【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医药领域，具体涉及一种磷脂酶a2抑制剂组合物及其微针给药形式治疗高毒化合物所致皮肤损伤中的药物用途。
技术介绍
1、皮肤是人体最关键的屏障器官，它起着隔离外界微生物、有害物质侵入人体的作用，也是人体比表面积最大，暴露几率最高的器官。皮肤的完整性保护了人体健康，皮肤的完整性遭到破坏会导致感染性疾病。在所有的高毒化合物对皮肤的损伤中，氮芥类化合物中芥子气(sulfur mustard，sm)是最为典型的典型代表，其杀伤力强，易于规模化生产。由于芥子气具有易于大规模工业化生产以及难以预防和治疗的特点，至今仍被各国大量储备造成巨大的军事威胁。皮肤是芥子气中毒的最主要靶器官之一，芥子气可以通过皮肤吸收，并通过血液循环将芥子气分布扩散至全身脏器，造成全身性中毒和局部组织损伤，同时伤口愈合缓慢。
2、同时，芥子气中毒呈现多靶点多器官损伤的特点，中毒的机制尚未完全阐明，目前还没有特效治疗药物，仅以对症治疗为主。目前的研究表明，炎症反应是暴露于芥子气之后造成的主要损伤之一，可导致炎症因子如il-1β、il-6和tnf-α等和炎性细胞水平上调。因此，通过调控芥子气染毒后炎症因子的表达，可能是治疗芥子气的有效途径。基于芥子气的军事威胁和毒性特点，着手推进芥子气中毒机制的研究、寻找新型有效的治疗药物具有重要意义。
技术实现思路
1、磷脂酶a2(phospholipase a2)是一类催化磷脂甘油分子二位酰基水解的酶族，主要分为三种类型：分泌型、胞浆型、非钙离子依赖型，其结构特点的
2、磷脂酶a2抑制剂是一类能够抑制磷脂酶活性，抑制磷脂酶生成的化合物，能够发挥抗氧化、抗炎、抗凋亡等各种生物学功能。例如：亚苄基丙酮是革兰氏阴性致病性线虫细菌嗜线虫(xenorhabdus nematophila)的代谢产物，是针对磷脂酶a2(pla2)的酶抑制剂，伐瑞拉迪(varespladib ly315920)是一种有效且具有选择性的分泌型磷脂酶a2(spla2)，对大鼠，兔，豚鼠和人等各种物种血清的spla2活性具有明显的抑制作用。我们近期研究发现，磷脂酶a2抑制剂可以治疗芥子气致皮肤损伤，促进芥子气染毒小鼠伤口创面的愈合。在此之前，磷脂酶a2抑制剂在治疗芥子气皮肤损伤中的作用尚未见任何文献报道。
3、本专利技术第一方面提供了一种组合物，其含有有效剂量的磷脂酶a2抑制剂和药用辅料，使用上述组合物能够有效减轻或改善芥子气等高毒化合物导致的皮肤损伤。本专利技术所述的组合物中药用辅料包括溶剂、填充剂、粘合剂、湿润剂等，所述组合物中的磷脂酶a2抑制剂选自伐瑞拉迪、亚苄基丙酮等的一种或多种；磷脂酶a2抑制剂的百分含量为0.05-1％，优选为0.1-0.3％，更优选为0.1％。
4、具体的，实施例2以及图1的结果显示，在细胞层面，1.5mm cees即可对hacat细胞造成轻度染毒损伤，3mm cees即可对hacat细胞造成重度染毒损伤，而0.625μm-80μm的伐瑞拉迪对细胞无损伤(图2)。实施例4-5以及图3-5的结果显示，在细胞层面，0.625μm-40μm剂量的伐瑞拉迪均能有效对抗1.5mm cees造成的轻度染毒损伤(图3)，1.25μm-40μm剂量的伐瑞拉迪均能有效对抗3mm cees造成的重度损伤(图5)；1.25μm和2.5μm剂量的亚苄基丙酮均能有效对抗1.5mm cees造成的轻度损伤(图4)。实施例6、10以及图6-7、14-15的结果显示，在动物层面，伐瑞拉迪在染毒后第六天就促进伤口创面的愈合，与染毒对照组有显著性差异，到第十二天，伤口创面能达到基本症愈(图6,7)；染毒和磷脂酶a2抑制剂治疗的小鼠皮肤组织经he染色、masson染色、免疫组化染色后观察，芥子气模拟剂cees染毒后的小鼠皮肤组织损伤严重，结构破坏明显，皮肤表层炎性细胞弥漫，有大量渗出物，伐瑞拉迪和亚苄基丙酮皮肤损伤症状减轻，少数皮肤结构破损，部分炎性细胞浸润、少量渗出物，但伐瑞拉迪症状减轻更为明显，其能积极的促进皮肤基质的重建。因此，这些结果表明，伐瑞拉迪可治疗改善芥子气致小鼠皮肤组织损伤，有利于伤口愈合，亚苄基丙酮对芥子气致小鼠皮肤组织损伤也有一定的治疗效果(图14,15)。
5、本专利技术第二方面提供了磷脂酶a2抑制剂亚苄基丙酮及伐瑞拉迪通过皮下注射和微针形式给药相关治疗数据，上述两种给药方式均能够有效减轻或改善芥子气等高毒化合物导致的皮肤损伤，微针形式给药表现出更好的治疗效果。
6、其中，制备上述微针剂型可采用冷冻干燥法、模具法、光固化法等，优选模具法；具体的，将一定量的伐瑞拉迪溶解于溶剂中，加入一定量的天然材料配成合适浓度的溶液，在超声仪中处理一定时间后，得到目标药物溶液；吸取适量上述溶液滴入模具中，将模具放入离心机转子中进行离心处理，离心结束后，去除模具中多余的溶液，滴入适量的基质材料，静止干燥即获得伐瑞拉迪可溶性微针。其中，所述基质材料选自聚乙烯醇(pva)、聚乙烯基吡咯烷酮(pvp)、聚乳酸(pla)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(plga)和羧甲基纤维素钠(cmc-na)、透明质酸钠(ha)等的一种或多种；所述天然材料选自糖类、蛋白质类材料等，糖类材料选自海藻糖、麦芽糖、蔗糖、壳聚糖、透明质酸、淀粉、葡聚糖等；蛋白质类材料选自多肽、胶原蛋白、明胶、丝素蛋白等。其中，药物溶液的浓度为0.05-1％，优选为0.2％；离心处理的转速和时间为1500-3000g，5-10min，优选为3000g，10min。
