一种脉冲释放疫苗及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种脉冲释放疫苗及其应用

【技术实现步骤摘要】
一种脉冲释放疫苗及其应用


[0001]本专利技术涉及一种脉冲释放疫苗及其应用，属于医药

。

技术介绍

[0002]新型冠状病毒疫情的爆发使得疫苗的关注提升到了前所未有的高度，疫苗接种仍是预防传染病最有效的方法之一
。
[0003]目前的疫苗按抗原来源大致可以分为三种：减毒活疫苗或灭活疫苗
、
核酸疫苗以及亚单位疫苗
。
减毒活疫苗免疫原性强但安全性低，灭活疫苗安全性高但效力低；核酸疫苗免疫迅速，但其稳定性差
、
储存条件苛刻；亚单位疫苗安全性高，其组成成分为病原体特定蛋白，免疫针对性强，但免疫原性较差，需借助佐剂才能实现免疫作用
。
[0004]三类疫苗虽然各有优势和缺点，但在应对新冠病毒的过程中，各类疫苗单次免疫后，都未在体内获得足够的中和抗体水平，或中和抗体水平短暂达峰后迅速降低，需要进行第二次甚至是第三次加强免疫，才产生与康复者血清相仿的中和抗体水平
。
多次免疫接种已成为对新冠病毒有效预防能力的关键步骤
。
[0005]然而，多针免疫具有极大的局限性，主要包括
①
容易造成免疫脱失，多次免疫需要付出大量的时间
、
经济和管理成本；
②
对于特殊工作人群，如海外派驻人员
、
边境驻守人员等，难以准时完成后续接种；
③
大量人群免疫，所需的疫苗制剂可能会受限于包装材料等的供应
。
对于上述问题，免疫次数的减少都可有效避免
。
此外，
WHO
在其疫苗研究特别专题
(the WHO Special Program for Vaccine Development)
中也指出，理想的疫苗载体应通过单次注射实现有效免疫，尤其是在发展中国家，减少免疫次数可以显著提高疫苗接种率
。
因此，有必要提供一种脉冲释放疫苗
。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的是提供一种实现单针免疫脉冲释放的疫苗，免疫原性强，没有明显毒性并可免疫注射，可在体内有效诱导免疫反应；本专利技术可通过皮下注射
、
皮内注射和肌肉注射的方式对动物进行免疫；本专利技术提供的疫苗的制备条件温和过程简单
。
[0007]本专利技术提供的脉冲释放的疫苗为包覆了聚电解质膜的自愈合多孔微球，所述自愈合多孔微球的内部载有抗原，其中所述自愈合多孔微球由聚酯类聚合物经复乳
‑
乳化溶剂挥发法制备得到多孔微球后，通过聚合物材料自身的自愈合特性制备；聚电解质膜由抗原和相反电荷的聚阳离子或聚阴离子电解质通过静电吸附形成
。
[0008]具体地，所述自愈合多孔微球按照包括如下步骤的方法制备：
[0009]将聚酯类多孔微球加入至所述抗原的溶液中，首先进行孵育，而后加热得到自愈合微球
。
[0010]优选地，采用水或
HEPES
缓冲液配制所述抗原的溶液，所述抗原的质量
‑
体积浓度为1～
20mg/ml
；
[0011]所述孵育的温度为2～
8℃
，时间为6～
24h
；
[0012]所述加热的温度为
37
～
55℃
，时间为6～
24h
，优选高于所述聚酯类聚合物的玻璃化转变温度1～
2℃。
[0013]所述自愈合多孔微球的孔隙率为
35
％～
60
％，孔径为
0.01
～2μ
m
，粒径为1～
100
μ
m
，优选为
10
～
50
μ
m
，更优选为
20
～
40
μ
m
，载有抗原的质量百分比为
0.5
％～
10.0
％
。
[0014]具体地，所述聚电解质膜按照包括如下步骤的方法制备：
[0015]以所述自愈合多孔微球为载体，在其表面以所述聚阳离子电解质或所述聚阴离子电解质和所述抗原为材料通过静电作用力进行逐层自组装；
[0016]优选地，所述逐层自组装的步骤如下：
