基于RPA-CRISPR/Cas13a的猴痘病毒核酸检测方法技术

本申请公开了基于RPA‑CRISPR/Cas13a的猴痘病毒核酸检测方法，属于核酸检测技术领域。本申请要解决的技术问题是：如何快速准确的检测或鉴定猴痘病毒。为此本申请提供一种检测猴痘病毒的方法，所述方法包括待测样本中快速裂解的核酸与RPA‑CRISPR/Cas13a检测组合物混合获得RPA‑CRISPR/Cas13a检测体系，孵育后进行检测，根据检测结果确定待测样本是否含有猴痘病毒。本申请提供的方法无需借助复杂仪器设备，操作简易，可实现在15分钟内检出低至0.5拷贝/微升猴痘病毒样本，为猴痘病毒的现场快速高灵敏检测提供有力技术支撑。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及核酸检测，具体涉及基于rpa-crispr/cas13a的猴痘病毒核酸检测方法。

技术介绍

1、mpxv作为一种人畜共患dna病毒，于1970年首次在人体中发现。其传播途径与天花病毒类似，可通过受感染动物咬伤、呼吸道飞沫、皮肤损伤部位密切或直接接触等方式传播。受感染人群往往会出现发烧、头痛、肌肉酸痛、背痛、淋巴结肿大和皮疹等多种症状。大多数轻症患者会在数周内康复，少数重症患者可导致死亡。当前mpxv的检测方法主要包括qpcr、elisa等。然而，上述检测方法均需借助复杂昂贵的仪器设备和熟练的技术操作人员，且往往耗时较长，仅适合在实验室环境下开展。因此，亟待开发简易、快速、高灵敏的mpxv检测新方法。

2、近年来发展的规律间断成簇短回文重复序列 (clustered regularlyinterspaced short palindromic repeats, crispr)技术因其卓越的检测机制、快速的反应效率、优异的检测灵敏度、简易的外部反应条件而被广泛的应用于现场即时检测(point-of-care testing, poct)。本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测猴痘病毒的方法，其特征在于，所述方法包括：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述RPA-CRISPR/Cas13a检测组合物还包括LwaCas13a蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述RPA-CRISPR/Cas13a检测组合物还包括报告RNA。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述RPA-CRISPR/Cas13a检测组合物还包括用于RPA反应的组分。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述RPA-CRISPR/Cas13a检测组合物还包括用于DNA体外转录的组分。...

【技术特征摘要】

1.一种检测猴痘病毒的方法，其特征在于，所述方法包括：

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述rpa-crispr/cas13a检测组合物还包括lwacas13a蛋白。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述rpa-crispr/cas13a检测组合物还包括报告rna。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述rpa-crispr/cas13a检测组合物还包括用于rpa反应的组分。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述rpa-crispr/cas13a检测组合物还包括用于dna体外转录的组分。...

【专利技术属性】
技术研发人员：王升启，荣振，王运祥，韩勇军，陈红，魏红娟，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：