7、其中，制备上述皮下注射用药物可采用简单的溶解混合制备方法，具体的，取1mg伐瑞拉迪溶于0.1ml dmso中，加0.9ml pbs溶液，超声分散后即可。取1mg亚苄基丙酮溶于0.1ml dmso中，加0.9ml pbs溶液，超声分散后即可。
8、本专利技术第三方面进一步研究了磷脂酶a2抑制剂有效成分能够治疗芥子气等高毒化合物致皮肤损伤的机理，以利于进一步寻求更多更好的治疗药物。根据western blot实验方法检测结果显示(实施例7-8以及图8-11)，与染毒组相比，磷脂酶a2抑制剂伐瑞拉迪组，亚苄基丙酮组皮肤组织中的il-6含量显著降低，表明磷脂酶a2抑制剂可以通过降低il-6炎症因子的表达，从而促进伤口创面的愈合；与染毒组相比，磷脂酶a2抑制剂伐瑞拉迪组，亚苄基丙酮组皮肤组织中的tnf-α含量显著降低，表明磷脂酶a2抑制剂可以通过降低tnf-α炎症因子的表达，发挥抑制芥子气染毒导致皮肤损伤、促进伤口创面的愈合的作用。根据观察皮肤组织中pla2含量的变化(实施例9以及图12-13)，与空白对照组相比，染毒组在染毒48h后皮肤组织中pla2含量显著高表达，表明在染毒后早期pla2有可能起到本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种可用于治疗皮肤损伤的药物组合物，其特征在于，该药物组合物含有活性成分磷脂酶A2抑制剂和药学上可接受的载体和/或辅料，其中活性成分磷脂酶A2抑制剂的百分含量为0.05-1％。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，所述磷脂酶A2抑制剂选自亚苄基丙酮、伐瑞拉迪(Varespladib)中的一种或多种。
3.根据权利要求2所述的药物组合物，所述磷脂酶A2抑制剂优选为伐瑞拉迪。
4.根据权利要求1-3任一项所述的药物组合物，所述皮肤损伤是由高毒化学品引发的。
5.根据权利要求4所述的药物组合物，所述高毒化学品为氮芥类化合物，优选为芥子气和2-氯乙基乙基硫醚(CEES)，进一步优选为2-氯乙基乙基硫醚(CEES)。
6.根据权利要求1-5任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的剂型包括注射剂、片剂、胶囊、丸剂、颗粒剂、搽剂或微针剂。
7.根据权利要求6所述药物组合物，药物组合物的剂型优选为可溶解性微针。
8.根据权利要求7所述的可溶解性微针药物组合物的制备方法，包括以下步骤：将一定量的磷脂
9.根据权利要求8所述的制备方法，其中所述基质材料选自聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)、聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)和羧甲基纤维素钠(CMC-Na)、透明质酸钠(HA)等的一种或多种；所述天然材料选自海藻糖、麦芽糖、蔗糖、壳聚糖、透明质酸、淀粉、葡聚糖、多肽、胶原蛋白、明胶、丝素蛋白等的一种或多种；其中，药物溶液的浓度为0.05-1％，优选为0.2％；离心处理的转速和时间为1500-3000g，5-10min，优选为3000g，10min。
10.权利要求1-7任一项所述的药物组合物或权利要求8-9任一项制备方法获得的药物组合物在制备治疗高毒化学品引发皮肤损伤的药物中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一种可用于治疗皮肤损伤的药物组合物，其特征在于，该药物组合物含有活性成分磷脂酶a2抑制剂和药学上可接受的载体和/或辅料，其中活性成分磷脂酶a2抑制剂的百分含量为0.05-1％。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，所述磷脂酶a2抑制剂选自亚苄基丙酮、伐瑞拉迪(varespladib)中的一种或多种。
3.根据权利要求2所述的药物组合物，所述磷脂酶a2抑制剂优选为伐瑞拉迪。
4.根据权利要求1-3任一项所述的药物组合物，所述皮肤损伤是由高毒化学品引发的。
5.根据权利要求4所述的药物组合物，所述高毒化学品为氮芥类化合物，优选为芥子气和2-氯乙基乙基硫醚(cees)，进一步优选为2-氯乙基乙基硫醚(cees)。
6.根据权利要求1-5任一项所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的剂型包括注射剂、片剂、胶囊、丸剂、颗粒剂、搽剂或微针剂。
7.根据权利要求6所述药物组合物，药物组合物的剂型优选为可溶解性微针。
8.根据权利要求7所述的可溶解性微针药物...
【专利技术属性】
技术研发人员：王永安，杨军，曹文缤，王淋，隋昕，骆媛，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：
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