[0017]将所述载有抗原的自愈合多孔微球加入至所述聚阳离子电解质或聚阴离子电解质的溶液中，进行孵育Ⅰ；然后加入所述抗原的溶液，进行孵育Ⅱ；然后重复上述过程，通常重复5～
15
次；
[0018]所述孵育Ⅰ和所述孵育Ⅱ后均进行离心分离的步骤
。
[0019]优选地，采用下述溶剂配制所述聚阳离子电解质的溶液
、
所述聚阴离子电解质的溶液和所述抗原的溶液：
[0020]水
、PBS、NaCl
水溶液
(0.5M)
或
Hepes
缓冲液
(
如
10mM
，
pH7.4)
；
[0021]所述聚阳离子电解质或所述聚阴离子电解质与所述抗原的质量比为1：1～3；
[0022]荷正电的抗原需要所述聚阴离子电解质共同组装成膜，荷负电的抗原需要聚阴离子电解质共同组装成膜；
[0023]所述聚阳离子电解质可为聚赖氨酸
(PLL)、
聚烯丙基胺盐酸盐
、
聚乙烯亚胺
、
聚精氨酸
、
鱼精蛋白或壳聚糖，与带负电的抗原配合；
[0024]所述聚阴离子电解质可为聚谷氨酸
、
聚苯乙烯磺酸钠
、
聚丙烯酸聚甲基丙烯酸
、
硫酸葡聚糖
、
透明质酸
、
牛血清白蛋白或人血清白蛋白，带正电的抗原配合
。
[0025]所述孵育Ⅰ的温度为2～
8℃
，时间为
10
～
30min
；
[0026]所述孵育Ⅱ的温度为2～
8℃
，时间为
10
～
30min
；
[0027]所述离心分离的速率为
2000
～
6000
×
g
，离心时间为2～
6min。
[0028]本专利技术采用的聚酯类的多孔微球由聚酯类聚合物经复乳
‑
乳化溶剂挥发法制备得到；
[0029]所述聚酯类聚合物为聚乳酸
(PLA)、
丙交酯乙交酯共聚物
(PLGA)
或聚己内酯
(PCL)
；
[0030]所述聚乳酸的特性粘数为
0.2
～
8.0dL/g
，重均分子量为
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种脉冲释放疫苗，为包覆了聚电解质膜的自愈合多孔微球；所述自愈合多孔微球的内部载有抗原；所述聚电解质膜由所述抗原与相反电荷的聚阳离子或聚阴离子电解质通过静电吸附形成
。2.
根据权利要求1所述的脉冲释放疫苗，其特征在于：所述自愈合多孔微球按照包括如下步骤的方法制备：将聚酯类多孔微球加入至所述抗原的溶液中，首先进行孵育，而后加热得到自愈合微球
。3.
根据权利要求2所述的脉冲释放疫苗，其特征在于：采用水或
HEPES
配制所述抗原的溶液，所述抗原的质量
‑
体积浓度为1～
20mg/ml
；所述孵育的温度为2～
8℃
，时间为6～
24h
；所述加热的温度为
37
～
55℃
，时间为6～
24h。4.
根据权利要求1‑3中任一项所述的脉冲释放疫苗，其特征在于：所述聚电解质膜按照包括如下步骤的方法制备：以所述自愈合多孔微球为载体，在其表面以所述聚阳离子电解质或所述聚阴离子电解质和所述抗原为材料通过静电作用力进行逐层自组装
。5.
根据权利要求4所述的脉冲释放疫苗，其特征在于：所述逐层自组装的步骤如下：将所述自愈合多孔微球加入至所述聚阳离子电解质或聚阴离子电解质的溶液中，进行孵育Ⅰ；然后加入所述抗原的溶液，进行孵育Ⅱ；然后重复上述过程5～
15
次
。6.
根据权利要求5所述的脉冲释放疫苗，其特征在于：采用下述溶剂配制所述聚阳离子电解质的溶液
、
所述聚阴离子电解质的溶液和所述抗原的溶液：水
、PBS、NaCl
水溶液或
Hepes
缓冲液；所述聚阳离子电解质或所述聚阴离子电解质与所述抗原的质量比为1：1～3；所述孵育Ⅰ的温度为2～
8℃
，时间为
10
～
30min
；所述孵育Ⅱ的温度为2～
8℃
，时间为
10
～
30min
；所述聚阳离子电解质为聚赖氨酸
、
聚烯丙基胺盐酸盐

【专利技术属性】
技术研发人员：高静，邸金威，高翔，郑爱萍，王金月，王珊，张慧，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：