多用于痛经闭经乳汁不下等妇科疾病，目前，王不留行报道的抗肿瘤活性成分主要集中在醇提物，双糖链皂苷和王不留行环肽等几个方面，其醇提物能抑制肝癌肿瘤细胞生长；王不留行的一些环肽对于肝癌、神经胶质瘤、胃癌、结肠癌等均显示出抗肿瘤活性。
2、目前有关王不留行蛋白质的提取工艺、含量以及药理作用研究非常少。关于王不留行蛋白质提取物的抗宫颈癌和人鳞状上皮舌癌的作用更是未见报道。
技术实现思路
1、为弥补现有技术的空白和不足，本专利技术提供了王不留行蛋白、其提取方法以及在制备抗肿瘤药物中的应用。
2、本专利技术的第一个方面，提供一种王不留行蛋白的提取方法，包括以下步骤：
3、将脱脂后的王不留行粉末以1g:11-12ml的料液比与浓度为0.4-0.5mol/l的nacl溶液混合，超声提取36-37min，然后离心，收集上清液，得所述王不留行蛋白。
4、在本专利技术的一实施例中，所述王不留行粉末的目数为40-60目
5、在本专利技术的一实施例中，脱脂采用石油醚索氏提取脱脂，具体步骤是取适量熟品王不留行粉碎至40-60目，加入石油醚通过索氏提取器，水浴78℃加热脱脂。
6、在本专利技术的一实施例中，超声温度为28-32℃，频率为40-50hz。
7、在本专利技术的一实施例中，离心转速为8000-9000r/min，时间为10-12min。
8、本专利技术的第二个方面，提供上述方法提取得到的王不留行蛋白。
9、本专利技术的第三个方面，提供所述王不留行蛋白在制备抗肿瘤药物中的应用。
10、进一步的，所述肿瘤包括宫颈癌和人鳞状上皮舌癌。
11、在本专利技术的一实施例中，0.2mg/ml以上的王不留行蛋白对hela细胞活性有明显的抑制作用，处理48h的效果较好；在人鳞状上皮舌癌细胞scc9、scc25中发现，经王不留行蛋白处理24h和48h对scc9和scc25细胞的生长增殖具有抑制作用，当其浓度达到0.5mg/ml时具有显著性差异，细胞存活率低；处理48小时时对人鳞状上皮舌癌细胞活性抑制明显。
12、本专利技术的第四个方面，提供一种抗肿瘤药物，以所述王不留行蛋白作为唯一有效成分或有效成分之一。
13、进一步的，所述抗肿瘤药物还包括药学上可接受的载体。所述药学上可接受的载体包括常规的稀释剂(如注射用水、微晶纤维素等至少一种)，填充剂(如甘露醇、蔗糖、乳糖、聚乙二醇、吐温80、山梨醇、薄荷脑、液体石蜡、凡士林、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、羊毛脂、矿物油、dmso等至少一种)，粘合剂(如卡波姆、阿拉伯胶、淀粉、纤维素、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酰胺等至少一种)，崩解剂(如羧甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、羟丙甲纤维素、低取代的羟丙基纤维素等至少一种)，润滑剂(如滑石粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙、固体聚乙二醇、卵磷脂、二氧化硅、微粉硅胶等至少一种)，湿润剂(如丙二醇、甘油、乙醇等至少一种)，稳定剂(如乙二胺四乙酸二钠、硫代硫酸钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、乙醇胺、碳酸氢钠、醋酸钠、烟酰胺、维生素c等至少一种)，渗透压调节剂(如氯化钠、葡萄糖等至少一种)，ph调节剂(如三乙醇胺、氢氧化钠、枸橼酸钠等至少一种)，防腐剂(如三氯叔丁醇、尼泊金酯、羟苯乙酯、苯扎溴铵等至少一种)。
14、进一步的，所述抗肿瘤药物中，王不留行蛋白的含量为0.1～99wt％。
15、本专利技术具有如下有益效果：
16、1、通过本专利技术的提取方法可有效提高王不留行蛋白的产量。
17、2、本专利技术工艺流程简单，设备条件要求低，适合规模化操作。
18、3、本专利技术首次发现王不留行蛋白能够抑制宫颈癌和人鳞状上皮舌癌细胞，因此可用于制备抗肿瘤药物。
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1.一种王不留行蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种王不留行蛋白的提取方法，其特征在于，所述王不留行粉末的目数为40-60目。
3.根据权利要求2所述的一种王不留行蛋白的提取方法，其特征在于，超声温度为28-32℃，频率为40-50Hz。
4.根据权利要求3所述的一种王不留行蛋白的提取方法，其特征在于，离心转速为8000-9000r/min，时间为10-12min。
5.权利要求4所述方法提取得到的王不留行蛋白。
6.权利要求5所述王不留行蛋白在制备抗肿瘤药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述肿瘤包括宫颈癌和人鳞状上皮舌癌。
8.一种抗肿瘤药物，其特征在于，以权利要求5所述王不留行蛋白作为唯一有效成分或有效成分之一。
9.根据权利要求8所述的抗肿瘤药物，其特征在于，还包括药学上可接受的载体。
10.根据权利要求9所述的抗肿瘤药物，其特征在于，所述抗肿瘤药物中，王不留行蛋白的含量为0.1～99wt％。
【技术特征摘要】
1.一种王不留行蛋白的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种王不留行蛋白的提取方法，其特征在于，所述王不留行粉末的目数为40-60目。
3.根据权利要求2所述的一种王不留行蛋白的提取方法，其特征在于，超声温度为28-32℃，频率为40-50hz。
4.根据权利要求3所述的一种王不留行蛋白的提取方法，其特征在于，离心转速为8000-9000r/min，时间为10-12min。
5.权利要求4所述方法提取得到的王不...
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